ER、PR、Ki-67表达与子宫内膜癌发生的相关性研究

宁 静，罗 娜，郑冬梅

（解放军总医院海南分院妇产科，三亚 572013）

ER、PR、Ki-67表达与子宫内膜癌发生的相关性研究

宁 静，罗 娜，郑冬梅

（解放军总医院海南分院妇产科，三亚 572013）

目的：探究雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、Ki-67表达与子宫内膜癌发生的关系。方法：随机选取2013年1月～2015年10月期间到院就诊并确诊为子宫内膜癌的50例患者为观察组（Group A）。同期随机选择我院接收的100例患者样本，其中50例为子宫内膜非典型增生病变（Group B）以及50例患者病检结果为正常增生期子宫内膜者（Group C）作为对照。分别采用免疫组化MaxVisionTM2/HRP染色法对三组研究对象组织中ER、PR、Ki-67进行检测，对其表达水平及其临床意义进行分析，最后统计分析所有结果。结果：癌变组中ER、PR表达明显低于非典型增生组和正常增生期内膜组（对照组），且非典型增生组显著低于正常增生期内膜组。Ki-67在癌变组中表达最为明显，在正常增生期子宫内膜组表达量最少，两组比较具有统计学意义。结论：ER、PR、Ki-67表达情况与子宫内膜癌的发生发展具有密切的关联性，能够明显反应子宫内膜癌的病变程度及预后，可将其作为子宫内膜癌临床靶向治疗的重点研究方向。

ER；PR；Ki-67；子宫内膜癌

子宫内膜癌又称宫体癌，是临床诊疗中较为常见的一种女性生殖道恶性肿瘤，而绝经后的妇女则是这一疾病的主要发病群体，目前，临床上对子宫内膜癌的治疗方式主要为手术治疗，为了更有效地选择适合的治疗方案，需要对子宫内膜癌的肌层浸润深度及淋巴结转移情况进行精确判断，早期发现及早期治疗是达到子宫内膜癌良好治疗效果的关键，这就对该病的诊断方面提出了更高的要求［1］。临床研究表明，子宫内膜癌的发生与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、Ki-67表达水平具有密切关联［2］。基于此，本研究采用免疫组化方法对子宫内膜癌及其病变组织进行了ER、PR、Ki-67联合检测，进一步探究了子宫内膜癌组织病变与ER、PR、Ki-67表达的关系。现报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料所选子宫内膜癌患者均为2013年10月～2015年10月期间到我院就诊并经细胞学或病理诊断确诊的患者，选取标准［4］：①所有患者均经常规HE染色病理确诊为子宫内膜癌；②均具有完整的临床记录及病理资料；③所有患者均知情同意；将术前接受放化疗等抗癌治疗、有淋巴瘤、间质瘤等其他恶性肿瘤、平滑肌瘤、不典型增生等良性肿瘤等的患者排除在外。50例子宫内膜癌患者均为女性，年龄在26～85岁之间，平均年龄为（62.45±11.35）岁。在年龄分布方面，23例患者<60岁，27例患者≥60岁；在肿瘤径方面，40例患者≤5cm，10例患者>5cm；在子宫内膜癌病理分型方面，12例患者为高分化腺癌，14例患者为中分化腺癌，20例患者为低分化腺癌，4例患者为粘液腺癌及印戒细胞癌；在肿瘤浸润深度方面，7例患者为肌层内，43例患者为肌层-浆膜外；在局部淋巴结转移方面，37例患者有，17例患者无；在子宫内膜癌临床TNM分期方面，15例患者为Ⅰ期，30例患者为Ⅱ期+Ⅲ期，5例患者为Ⅳ期。所有标本均经固定及石蜡包埋，固定过程中均采用40g/L中性甲醛。

1.2 方法病理标本经石蜡包埋处理，并连续切片，切片厚度在4um左右，切片采用ER、PR、Ki-67免疫组化染色观察，免疫组织化学染色：1）切片脱蜡及水化。脱蜡前在室温下对组织切片进行1h的放置。在二甲苯中对组织切片进行10min的浸泡，将二甲苯更换掉后再进行10min的浸泡。在95%乙醇中进行2次浸泡，每次5min。在80%乙醇中进行3min的浸泡。用pH为7.4的PBS进行3次冲洗，每次3min；2）修复抗原。应用高压进行2min热修复，pH值为6.0；3）将50μL3%的过氧化氢加入到每张切片上，室温下进行10min的孵育，以将内源性过氧化物酶的活性阻断。用PBS进行3次冲洗，每次3min，将PBS液除去；4）将50μL的第一抗体加入到每张切片上，在4℃的温度下过夜；5）用PBS进行3次冲洗，每次3-5min，将PBS液除去，将50μL即用型MaxVisionTM2/HRP 试剂加入到每张切片上，室温下进行30min的孵育，用PBS进行3次冲洗，每次3min；6）将PBS液除去，将100μl配置后的DAB显色液滴加到每张切片中，进行3-5min的作用，显微镜下观察；7）冲洗将显色终止，冲洗过程中用自来水；8）苏木精、PBS分别复染、冲洗返蓝；9）脱水干燥，在此过程中用梯度酒精，然后透明，在此过程中用二甲苯，最后封固、镜检，在此过程中用中性树胶；10）将阴性对照设定为PBS液，用其替代一抗。将阳性对照设定为已知的阳性切片。

