复方中药制剂对鸡传染性喉气管炎的免疫增强作用

邓瑞强

(山西农业大学信息学院,山西太谷 030800)

复方中药制剂对鸡传染性喉气管炎的免疫增强作用

邓瑞强

(山西农业大学信息学院,山西太谷 030800)

通过对人工感染的蛋雏鸡进行药物治疗，来研究复方中药制剂对其免疫影响。发现复方中药制剂对人工感染蛋雏鸡的免疫功能有增强作用，高剂量治疗组和中剂量治疗组的法氏囊指数极显著高于感染对照组（P＜0.01），高剂量治疗组的法氏囊指数与中剂量治疗组差异不显著（P＞0.05）。治疗组的免疫球蛋白IgG数较感染对照组和健康组显著增高（P＜0.05），而高剂量治疗组与中剂量治疗组差异不显著（P＞0.05）。由此说明“温必清”可以提高对病鸡传染性喉气管炎的免疫功能。

复方中药 鸡传染性喉气管炎 免疫

随着养殖业的高速发展，畜禽疾病给养殖户带来很大的经济损失，尤其是鸡传染性喉气管炎。目前，主要依靠接种弱毒疫苗和灭活疫苗进行预防，虽然起到了较好效果，但弱毒疫苗毒力普遍偏强，应用后机体反应强烈。因此，急需研制安全高效的新型疫苗以达到防治ILT的目的。

鸡传染性喉气管炎临床上以呼吸困难、咳嗽、常咳出带血渗出物为特征。典型病理变化为喉部和气管黏膜肿胀、充血和出血。气管腔内有带血的黏液，有的有酪状渗出物，在气管和喉头形成管套，且易剥离，病的早期可见核内包涵体。

本病在易感鸡群内传播很快，感染率可达90%～100%；病死率为5%～70%，平均在10%～20%之间。在产蛋高峰期鸡群的病死率较高。

现代研究表明，中草药具有安全无害、无抗药性、无残留、无毒副作用等特点，同时，还能明显地提高家禽的生产性能，改善肉蛋品质，从而显著增加了养禽业的经济效益，充分显示了中草药在防治禽病上的优势。中草药的有效成分对动物胸腺、脾脏和法氏囊的发育有影响；促进抗体的形成，提高抗体的抗体水平及机体免疫力；促进血清抗体效价上升和延长血清抗体时限；有的中草药可参与补体激活及提高补体水平。还可促进细胞免疫，提高吞噬细胞的流行性和淋巴细胞的功能。如多糖类补益中药具有整体的协调功能，其中以神经、内分泌与免疫调节网络为主，在促进细胞免疫，提高非特异性免疫功能方面有显著作用。另外，一些中草药或其活性成分对机体免疫功能呈双向调节作用，即剂量依赖性和功能依赖性双向作用。

依据传染性喉气管炎的主要临床表现，从中医角度分析为湿热蕴结下焦、膀胱气化失利、排尿不畅、尿液受热煎熬，其中杂质化为沉积物。治宜清热解毒，降火利湿。运用中草药为防治鸡病毒性疾病提供了新途径，本实验拟在前期研究基础上深入研究复方中药对人工感染蛋雏鸡传染性喉气管炎ILTV免疫功能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

选用14日龄的非免疫蛋雏鸡150只，进行适应性观察饲养7d后随机分五组再进行实验。

1.1.2 实验毒株

ILT实验毒株由山西农业大学微生物实验室分离。

1.1.3 实验药物

复方中药制剂，主要成分为大青叶、党参、苦杏仁、前胡和黄芩等，为山西农业大学动物医学系实验兽药总厂生产。

1.1.4 实验试剂

淋巴细胞分离液，太原力普科贸有限公司；RPMI1640培养基（10×1L），Gibco进口分装；台盼蓝，太原力普科贸有限公司；植物凝集素（PHA），SigmaL分装；大肠杆菌脂多糖（LPS），SigmaL进口分装；小牛血清，杭州四季青有限公司；肝素钠（粉末）；噻唑蓝（MTT），SigmaL进口分装；Hepes[N-双（2-羟乙基）哌嗪-N-2-（乙磺酸）]，SigmaL进口分装。

