微柱凝胶技术用于新生儿溶血病检测中的价值分析

任俊

[摘要] 目的 对微柱凝胶技术用于新生儿溶血病（HDN）检测中的价值进行探讨分析。方法 选取本中心2013年1月～2017年1月期间收集的80份HDN患儿血液标本，以此作为本次研究的观察对象，使用传统试管法和微柱凝胶技术分别进行抗体放散试验、抗体游离试验及直接抗人球蛋白试验，对所取得了检测结果进行对比。结果 通过对80份HDN患儿血液标本的检测，采用试管法进行抗体放散试验检测出67份（83.75%）呈阳性，进行抗体游离试验检测出62份（77.50%）呈阳性，进行直接抗人球蛋白试验检测出54份（67.50%）呈阳性，而采用微柱凝胶技术进行抗体放散试验检测出76份（95.00%）呈阳性，进行抗体游离试验检测出72份（90.00%）呈阳性，进行直接抗人球蛋白试验检测出70份（87.50%）呈阳性，试管法和微柱凝胶技术在三种试验中的检测阳性率差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 临床针对新生儿溶血病可采用微柱凝胶技术进行检测，其具有较高的敏感性，结果稳定、操作简单，能为临床治疗提供有利依据，具有较高的临床应用价值，值得推广使用。

[关键词]新生儿溶血病；微柱凝胶技术；检测价值

[中图分类号] R722.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）14-49-03

Value analysis of microcolumn gel technique in detection of hemolytic disease of the newborn

REN Jun

Machine Generated Branch， Guangzhou Blood Center， Guangzhou 510095， China

[Abstract] Objective To explore the value of microcolumn gel technique for hemolytic disease of the newborn （HDN）. Methods 80 HDN children with blood samples from January 2013 to January 2017 in our center were collected as the research object of the observation. The traditional tube method and microcolumn gel technique were used to perform antibody elution test， free antibody test and direct antiglobulin test respectively. The test results were compared. Results Among the HDN of 80 children with blood samples for antibody detection， elution test detected 67 samples by test tube method （83.75%）. Positive antibody free test showed 62 （77.50%） were positive. For direct antiglobulin test， 54 samples （67.50%） were positive， while using microcolumn gel technique for antibody elution test，76 samples （95%） were positive. For antibody free test detected 72 copies （90%） positive. Direct antiglobulin test detected 70 samples （87.50%） were positive in the test tube method and microcolumn gel technique in three test in the detection positive rate difference （P<0.05）. Conclusion The clinical for hemolytic disease of the newborn can be used Micro column gel technology for detection. It has high sensitivity， stable results， and simple operation. It can provide a favorable basis for clinical treatment. It has high clinical value. It is worthy of popularization and application

[Key words] Hemolytic disease of the newborn； Microcolumn gel technique； Detection value

新生兒溶血病是指由于母婴血型不合，母亲体内产生与胎儿血型抗原不配的血型抗体，这种抗体通过胎盘进入到胎儿体内引起同族免疫性溶血，母婴Rh血型系统和ABO血型系统的血型不合是导致新生儿溶血病的主要原因[1-2]。其临床常表现为黄疸、贫血及核黄疸等，严重影响到患儿的生活质量及生长发育，甚至危及患儿生命安全，因此临床及早诊断治疗十分关键[3]。临床对HDN的诊断主要是通过血型血清学实验进行，而传统的检测方法主要是采用试管法，但其检测时间长、步骤繁杂等缺点会对患儿病情检测造成不利影响[4]。微柱凝胶技术是近年来开展的新型检测技术，诸多研究证实其比传统试管法更具优势，在新生儿溶血病检测中逐渐应用广泛[5]。本研究亦对微柱凝胶技术在新生儿溶血病中的检测价值进行探讨分析，现将具体情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用随机抽选法从本中心2013年1月～2017年1月期间收集的80份HDN患儿血液标本，以此作为本次研究的观察对象，使用传统试管法和微柱凝胶技术分别进行抗体放散试验、抗体游离试验及直接抗人球蛋白试验。其中80份血液标本分别来自80例患儿，其中包括男43例，女37例；年龄0.5～7d，平均（3.8±1.2）d；病程8～76h，平均（42±14）h；患儿血型A型和B型均为40例，母亲均为O型血，Rh均为阳性。患儿主要表现为黄疸、贫血等症状。所有患儿均符合HDN诊断标准确诊为HDN患儿。

1.2 检测方法

使用仪器为FYQ免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清学多用离心机（长春博研科学仪器有限责任公司）、日本久保离心机及恒温水浴箱。在鉴定新生儿及其母亲ABO和Rh血型后，分别采用试管法和微柱凝胶技术进行抗体放散试验、抗体游离试验及直接抗人球蛋白试验三种试验。