2 结果

2.1 ER、PR、K i-67在不同病理组织中的表达癌变组患者病理组织中ER、PR表达较非典型增生组低（P<0.05），非典型增生组较正常增生期子宫内膜组低（P<0.05）；Ki-67在子宫内膜癌组中的表达最多，在非典型增生组中次之，在正常增生期宫内膜组中表达最少，各组之间比较具有统计学意义（P<0.05）。见表1：

表1 不同组织中ER、PR、Ki-67的表达情况

2.2 子宫内膜癌ER、PR、K i-67表达与临床病理特征的关系ER阳性表达率、ER阳性表达率在子宫内膜癌病理分型、肿瘤浸润深度方面具有统计学意义（P<0.05）；ER阳性表达率、ER阳性表达率在TNM分期和淋巴结转移方面无统计学意义（P>0.05）。Ki-67阳性在子宫内膜癌病理分型、TNM分期方面具有统计学意义（P<0.05）。见表2：

表2 不同病理组织中ER、PR、Ki-67表达

3 讨论

子宫内膜癌作为一种具有极高恶性度的妇科癌症类型，超过2/3患者在临床诊断确诊时已经到了肿瘤晚期［3］。世界卫生组织（WHO）统计数据表明，在我国，子宫内膜癌的发病率及死亡率呈现逐年上升的趋势［4］。在现阶段的医疗水平下，手术切除仍然是临床在治疗子宫内膜癌过程中主要采用的方法，子宫内膜癌根治术早期治疗能够达到至少95%的术后生存率，治疗进展期子宫内膜癌则只能达到30%左右的术后生存率，如果临床将其和辅助治疗有机结合起来，如中药治疗及放化疗等，虽然能够降低子宫内膜癌根治术后局部复发及转移发生率，但是却无法促进患者生存率的显著提升。因此，子宫内膜癌对人类的健康造成了严重威胁，现阶段临床研究的一个热点仍然是由分子生物学领域对子宫内膜癌的发生发展机制进行研究，将早期诊断及有效治疗子宫内膜癌的分子标志物寻找出来［5］。

Ki-67是细胞增殖的生物学标记，属于癌细胞增殖活性的标志物，其抗原直接而深刻地影响着细胞分裂周期，其开始表达于细胞分裂周期的G1后期，达到高峰的时间为M期，停止表达的时间为完成有丝分裂后［6-7］。Ki-67表达的高低直接而深刻地影响着肿瘤的生物学行为及侵袭力和预后。相关临床研究表明，ER和PR在子宫内膜癌的发生发展中起着非常重要的作用，这主要是由于雌激素在一定程度上起着稳定子宫内膜细胞有丝分裂的作用，子宫内膜癌机制与雌激素紊乱具有密切关联，进而导致DNA发生突变。此外，孕激素能够抑制细胞有丝分裂，促进增生期子宫内膜向分泌期转变，从而起到拮抗内膜发生癌变的作用。当ER和PR与各自相应的激素相结合后，激素受体将被激活，合成新的蛋白质［8］。多项研究认为［9-10］，ER和PR与肿瘤组织类型、病理分期、分级具有一定相关性，本组研究结果显示，ER和PR在子宫内膜癌组织中的表达分别为48.00%、50.00%。与正常正常增生期子宫内膜组和非典型增生组比较较低，Ki-67在子宫内膜癌组病理组织中的表达达到了80.00%，并且ER和PR表达与子宫内膜癌病理组织的病理分型及肿瘤浸润深度具有明显差异，不同病理程度组织的ER、PR、Ki-67表达情况具有明显差异，提示ER、PR、Ki-67表达可以作为子宫内膜癌临床治疗与预后评估的评价指标。

综上所述，子宫内膜癌患者血清ER、PR、Ki-67指标的表达情况有助于实现临床上的早期诊断，可见其作为今后的重点研究方向，为子宫内膜癌的诊断与治疗研究提供相关参考依据。

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The correlation research between ER, PR, Ki-67 expression and the occurrence of endometrial cancer

Ning Jing, Luo Na, Zheng Dong-mei
(Department of Gynecology and Obstetrics Hainan Branch of PLA General Hospital Sanya, Sanya 572013, China)

Objective To explore the relationship between the expression levels of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), Ki - 67 and the occurrence of endometrial carcinoma. M ethods Randomly selected 50 cases of patients as the research object which had a diagnosis of endometrial carcinoma in our hospital from January 2013 to October 2015. At the same time to random ly select 100 cases we receivered as the control group, among them 50 cases had atypical hyperplasia of endometrium and 50 cases had normal proliferative endometrium. In three groups, we tested the expression levels of ER, PR and Ki-67 in tissues by immunohistochemistry MaxVisionTM / HRP staining, then to research the clinical significance, at last we analyzed all results by statistical methods. Result The expression levels of ER and PR in the observation group were lower than the contorl group, and the expression levels in the atypical hyperplasia of endometrium group were significantly lower than in the normal proliferative endometrium group. The expression levels of Ki - 67 were the most obvious in the observation group, and the expression levels were the least in normal proliferative endometrium group, it had statistical significance in the two groups. Conclusion The expression levels of ER, PR and Ki - 67 were closely related with the occurrence and development of endometrial cancer, their expression levels could obviously reflected the degree and prognosis of endometrial carcinoma. It can be as the clinical key research direction of targeted therapy in endometrial cancer.

ER; PR; Ki - 67; endometrial cancer

R737.33

A

1673-016X（2017）03-0138-03

2017-01-03

宁静，E-mail：ning jing8874@163.com