1.2 实验方法

1.2.1 ILTV种毒分离复壮与感染液的制备

将病鸡的气管组织用生理盐水冲洗三次，放在无菌研钵中剪碎后加入石英砂研磨，随后加入5倍量的生理盐水（内含200 200u/ml链霉素和200u/ml青霉素）制成乳剂后移入灭菌的离心管中，冻融三次，2000r/min离心，备用。

ILTV实验毒株使用前用鸡胚复壮，经尿囊腔接种于十日龄SPF鸡胚，每胚0.1ml。37℃培养36～40h，收集鸡胚尿囊液，加入青霉素1000IU/ml，链霉素1mg/ml，以2000r/min离心15min，取上清液作为病毒感染液备用。其EID50为10-6，攻毒时用100 EID50。

1.2.2 实验分组及处理

将21日龄非免疫蛋雏鸡淘汰弱鸡、病鸡，随机分为5组，每组30只，即感染对照组、健康对照组、高剂量治疗组、中剂量治疗组和低剂量治疗组。健康对照组不攻毒不给药。感染对照组和高剂量、中剂量、低剂量治疗组在21日龄全部攻毒，感染对照组只攻毒不给药，高剂量、中剂量、低剂量治疗组分别进行如下方法攻毒处理。在鸡群出现典型临床症状后分别按照表1中的治疗方案给药5～6d。

表1 实验分组及处理方法

1.2.3 样品的采集

分别于攻毒后14、21、28d时清晨从每组中随机抽取7只鸡空腹称重，之后于心脏采血制备血清，保存待测；采血后进行剖检，取出法氏囊、脾脏，用滤纸吸净表面水，称重。

1.2.4 指标的检测

（1）脏器指数计算公式为：

法氏囊指数（mg/g）=法氏囊湿重（mg）/体重（g）

脾指数（mg/g）=脾脏湿重（（mg）/体重（g）

（2）运用免疫比浊法测定血清IgG。

2 结果与分析

2.1 攻毒后14、21、28d时各组法氏囊指数、脾脏指数（见表2、3）

表2 攻毒后14、21、28d时各组法氏囊指数

表3 攻毒后14、21、28d时各组脾脏指数

由表2可以看出法氏囊指数随天数的增长而增加，用药后高剂量治疗组和中剂量治疗组的法氏囊指数显著高于感染对照组（P＜0.01），高剂量治疗组的法氏囊指数与中剂量治疗组差异不显著（P＞0.05），但显著高于低剂量治疗组（P＜0.05），低剂量治疗组显著高于感染对照组（P＞0.05）。在攻毒后28d，高剂量治疗组和中剂量治疗组的法氏囊指数接近于健康对照组。

由表3可以看出用药后治疗组的脾脏指数较感染对照组显著下降，健康对照组较其极显著下降。但脾脏指数随天数的增加而增加。

2.2 攻毒后14、21、28d时各组鸡血清中免疫球蛋白总量（见表4）

表4 攻毒后14、21、28d时血清中lgG数

由表4可见，对于IgG，攻毒后第14d各组的抗体相近，随后随天数的增长各组均上升，但健康组和治疗组较感染对照组上升迅速。治疗组较健康组增长极显著（P＜0.01），治疗组中高剂量治疗组与中剂量治疗组差异不显著（P＞0.05），但显著高于低剂量治疗组（P＜0.05）。

3 讨论

3.1 投药后机体应答能力的变化

复方中药制剂的主要成分为大青叶、党参、苦杏仁、前胡和黄芩等，此次实验证明本组方在治疗与免疫方面均对家禽有益。从表2、3可见，此药可提高法氏囊指数，这与其他实验人员的实验结果相同，但脾脏指数下降，这与其他实验结果不同。脾脏是抗体形成的主要淋巴器官，虽然用药组脾指数下降，但其抗体形成能力提高，这种现象提示可能是由于胸腺、法氏囊或其他淋巴器宫发育良好而脾脏发生代偿性退化的结果。这一结果说明并不是能提高免疫功能的中药组方就一定能提高所有免疫器官的重量。