试管法：将患儿的血液样本的血清和红细胞进行离心分离，采用0.9%氯化钠溶液将红细胞进行3次清洗并配成5%浓度的悬液。取2滴广谱抗人球蛋白试剂加1滴悬液进行离心处理，对直接抗人球蛋白试验的结果进行观察。取3支试管标记A、B、O血型，在每支試管中放入2滴放散液和患儿的血清，并对应血型放入1滴相应的红细胞，在37℃的温度中孵育1h后采用0.9%氯化钠溶液将红细胞进行3次清洗，然后放入2滴抗人球蛋白试剂进行离心处理，对抗体放散试验、抗体游离试验的结果进行观察。

微柱凝胶技术：采用0.8%氯化钠溶液将红细胞进行3次清洗，取50μL加入凝胶卡中并进行离心处理，对直接抗人球蛋白试验的结果进行观察。取放散液和患儿血清50μL分别加入凝胶卡中，并按照标记血型对应加入红细胞悬液，在37℃的温度中孵育15min后离心处理10min，对抗体放散试验、抗体游离试验的结果进行观察。

1.3 统计学处理

本研究数据采用SPSS19.0进行统计学处理，计量资料以（）表示，采用t检验，计数资料采用百分比（%）表示，采用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

通过对80份HDN患儿血液标本的检测，采用试管法进行抗体放散试验检测出67份（83.75%）呈阳性，进行抗体游离试验检测出62份（77.50%）呈阳性，进行直接抗人球蛋白试验检测出54份（67.50%）呈阳性，而采用微柱凝胶技术进行抗体放散试验检测出76份（95.00%）呈阳性，进行抗体游离试验检测出72份（90.00%）呈阳性，进行直接抗人球蛋白试验检测出70份（87.50%）呈阳性，试管法和微柱凝胶技术在三种试验中的检测阳性率差异明显（P<0.05）。

详见表1。

3 讨论

HDN是指由于母婴血型不合，母亲体内产生与胎儿血型抗原不配的血型抗体，这种抗体通过胎盘进入到胎儿体内引起同族免疫性溶血，母婴Rh血型系统和ABO血型系统的血型不合是导致新生儿溶血病的主要原因，而在这两种血型系统中以ABO血型系统的血型不合引起HDN最为常见[6-7]。

临床对HDN的诊断主要是通过血型血清学实验进行，传统检测HDN的方法主要是采用试管法进行检测，但由于试管法操作步骤繁多，耗时较长，重复性较差且灵敏度低，使其不利于对结果的判断，容易出现漏检情况，导致试管法在临床应用性不高[8-10]。

近年来随着微柱凝胶技术的开展，引起了临床学者们的重视，在经过诸多研究之后其检测效果受到广泛认同，并逐渐在临床开始推广[11-12]。相关研究显示，微柱凝胶技术在HDN的检测中具有灵敏度高、操作简单、重复性好的特点，其检测稳定，能够准确的对结果进行判断，对患儿血液中免疫性IgG抗体和效价能够更准确的检测[13-15]。

本研究通过对本中心2013年1月～2017年1月期间收集的80份HDN患儿血液标本进行研讨，使用传统试管法和微柱凝胶技术分别进行抗体放散试验、抗体游离试验及直接抗人球蛋白试验，结果显示，对80例HDN患儿血液样本的检测后，采用试管法进行抗体放散试验检测出67份（83.75%）呈阳性，进行抗体游离试验检测出62份（77.50%）呈阳性，进行直接抗人球蛋白试验检测出54份（67.50%）呈阳性，而采用微柱凝胶技术进行抗体放散试验检测出76份（95.00%）呈阳性，进行抗体游离试验检测出72份（90.00%）呈阳性，进行直接抗人球蛋白试验检测出70份（87.50%）呈阳性，试管法和微柱凝胶技术在三种试验中的检测阳性率差异明显。

可看出微柱凝胶技术的三种试验检测出阳性率显著高于试管法，充分证明了其临床检测效果。结果还显示，抗体放散试验是敏感度最高的试验，可用于HDN检测中的确诊。而直接抗人球蛋白试验灵敏度最低，可能是由于新生儿ABO抗原的发育还不完全，抗原位点少，不能与抗人球蛋白产生明显凝集反应，有足够IgG抗体分子的红细胞又大部分被溶解。

综上所述，临床在新生儿溶血病的检测中可采用微柱凝胶技术进行检测，其敏感度高，操作简单方便，能有效为溶血病患儿的治疗提供准确、有利的依据，具有较高的临床应用价值，值得推广使用。

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（收稿日期：2017-04-14）