组织胚胎学实验教学中浦肯野纤维组织切片的制作

聂竹兰　廖秋萍　魏杰

摘要 为了提高组织胚胎学课程的教学质量，笔者以现代教育思想为指导，以多年的教学经验为基础，介绍了制作实践教学中缺少的浦肯野纤维组织切片的方法，以丰富实践教学资源，让学生形象地掌握普通心肌纤维与浦肯野纤维的差别，从而提高实验教学质量和教学效果。

关键词 浦肯野纤维；组织切片；组织胚胎学；实验教学

中图分类号 G642；Q954.56+1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）13-0280-01

捷克的科学家Purkinje于1839年在绵羊心脏心室的心内膜下发现了灰色、扁平、胶状的纤维网（后称浦肯野纤维），1906年Tawara通过研究将这些纤维网称为心脏的传导系统，包括窦房结、房室结、希氏束、左右束支及其分支组成，担负着心脏起搏和传导冲动的功能，保证心房心室协同收缩[1-2]。

组织胚胎学是农业高等院校水产养殖学、动物科学、动物医学等专业的基础课程，组织学部分主要研究动物体的组织结构与功能，胚胎学部分主要研究动物体器官系统的发生与发育规律。组织胚胎学实验是组织胚胎学的重要组成部分。它是在理论讲授的基础上，通过实验观察，使学生掌握动物体的微细结构，并能从细胞、组织和器官3个层次上对鱼类有机体的形态结构与功能有一个总体认识。通过胚胎实验课，使学生掌握普通胚胎学基础知识及动物发生的一般规律。通过实验特别是1周的综合实验，使学生掌握生物绘图、切片、染色等基本技能或能力，为以后的生产实践和科学研究打下坚实的基础。目前，实验教学以组织切片为主，因而准备好动物体的每个器官系统的组织切片至关重要。近年来，组织胚胎学的教学学时大幅缩减，出现“学时少，内容多”的现象，教学中亦缺少好的示教片。这些问题严重影响学生学习本课程的兴趣与自觉性，教学质量堪忧。本文旨在介绍为学生提供普通心肌纤维与浦肯野纤维的组织切片的方法，让学生形象地掌握普通心肌纤维与浦肯野纤维的差别[3-5]。

1 实验方法

取健康猪心1颗，购自阿拉尔市塔里木大学农贸市场。取心室左右束支大小适中的组织固定于波恩氏液中36 h，梯度酒精脱水，二甲苯透明处理，石蜡包埋，连续切片，HE染色，中性树胶封片，在Nikon显微镜下观察拍照。载玻片的清洗：将新的载玻片放入洗衣粉或肥皂水中煮沸20 min；玻片上的污物用热水洗去；用自来水反复冲洗若干次，再用蒸馏水冲洗3遍，随后保存于无水乙醇中；切片前用眼镜布擦干载玻片上的无水乙醇备用。

2 实验结果

组织学观察可见心内膜由内皮、内皮下层、心内膜下层组成。内皮为单层扁平上皮，细胞界限不清，细胞核呈椭圆形，胞质较少，核的部位隆起；内皮下层是由一层较薄的结缔组织组成；心内膜下层则由疏松结缔组织组成，其中含有丰富的血管、神经和浦肯野纤维。浦肯野纤维（图1～4）是心脏传导系的分支，是一种特殊的心肌纤维，纤维短而粗，细胞中央有1～2个核，胞质内含丰富的糖原和线粒体，肌原纤维少，HE染色时，胞质浅淡。浦肯野纤维与普通心肌纤维相连，将冲动快速传到心室各部。心肌膜由大量心肌纤维组成。比较心内膜下层与心肌膜的肌纤维可见，心内膜下层的浦肯野纤维的形态不同于心肌膜的普通心肌纤维，浦肯野纤维的细胞较普通心肌纤维短，但是比普通心肌纤维要粗。

3 实验效果

以多年教学经验为基础，本教学团队借鉴“看图、辨图、画图”的图形教学法，该方法突显了图片在学习中形象、直观的作用，培养学生的观察能力和描述能力，尤其在实验教学中，围绕图形进行互动教学，效果明显。好的教学方法需要与之匹配的教学资源。组织胚胎学实验教学在多媒体互动教室上课，授课教师先利用实验课件向大家讲解循环系统中心脏的结构，以心室为例，由3层组成：心内膜、心肌膜及心外膜。通过幻灯图片展示心内膜的3层结构：内皮、内皮下层及心内膜下层。先低倍镜下查看浦肯野纤维与普通心室肌（图1、2），再换高倍镜比较二者的区别。理论讲解完毕后，要求学生用显微镜观察内皮下层中浦肯野纤维与心肌膜层中普通心肌纤维，并比较二者的特征。如图1～4所示，无论纵切还是横切，浦肯野纤维均粗大，普通心肌纤维均纤细，学生通过切片观察更形象地掌握2种心肌纤维的区别。在以往的循环系统实验教学过程中，学生所观察的切片心脏的心内膜层中没有浦肯野纤维，在实验报告的绘图环节，学生无法绘出浦肯野纤维的组织结构，而观察了含有浦肯野纤维的切片后，学生能把握要点，绘出完整的心脏切片图，体现出图形教学法的重要性的同时，也强调了教学资源的重要性。与此同时，学生在掌握浦肯野纤维与普通心肌纤维的区别之后，结合浦肯野纤维的分布特点，把握循环系统中心脏的组织结构与功能，为今后相关专业课的学习奠定坚实基础[6-7]。

4 参考文献

[1] JAY V.The extraordinary career of Dr.Purkinje[J].Arch Pathol Lab Med，2000，124：662.

[2] TAWARA SED.Das reizleitungssystem des saugetierherzens[M].Jena：Gustav Fischer，1906.

[3] 廖秋萍，石長青，饶丽娟.石蜡切片制作技术的探讨[J].塔里木大学学报，2006，18（1）：69-70.

[4] 高岚，刘建春.图形教学在组织学与胚胎学中的应用[J].山西医科大学学报（基础医学教育版），2007，9（6）：616-618.

[5] 李霞.水产动物组织胚胎学[M].北京：中国农业出版社，2005.

[6] 刘建春，高岚，梁锐，等.“以图为中心”的互动教学法在组织学实验教学中的应用[J].中医教育，2008，27（6）：38-41.

[7] 吴爽，伍思琪，贾琴，等.组织胚胎学课程实验教学方法的探索及体会[J].解剖学研究，2012，34（1）：70-71.