从表4可见，本组方可提高机体的体液免疫机能，用药后IgG免疫球蛋白量有所提高。治疗组比感染对照组上升的较早且较快，这可能是因为这两组同时攻毒时，治疗组在给药的情况下其免疫球蛋白总量产生的最高，这充分说明投药增强了机体的应答能力，使机体受到抗原刺激时能快速动员机体的免疫系统，达到最佳水平。

从表2、表3和表4的实验数据可以看出，该试验所拟中药组方对鸡传染性喉气管炎具有一定的治疗作用。经该实验数据统计，复方中药制剂中剂量的治愈率高达96.6%。

3.2 制剂中各成分对传喉的影响

复方中药制剂的主要成分为大青叶、党参、苦杏仁、前胡和黄芩等，是根据我国中兽医标本兼治、辨证论治的原则，精心筛选多味中草药，采用现代制药技术研制而成的专门用于治疗鸡传染性喉气管炎的药物。它具有清热解毒、扶正固本、补中益气和止咳平喘的功能，以达到健脾益气、降气祛痰、利水止泻的功效。大青叶为清热解毒药，均有抗病毒的功效入心、胃、肝经，既走气分，又入血分，对痢疾杆菌副大肠杆菌有较强的抑制作用；前胡为清化热痰药，入肺、肝经，具有降气祛痰，宣散风热的功效，有显著增加呼吸道分泌作用，祛痰作用显著，常用于治疗气管炎；苦杏仁为止咳平喘药，入肺、大肠经，具有止咳平喘，润肠通便的功效，服用小剂量苦杏仁，其所含苦杏仁甙会在体内慢慢分解，逐渐产生少量氢氰酸，能轻度抑制呼吸中枢，使呼吸加深，痰液易于排出，从而达到镇咳平喘的作用；党参为补气药，入脾、肺经，是治疗里虚症的要药，对神经系统有兴奋作用，能增强机体抵抗力，具有补中益气，健脾益肺的功效，并能作用于消化系统，对肠道细菌有一定的抑制作用。由于党参功效与人参相差不远，故常代人参入药使用。黄芩性味苦、寒，入心、肺、胆、大肠经，有泻实火、除湿热、止血、安胎的功效。有些中草药能促进抗体的生成和抗体水平增加，如淫羊藿能促进抗体生成。人参皂甙与黄芪皂甙都有促进抗体的生成、促进抗原抗体反应的作用。黄芪对正常机体的抗体生成功能有明显促进作用。此外，影响免疫作用的中草药方剂还有很多如：补中益气汤、四君子汤、八珍汤、桂枝汤、柴胡汤、六味地黄汤等对免疫反应具有不同程度的促进作用，表明它们可不同程度地刺激细胞免疫及抗体生成反应。

综上所述，该复方中药制剂在鸡传染性喉气管炎的免疫方面的效果显著，但仍有待于其他理论数据的观测验证。本组方可提高机体的体液免疫机能，这充分说明投药增强了机体的应答能力，使机体受到抗原刺激时能快速动员机体的免疫系统，达到最佳水平。所以应用中草药治疗畜禽某些疾病还是能起到很好的效果，中药对于畜禽疾病的预防和治疗方面有很大的潜力。

[1] 常维山，蔡宝样，牛钟相.肾型传染性喉气管炎病毒的致病性研究[J].中国兽医科技，1999，（1）：24-25.

[2] 王红宁.禽传染病诊断防治新进展[M].中国农业出版社，1998.

[3] 钱大方，轩玉峰.常见鸡病中西医结合防治[M].北京：中国农业出版社，1999.

邓瑞强（1983-），男，山西榆次人，硕士学历，山西农业大学信息学院远景学院副院长，近年来主要从事兽医流行病学相关研究。