王琨++丁驰++崔志钢
摘要 为了提高二倍体太子参组织培养中丛生芽的诱导率,以优良二倍体太子参萌发的芽为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度NAA、6-BA的激素对外植体进行诱导。结果表明,NAA和6-BA对二倍体太子参丛生芽诱导均有促进作用,且以MS为基本培养基,添加0.5 mg/L NAA和1.0 mg/L 6-BA最适宜二倍体太子参丛生芽诱导培养。
关键词 太子参;组织培养;二倍体;外植体
中图分类号 S567.5+1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2017)08-0067-01
Study on Induction of Diploid Radix Pseudostellariae Crowded Buds
WANG Kun DING Chi CUI Zhi-gang ZHAO Hui-fang
(Tongren Polytechnic College,Tongren Guizhou 554300)
Abstract In order to improve the training of multiple shoot induction rate of diploid Raiix Pseudostellaria tissues,taking excellent diploid Radix Pseudostellaria germination buds as explants,MS as the basic medium,adding different hormone concentrations of NAA,6-BA,the explants were induced.The results showed that NAA and 6-BA were both promoted for diploid bud induction ginseng,and adding 0.5 mg/L NAA and 1.0mg/L 6-BA with MS as the basic medium were most suitable for diploid bud induction culture of Radix Pseudostellariae.
Key words Radix Pseudostellariae;tissue culture;diploid;explant
太子參为石竹科植物,其块根含有皂苷、多糖、氨基酸等活性物质。近年来,太子参在化妆品和食疗保健品的研制开发上应用广泛,需求不断增加,逐渐成为一个新起的中药种类[1]。由于近些年来使用单一的太子参栽培品种,加之长期进行无性繁殖,使太子参栽培品种退化,病虫害发生种类增多、程度加重,严重影响了太子参的产量和品质[2-3]。本文利用组织培养技术,在无菌条件下对太子参进行离体培养,筛选出一套适合二倍体优质太子参种苗培养的较优条件。
1 材料与方法
1.1 试验材料
外植体:二倍体太子参栽培品种黔太子参1号。外植体培养物料:腐殖土和菇渣。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的获取。当太子参块根上萌发出长1 cm左右的芽时,剪取肥大、芽头完整、无损伤、无病害且健壮一致的芽,用低浓度的洗衣粉水浸泡12~15 min,再用流水冲洗20 min。在无菌条件下,先用70%乙醇浸泡10 s,无菌水冲洗3~4次,再用0.1% HgCl2消毒8 min,无菌水冲洗4~5次[3]。切掉幼芽基部待用。
1.2.2 太子参丛生芽诱导。NAA设置0、0.1、0.5、1.0、1.5 mg/L 6个浓度梯度,6-BA设置0、0.1、0.5、1.0、1.5 mg/L 5个浓度梯度,共16个处理,将1.2.1中得到的外植体分别接种于16种添加不同浓度激素组合的 MS培养基上。人工控制光照强度为3 000 lx,培养室温度为(25±1) ℃,每天连续光照12 h的环境下培养,每种不同激素配比的培养基接种100瓶,每瓶培养基接种外植体1个,35 d后记录丛生芽诱导数和苗高生长情况。
2 结果与分析
2.1 不同浓度NAA对二倍体太子参茎尖诱导培养的影响
将太子参茎尖接种于MS诱导培养基中培养10 d后,茎尖开始萌发,顶芽和腋芽逐渐出现,35 d时,对顶芽和腋芽的生长情况和苗高进行统计,结果如表1所示。可以看出,在未添加6-BA条件下,MS培养基中添加NAA浓度分别为0、0.1、0.5、1.0、1.5 mg/L的都能诱导太子参的生长。其中未添加NAA的培养基诱导分化丛生芽数达到55个,添加1.0 mg/L的NAA平均苗高达到2.3 cm。方差分表明,添加NAA对太子参茎尖诱导丛生芽无显著影响,对太子参丛生芽生长有较好促进作用。
2.2 不同浓度6-BA对二倍体太子参茎尖诱导培养的影响
由表2可知,在丛生芽诱导培养基中以添加6-BA 1.0 mg/L对丛生芽诱导影响最大,诱导率达61%。方差分析表明,添加6-BA对丛生芽诱导影响显著。同时,随着6-BA浓度的增加,平均苗高呈进一步增长趋势。
2.3 不同浓度NAA和6-BA对二倍体太子参茎尖诱导培养的影响
由表3可知,当在MS培养基中添加NAA 0.5 mg/L和6-BA 1.0 mg/L时,诱导太子参茎尖分化丛生芽数最高,诱导率达75%。方差分析表明,不同激素组合处理对太子参茎尖丛生芽诱导的芽数和平均株高影响达到极显著水平。
3 结论与讨论
本试验结果表明,添加NAA和6-BA均能促进二倍体太子参丛生芽的产生,且以NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,诱导丛生芽和促进丛生芽生长效果最佳。但选用不同基因型外植体和在不同试验条件下激素对二倍体太子参组培苗培养的影响还有待进一步的研究。
在植物组织培养中,激素对于器官形成、细胞分裂和胚胎发生起着重要的调节作用,植物激素的浓度、配比和培养基种类是选择的关键。本试验结果表明,MS培养基较为适合二倍体太子参茎尖组织的诱导培养。宋丽莎等[4]只用1/2MS培养基作为二倍体太子参的生根壮苗培养基,本试验则在MS培养基基础上添加了NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,且取得了较好的结果;对于激素方面,有学者也在培养基中用到KT、IAA、GA和IBA[5-6],但本试验只选用了常用的6-BA和NAA,也取得了较好的试验效果。
4 参考文献
[1] 刘训红,阚毓铭.太子参研究进展[J].时珍国医国药,2000,11(12):1131-1132.
[2] 林光美.福建太子参品种退化问题及其对策[J].中国野生植物资源,2000,27(4):26.
[3] 黄勇毅,林丛发.闽东太子参花叶病发病规律调查及防治途径研究[J].宁德师专学报(自然科学版),2004,16(1):65-68.
[4] 宋丽莎,黎娇凌,肖国学,等.太子参组织培养与快繁技术[J].广东农业科学,2010(6):55-57.
[5] 余春香,郑小峰,邓燕红,等.太子参的组织培养研究[J].贵州农业科学,2004,32(5):16-17.
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