ADA、T—spot联合检测对结核性胸膜炎疾病诊断的意义分析

刘铃+孙晓娜+蒋伟光

【摘要】 目的 研究腺苷脱氨酶（ADA）、T 细胞斑点试验（T-spot）联合检测对结核性胸膜炎疾病诊断的临床意义。方法 选取80例疑似结核性胸膜炎患者， 采用ADA、T-spot联合检测， 利用ROC曲线探讨胸腔积液ADA和T-spot联合检测的阳性率和本文确定的ADA临界值与传统的ADA临界值进行比较。结果 ADA检测诊断ROC曲线下胸腔积液的面积为0.959（95%CI：0.916～1.000）， ADA检测对结核性胸膜炎胸腔积液有较高的诊断价值， 而当约登指数为最高值时， ADA的临界值设定为22.5IU/L。经诊断， 确诊的胸膜炎患者有45例， 非结核性胸膜炎患者有35例；采用T-spot检测结核性胸膜炎的阳性率为91.11%， ADA检测的阳性率为80.00%， ADA、T-spot联合检测的阳性率为97.78%；T-spot检测的阳性率明显高于ADA检测的阳性率， 差异有统计学意义（P<0.05）；ADA、T-spot联合检测的阳性率明显高于ADA和T-spot的单独检测， 差异有统计学意义（P<0.05）。结论 ADA、T-spot联合检测结核性胸膜炎的诊断具有较为重要的意义， 能够快速、准确地检测患者的胸膜炎， 且具有较高的灵敏度， 诊断效果较好， 可以在临床上推广。

【关键词】 腺苷脱氨酶；T 细胞斑点试验；结核性胸膜炎；诊断意义

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.14.023

結核病是由于结核杆菌引起的一种具有传染性的疾病， 是世界上单一病菌导致死亡的最多的疾病， 中国也具有较高的发病率， 每年估计有新发的结核病患者130万例， 占全球发病率的14.3%[1]。结核性胸膜炎是一种较为常见的疾病， 它并不具有特异的临床表现， 对其采用细菌检测的阳性率较低， 而胸膜活检的使用又存在一定的局限性， 因此对结核性胸膜炎的检测和诊断就成为了临床医生和学者重视的问题， 本文就结核性胸膜炎疾病采用ADA、T-spot联合检测， 观察其效果， 为临床检测提供理论参考。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2015年8月～2016年7月在本院进行治疗的80例疑似结核性胸膜炎患者， 其中男52例， 女28例， 年龄22～78岁， 平均年龄（49.5±9.5）岁， 病程1～3个月， 平均病程（1.5±0.8）个月；患者出现咳嗽、咳痰、呼吸困难等症状， 与患者交谈其家庭经济水平一般。

1. 2 方法

1. 2. 1 T-spot检测：采集患者外周血5ml于肝素钠抗凝管中， 将外周血的单个细胞用淋巴细胞分离进行分离， 调整AIM-V培养液的浓度为2.5×106/ml。将T-spot试剂盒取出放在预先包被有抗γ-干扰素抗体的微孔板上， 在4个微孔中由上至下分别加入植物血凝素50 μl作为阳性对照孔， A孔中加入50 μl ESAT-6抗原， B孔中加入培养滤液蛋白-10（CEP-10）抗原50 μl， 加入50 μl AIM-V培养液作为阴性对照孔。最后分别再加入细胞稀释工作液100 μl于4孔中， 调节培养箱温度为37℃， 加入5% CO2， 然后将培养板放入后孵育16～20 h， 用磷酸缓冲液（PBS）将微孔板洗4次， 在其中加入二抗， 采用碱性磷酸酶标记， 调节温度为2～8℃进行孵育， 时间为1 h， PBS洗板4次， 在常温避光条件下加入底物后， 用7min进行显色， 然后终止反应并用蒸馏水冲洗[2]。

1. 2. 2 ADA检测 采用速率法进行ADA检测， 选用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产的试剂及全自动生化分析仪， 进行检测并对结果进行分析。

1. 3 观察指标 探讨胸腔积液ADA和T-spot联合检测的准确性、特异性和阳性率。

1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 ADA检测临界值与传统ADA临界值比较 利用ROC曲线计算胸腔积液， ADA检测诊断ROC曲线下胸腔积液的面积为0.959（95%CI：0.916～1.000）， ADA检测对结核性胸膜炎胸腔积液有较高的诊断价值， 而当约登指数为最高值时， ADA的临界值设定为22.5 IU/L， 此时本文确定的ADA临界值与传统的ADA临界值见表1。

2. 2 ADA和T-spot检测结核性胸膜炎的阳性率比较 经诊断， 确诊的胸膜炎患者45例， 非结核性胸膜炎患者35例。T-spot检测的阳性率（91.11%）明显高于ADA检测的阳性率（80.00%）， 差异有统计学意义（P<0.05）；ADA、T-spot联合检测的阳性率明显高于ADA和T-spot的单独检测， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

结核性胸膜炎是由于肺部的结合炎症累及到胸部从而引发的。有时结核性胸膜炎也可以通过血行感染， 与机体的变态反应有很大的关系[3]。它具有较多的发病原因， 原发性结核病是由于结核杆菌侵入人体造成的， 结核杆菌根据其不同的类型分为：人型、牛型、鸟型和鼠型， 而对人体具有致病力的是人型和牛型结核杆菌。大多数结核杆菌胸膜炎起病较急， 临床表现主要为全身中毒症状和胸腔积液导致局部症状， 有发热、乏力、出汗、食欲不振、盗汗等。而局部症状主要有胸痛、干咳和呼吸困难。有些患者随着呼吸运动而产生胸痛， 深呼吸或咳嗽时疼痛较为明显。若患者的胸腔内出现积液时， 听诊可有胸膜摩擦音。

T-spot是通过特异性T细胞数量来诊断结核感染的。由于结核分枝杆菌（MTB）的RD1基因序列合成了ESAT-6和CFP-10两种蛋白， 而这两种基因序列又只存在于MTB中， 其他的环境中均不含这种基因序列， 因此这两种结合感染均可以采用特异性抗原刺激这种基因进行检测， 致使T-spot的检测具有高度特异性。ADA是一种辅助性T淋巴细胞的标志物， 当出现活动性结核时， 细胞受到刺激， 致使淋巴细胞增多， 从而导致细胞内的ADA进入胸腔积液中， 因此在发生结核性胸膜炎时， ADA活性的检测在胸腔积液中的活性较高。

综上所述， ADA、T-spot联合检测具有较高的特异性和灵敏度， 对结核性胸膜炎具有较高的诊断价值， 可以在临床上推广。

参考文献

[1] 施健， 周丽荣， 孙宝华， 等. ADA联合IFN-γ及LAM抗原检测对结核性胸膜炎的诊断价值. 疑难病杂志， 2014， 13（1）：46-48.

[2] 廖兵， 丁显平. T-SPOT.TB和ADA在结核性胸膜炎中的诊断价值. 国际检验医学杂志， 2014， 35（17）：2323-2325.

[3] 郑立恒， 柳晓金， 刘会， 等. 3种方法在诊断结核性胸膜炎中的价值. 河北医科大学学报， 2016， 37（7）：822-824.

[收稿日期：2016-11-28]