黑果腺肋花楸不定芽诱导与增殖研究

赵健竹+孙晓泽+辛广+张文颖+刘影

摘要：本研究以黑果腺肋花楸为试验材料，分别选取茎尖、茎段及叶片作为外植体，接种到不同植物激素种类及浓度配比的培养基上，进行诱导和增殖培养。结果表明：茎尖诱导不定芽效率最高，效果最好，茎段和叶片作为外植体诱导率很低，确定茎尖是不定芽诱导的最理想材料；茎尖诱导的最适培养基为MS+ 6-BA 2.0毫克/升+ NAA 0.5 毫克/升，诱导率达96.7%；不定芽增殖的最适培养基为MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升，平均增殖倍数为10.89。

关键词：黑果腺肋花楸；外植体；培养基；诱导；增殖

中图分类号： R284 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.13.020

黑果腺肋花楸，是集食用、药用、园林绿化和生态价值于一体的珍贵树种，适应性强、结果早、经济价值高，市场前景巨大[1]。20世纪90年代，黑果腺肋花楸被引入我国，并定植于辽西地区[2]。因其传统的播种、扦插繁殖困难，野生资源破坏严重，目前绿化需求量大，应用组织培养技术可以获取大量组培苗，促进规模化生产，供应市场。

药用价值：果实及其提取物具有保健作用，对心脏病、高血压等疾病的治疗有显著效果，普遍应用于功能食品和医药工业[3]；观赏价值：由于树形优美、观赏期长，是春天观叶、夏天看花、秋天看果的优质绿化树种，可单独种植，或者大量种植在草坪、庭院、路旁等地方[4]；生态价值：黑果腺肋花楸抗旱性较强，生长所需水分很少，在干旱地区完全可以存活，浅根系发达，吸枝萌蘖力强，对表层土壤固持力强，病虫害少，抗风害和冰雹灾害，生命周期较长，具有良好的保持水土效果，生态稳定能力强[5]。

1材料与方法

本研究以茎尖、茎段、叶片三种外植体为基本材料，对黑果腺肋花楸不定芽进行诱导培养。再以茎尖为外植体，分别接种到9种不同的诱导培养基上，利用茎尖为外植体，直接诱导获得不定芽，将不定芽进行增殖培养，提高增殖系数，从而获得大量组培苗。

2結果与分析

2.1不同外植体对不定芽诱导的影响

将黑果腺肋花楸茎尖、叶片及茎段分别接种到MS+ 6-BA2.0毫克/升+ NAA0.5毫克/升培养基中，经诱导培养30天后，观察并统计诱导成活的外植体个数，计算出不同外植体的诱导率，见表1。

从表1可以看出：茎尖对不定芽的诱导率最高，为93.30%，茎段对不定芽的诱导率较低，为43.33%，而叶片对不定芽的诱导率为0。

三种外植体接种后，坚持每天观察外植体的变化情况，茎尖在接种9天后可见接种的茎尖向上生长，在基部有小的凸起为萌动的不定芽，13天后可明显地观察到小的不定芽；茎段在接种20天后，可见部分茎段出现变化；叶片接种后一直进行观察，无明显变化，其不定芽诱导率最低。由此得出，茎尖对不定芽的诱导率最高，为93.30%，茎尖是不定芽诱导的最理想材料。

2.2不同培养基对茎尖诱导成活的影响

将茎尖分别接种到9种以MS为基本培养附加不同植物激素种类及浓度的完全培养基上，在培养室进行诱导培养，优选茎尖诱导的最佳培养基，观察并记录得到诱导成活率，见表2。

从表2看出，茎尖最佳的诱导培养基为MS + 6-BA 2.0 毫克/升 + NAA 0.5毫克/升，诱导率为93.30 %，诱导率最高，诱导效果最好。

2.3不同培养基对不定芽增殖的影响

经诱导培养获得的不定芽，再分别接种到以MS为基本培养基附加不同浓度6-BA和NAA配比制成的6种培养基上，接种情况及增殖结果，见表3。

经增殖培养17天后，可观察到不定芽增殖分化出丛生芽，培养至25天，继续分苗，统计每个不定芽分化出的苗数，并转接到增殖培养基上，进行继2代培养。将诱导获得的不定芽转接至增殖培养基情况，见图1；不定芽转接后，经增殖培养25天分化出丛生芽情况，见图2。

结合表3、图1和图2，不定芽分别转接到6种由不同外源激素组合的MS培养基中，不定芽增殖的最适培养基为MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升，增殖倍数为10.89。

3讨论

本试验分别采取黑果腺肋花楸茎尖、叶片及茎段为外植体进行不定芽诱导，茎尖诱导率最高，而叶片诱导不定芽无变化，结果表示不同外植体对不同激素的选择性很大；在相同的基本培养基条件下，6-BA和NAA的浓度对芽增殖效果影响很大，对于黑果腺肋花楸不定芽增殖的最佳培养基为MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升。

参考文献

[1]付艳.黑果腺肋花楸的应用价值及发展前景[J]. China science and Technology R eview，2012.

[2]王鹏.欧美国家黑果腺肋花楸栽培技术研究现状[J].中南林业调查规划，2014，（01）：54-57.

[3]于雪，胡文忠，姜爱丽，陈妍竹，刘星伯.黑果腺肋花楸营养物质与功效的研究进展[J].食品工业科技，2016（10）：396-400.

[4]张连生，韩文忠，姜镇荣. 黑果腺肋花楸——前途广阔的绿化新品种[J].农业科技与信息（现代园林），2007，（08）：63-64.

[5]高晔华.黑果腺肋花楸组培快繁体系的研究[D].延边大学，2013.

作者简介：赵健竹，在读本科生，研究方向：生物学。

通讯作者：孙晓泽，硕士，讲师，研究方向：植物栽培与繁育。