22%烟嘧·硝·氯吡OD高效液相色谱分析

东 琴，潘 静，徐 妍，马 超，高敬雨，刘润峰

(北京明德立达农业科技有限公司，北京 100085)

22%烟嘧·硝·氯吡OD高效液相色谱分析

东 琴，潘 静，徐 妍，马 超，高敬雨，刘润峰

(北京明德立达农业科技有限公司，北京 100085)

建立了以乙腈和水(0.05%磷酸水溶液)为流动相，采用ZORBAX Eclipse Plus C8(5 µm)为填料的、250 mm× 4.6mm (i.d.)的不锈钢柱和UV检测器，在245 nm检测波长下，对试样中的烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯进行高效液相色谱的分离和定量分析的方法。烟嘧磺隆、硝磺草酮及氯氟吡氧乙酸异辛酯标准偏差分别为0.07、0.06和0.05，变异系数分别为1.64%、0.58%和0.61%，平均回收率分别为99.52%、99.02%和99.16%。

烟嘧磺隆；硝磺草酮；氯氟吡氧乙酸异辛酯；高效液相色谱法；分析

烟嘧磺隆(英文名称nicosulfuron，其他名称玉农乐)是日本石原公司开发的磺酰脲类除草剂。烟嘧磺隆属于内吸传导型除草剂，可被杂草的茎叶和根部吸收，随后在植物体内传导，造成敏感植物生长停滞、茎叶褪绿，逐渐枯死，可以防除一年生和多年生阔叶杂草[1]。

硝磺草酮(英文名称mesotrione，又名甲基磺草酮、米斯通)是捷利康公司开发的三酮类除草剂，抑制羟基苯基丙酮酸酯双氧化酶(HPPD)的活性，是芽前和苗后广谱选择性除草剂，可有效防治主要的阔叶草和一些禾本科杂草。该剂对磺酰脲类除草剂产生抗性的杂草有效[1]。

氯氟吡氧乙酸异辛酯(英文名称fluroxypyr-meptyl，通用名称：氟草定、氟草烟，其他名称：使它隆、盾隆)由美国陶氏益农公司开发生产，是有机杂环类选择性内吸传导型苗后除草剂。此物质施用后很快被植物吸收，使敏感植物出现典型激素类除草剂的反应，植株畸形、扭曲，最终枯死。它适用于小麦、大麦、玉米、葡萄、果园、牧场、林地、草坪等地防除阔叶杂草，如猪殃殃、卷茎蓼、马齿苋、龙葵、田旋花、蓼、苋等，对禾本科杂草无效，对作物安全，在土壤中易降解，半衰期较短，对后茬作物没有药害[1]。

药效试验证明，烟嘧磺隆、硝磺草酮和氯氟吡氧乙酸异辛酯三者复配适用于防除玉米田一年生和多年生杂草，速效性好，杀草谱广。烟嘧磺隆、硝磺草酮和氯氟吡氧乙酸异辛酯单剂的分析方法已有报道[2-4]。有关烟嘧磺隆、硝磺草酮和氯氟吡氧乙酸异辛酯复配油悬浮剂的液相色谱分析，目前尚未见公开报道。

本文采用反相高效液相色谱法，使用C8反相柱，紫外可变波长检测器，对有效成分进行分析和定量。此方法同时适用烟嘧磺隆、硝磺草酮和氯氟吡氧乙酸异辛酯原药及制剂的分析，具有简便、快速、准确、灵敏度高、重复性好的特点[2-3]，适用于大生产时产品质量的检测分析。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪：Agilent 1260，具可变波长紫外检测器；色谱数据处理工作站；色谱柱：250 mm ×4.6 mm(i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAX Eclipse Plus C8填充物，粒径5 µm；过滤器：滤膜孔径0.45 μm；进样器：50 μL；超声波清洗器。

乙腈：色谱纯；冰乙酸：分析纯；水：新蒸二次蒸馏水；烟嘧磺隆标准样品：已知质量分数≥98.0%(中国农业大学理学院提供)；硝磺草酮标准样品：已知质量分数≥98.0%(中国农业大学理学院)；氯氟吡氧乙酸异辛酯标准样品：已知质量分数≥98.0%(中国农业大学理学院)；22%烟嘧磺隆·硝磺草酮·氯氟吡氧乙酸异辛酯油悬浮剂(江苏明德立达作物科技有限公司)。

1.2 色谱条件

流动相：梯度洗脱，0 min：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液，体积比65︰35)；4 min：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液，体积比65︰35)；5 min：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液，体积比90︰10)；10 min：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液，体积比90︰10)；11 min：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液，体积比65︰35)；流动相流量：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：245 nm；进样体积：5 µL；保留时间：烟嘧磺隆约：2.9 min，硝磺草酮约：3.5 min，氯氟吡氧乙酸异辛酯约：9.7 min。烟嘧磺隆、硝磺草酮及氯氟吡氧乙酸异辛酯的液相色谱图见图1、图2和图3。

