四会市地区鼻咽癌患者微肿瘤组织的病理特征与基因特征联合研究

罗俭权 罗伙娣 冯天斌 潘清文

临床研究

四会市地区鼻咽癌患者微肿瘤组织的病理特征与基因特征联合研究

罗俭权 罗伙娣 冯天斌 潘清文

目的 观察四会市地区鼻咽癌（NPC）患者微肿瘤组织的病理特征与基因特征。方法 回顾分析2006年1月至2012年12月广东省四会市人民医院收治的174例NPC肿瘤患者资料及50例非肿瘤性鼻咽部组织患者。结果 174例NPC患者中，颈部有淋巴结转移患者124例，无淋巴结转移患者50例。非肿瘤性鼻咽部组织KAI1/CD82蛋白的阳性表达率明显高于NPC组织〔78.0%（39/50）比52.4%（65/124），P＜0.05〕。患者NPC组织中KAI1/CD82蛋白的表达与其性别、年龄、病理类型、原发部位（T分期）等临床指标均无相关性（均P＞0.05），但与淋巴结转移（N分期）相关，且随着N分期的进展，KAI1/CD82蛋白阳性表达率进一步降低。结论 NPC患者淋巴微肿瘤的病理特征和基因特征具有一些地域分布特征应联合诊断分析。

鼻咽癌； 病理特征； 基因特征； 精确诊断； 早治疗

鼻咽癌（NPC）素有被冠以地名称呼广东瘤，反映出它在发病方面的特殊性，具有明显的地域分布特征与种族特征［1-3］。我国福建、湖南、广西、广东等南部地区NPC发病率高。NPC不仅具有独特的流行病学特点及生物学特性，且提示遗传因子在其中起着重要作用［4-5］。目前NPC发病病因尚未完全明确,可能的致病因素有抑癌基因、化学致癌因素、遗传因素及病毒（EB病毒）感染等［6-8］。

NPC生长位置、解剖结构具有一定的特殊性,主要以放射治疗为主。近几年来,随者放射治疗技术与设备的不断提高，NPC患者生存率亦不断得到提高［9-10］。但是远处转移、局部复发仍是影响NPC患者预后的关键因素，远期生存率低［11-12］。本文通过对广东省四会市地区性NPC患者淋巴微肿瘤组织病理特征和基因特征的联合分析，为探索一种新的早期诊断NPC技术提供依据。

1 资料和方法

1.1 病例选择 选择2006年1月至2012年12月在广东省四会市人民医院就诊，经病理证实的NPC患者174例，全部病例治疗前均行高分辨螺旋CT影像检查。其中男性126例，女性48例；男女比例2.625：1，年龄25～81岁，平均年龄（44.3±11.7）岁。50例非肿瘤性鼻咽部组织患者，其中男性30例，女性20例；年龄23～79岁，平均年龄(43.1±10.5)岁。影像学诊断由肿瘤科及影像科医师共同完成。初诊时多数以颈部肿块、不适感为主诉，病理检查发现为颈部淋巴结转移者达64%。

1.2 资料收集方法 收集174例经病理证实的NPC诊疗患者的出生地和生活环境区域的信息。

1.3 组织标本获取方法 通过手术、穿刺、纤维支气管镜和介入手段获取肿瘤组织的淋巴结，开展病理特征和个体的肿瘤基因检测。

1.4 检测方法 ① 采取逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测174例NPC与50例非肿瘤性鼻咽部新鲜组织KAI1/CD82的表达情况,并对KAI1/CD82与临床病理相关指标的关系进行分析。KAI1基因（Kang Ai 1基因）,是一类特异性肿瘤转移抑制基因，其属于跨膜4超家族（TM4SF）的成员。研究表明,KAI1/CD82基因与多种肿瘤的转移、侵袭密切相关［13］。② 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物（SP）方法检测174例NPC和50例非肿瘤性鼻咽部组织的KAI1/CD82蛋白的表达情况，并对KAI1/CD82与临床病理相关指标的关系进行分析。③ 应用聚合酶链反应（PCR）技术检测瘤细胞IgH基因重排，并进行统计相关分析。④ 研究肿瘤基因的倾向、患者5年生存率的各种影响因素分析。对比淋巴微肿瘤组织结构的细微变化特征，结合肿瘤基因特征，探讨肿瘤患者个体基因表达的特异性、敏感性、相关性。

1.5 统计学分析 数据采用统计学软件SPSS 20.0进行分析，计数资料以例数（n）、百分率（%）表示，采用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，样本均值比较采用t检验，具有统计学意义的标准定为P＜0.05。

2 结果

2.1 NPC和非肿瘤组织的KAI1/CD82蛋白表达的情况 本项目共入组174例NPC患者，其中124例伴颈部淋巴结转移（72例双侧转移、52例单侧转移），50例无淋巴结转移。组织学上见少数非典型性大细胞散在分布于小淋巴细胞和组织细胞背景中。非肿瘤性鼻咽部组织KAI1/CD82蛋白的阳性表达率为78.0%（39/50），高于NPC组织中的52.4%（65/124），两者差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 相关性分析 NPC组织中KAI1/CD82蛋白的表达与患者的性别、年龄、病理类型、原发部位（T分期）等临床指标均无相关性（均P＞0.05），但与淋巴结转移（N分期）相关。并且随着N分期的进展，KAI1/CD82蛋白阳性表达率进一步降低。

2.3 NPC患者5年生存率的各种影响因素分析比较四会市地区NPC患者5年生存率，与性别无相关性，与年龄段、临床分期、治疗方式明显相关性。见表1。

表1 NPC患者5年生存率的各种影响因素分析

3 讨论

采用肿瘤患者淋巴微肿瘤组织的病理特征与基因特征联合研究NPC主要多见于南方的广东、广西、湖南、福建、江西等，高发中心是广东的肇庆、佛山、广西梧州地区，具有明显的地区性。目前NPC发病机制尚未完全明确，遗传因素和机体的免疫力是NPC发生的基础，可能的致病因素有抑癌基因的失控、癌基因、化学致癌因素、遗传因素及病毒（EB病毒）感染等［14-15］，在NPC的发生中起病因作用，促癌物或致癌物起协同作用。

近年来，伴随放射治疗设备及技术的不断革新，大大提高了NPC患者的5年生存率。而局部复发和远处转移则影响了NPC患者的预后，并限制了进一步提高患者生存率［16-18］。故探讨淋巴微肿瘤组织的病理特征和基因特征在NPC转移中的作用具有重要意义。本组174例NPC患者主要表现为淋巴结肿大。组织学上见少数非典型性大细胞散在分布于小淋巴细胞和组织细胞背景中［19］。有研究表明，KAI1/CD82基因与多种肿瘤的转移和侵袭相关［20-24］。本研究结果中非肿瘤性鼻咽部组织KAI1/CD82蛋白的阳性表达率显著高于NPC组织，这提示KAI1/CD82基因在非肿瘤性鼻咽部组织中呈高表达，在NPC组织中呈低表达，KAI1/CD82基因可能与NPC的发生发展密切相关。

本研究应用免疫组化SP方法检测了NPC组织KAI1/CD82蛋白的表达与患者的性别、年龄、原发部位（T分期）及病理类型等指标均无相关性，但与淋巴结转移（N分期）相关。且随着N分期的进展，KAI1/CD82蛋白阳性表达率进一步降低。

恶性肿瘤的产生与发展是一个非常复杂的过程，治疗方法往往涉及到与肿瘤生长相关的诸多方面，尤其是对于解剖结构、生物学行为及病理类型均具有特殊性的NPC淋巴微肿瘤［25-28］。应尽早研究本地区的淋巴微肿瘤组织的病理特征和基因特征的相关性，为肿瘤高发地区人群研究提供早发现、早治疗的科学依据。

本研究已证明，应用淋巴微肿瘤组织的病理特征和基因特征的联合分析，对肿瘤治疗具有较高的诊断价值。如能扩大样本量，通过建立地域性NPC患者淋巴微肿瘤组织的研究资料，联合分析淋巴微肿瘤组织的病理特征特点，对比基因特征结果的敏感性、特异性和相关性，将有望提高临床早期诊断水平。

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（本文编辑：李银平）

Joint study on pathological features and gene characteristics of micro tumor tissue in patients withnasopharyngeal carcinoma in Sihui City area

Luo Jianquan, Luo Huodi, Feng Tianbin, Pan Qingwen.The People's Hospital of Sihui City, Sihui 526200, Guangdong , China

Objective To observe the pathological characteristics and gene characteristics of micro tumor tissue in patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC) in Sihui City area. Methods The data of 174 patients with NPC who were admitted to our hospital and 50 patients with non-neoplastic nasopharyngeal tissue were analyzed retrospectively from January 2006 to December 2012. Results 124 patients with cervical lymph node metastasis and 50 patients without lymph node metastasis were found in 174 patients with NPC. The positive expression rate of KAI1/CD82 protein in non-neoplastic nasopharyngeal tissue was higher significantly than that in NPC tissue [78.0% (39/50) vs. 52.4% (65/124), P ＜ 0.05]. The expression of KAI1/CD82 protein in NPC tissue of patients was not correlated with its sex, age, pathological type, primary site (T staging) and other clinical indicators (all P ＞ 0.05), but was correlated with lymph node metastasis (N stage) and with the progress of N staging, the positive expression rate of KAI1/CD82 protein decreased further. Conclusions There were some geographical distribution characteristics in the pathological features and gene characteristics of lymphatic micro tumor tissue in patients with NPC and should joint diagnosis analysis.

Nasopharyngeal carcinoma; Pathological features; Genetic characteristics; Accurate diagnosis; Early treatment

肇庆市科技创新计划项目（2016040301）

526200 广东四会，广东省四会市人民医院

罗俭权，Email：luo3335686@163.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.01.002

2017-01-20）