1.3 溶液配制

1.3.1 标样溶液的配制

称取烟嘧磺隆标样约50 mg、硝磺草酮标样约50 mg、氯氟吡氧乙酸异辛酯标样约100 mg(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，摇匀后吸取2 mL至10 mL容量瓶中，再用乙腈定容，摇匀后备用。

图1 标样液相色谱图

从左到右依次为：烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯

图2 试样中烟嘧磺隆、氯氟吡氧乙酸异辛酯液相色谱图

从左到右依次为：烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯

图3 试样中硝磺草酮液相色谱图

从左到右依次为：烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯

1.3.2 试样溶液的制备

称取试样约0.25 g(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，摇匀后离心，取上清液备用，作为检测烟嘧磺隆、氯氟吡氧乙酸异辛酯的试样。

称取试样约0.1 g(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，摇匀后离心，取上清液备用，作为检测硝磺草酮的试样。

1.4 测定

在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)响应值相对变化小于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.5 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中的烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)峰面积分别进行平均。试样中的烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)质量分数X1(%)按式(1)计算：式中：A1——标样溶液中烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)峰面积的平均值；A2——试样溶液中烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)峰面积的平均值；m1——烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)标样的质量，g；m2——试样的质量，g；P——标样中烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)的质量分数，%；5——稀释因子。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 流动相的选择

根据化合物的特点及摸索测定，对甲醇和水、乙腈和水按不同的比例在色谱柱上进行选择比较，经测定选择乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)为理想的流动相。当流动相流速控制在1.0 mL/min时，有效成分与杂质能很好地分离，峰形对称，基线平稳，保留时间短。综合以上因素，最终选定乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)作为流动相，采用梯度洗脱的方式，体积比分别为65︰35、65︰35、90︰10、90︰10、65︰35。

2.1.2 检测波长的选择

通过紫外可见分光光度计UV-1800在190～400 nm波长进行紫外扫描选择，发现烟嘧磺隆在237.80 nm和197.40 nm均有较大吸收，硝磺草酮在271.80 nm和221.20 nm均有较大吸收，但考虑到溶剂及助剂对吸收的影响和样品中两组分的峰面积尽量接近，最终选定了245 nm作为检测波长见图4、图5。

图4 烟嘧磺隆紫外扫描图

图5 硝磺草酮紫外扫描图

2.2 分析方法的线性关系测定

配制一系列烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)标准溶液的浓度，按上述色谱条件操作，每个浓度重复进样两次，并且相邻两针的峰面积相对偏差小于1%，求其峰面积平均值。以烟嘧磺隆(硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯)的质量浓度为横坐标、峰面积值为纵坐标绘制标准曲线，见图6、图7及图8。

图6 烟嘧磺隆线性关系图

结果表明，烟嘧磺隆的质量浓度为50～300 mg/L时具有良好的线性范围，线性回归方程为y=9.745 1x +21.980 0，相关系数R2=0.999 6；硝磺草酮的质量浓度为50～300 mg/L时具有良好的线性范围，线性回归方程为y=11.435 3x+24.780 0，相关系数R2=0.999 8；氯氟吡氧乙酸异辛酯的质量浓度为100～600 mg/L时具有良好的线性范围，线性回归方程为y=4.295 6x+40.846 7，相关系数R2=0.999 6。

图7 硝磺草酮线性关系图

图8 氯氟吡氧乙酸异辛酯线性关系图

表1 分析方法精密度测定

2.3 分析方法的精密度测定

按上述色谱操作条件平行测定22%烟嘧磺隆·硝磺草酮·氯氟吡氧乙酸异辛酯OD试样溶液5次，计算烟嘧磺隆、硝磺草酮和氯氟吡氧乙酸异辛酯的标准偏差和变异系数(表1)。

2.4 分析方法的准确度测定

采用标准添加法，在用本方法测得含量的烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯试样中加入一定量的烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯标准品，再按本方法步骤测定其含量(以烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯计)，计算回收率(表2)。

表2 分析方法准确度测定

3 结 论

本文提出的22%烟嘧磺隆·硝磺草酮·氯氟吡氧乙酸异辛酯油悬浮剂中烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯含量的分析方法，同时适用于烟嘧磺隆、硝磺草酮、氯氟吡氧乙酸异辛酯原药及制剂的分析。此方法具有较高的准确度和精密度，线性关系良好，具有简便、快速、准确、可靠及分离效果好的优点，是大生产时进行产品质量检测较理想的分析方法。

[1] 刘长令.世界农药大全(除草剂卷)(第一版)[M]. 北京: 化学工业出版社, 2008: 47－50, 109－110, 206－208.

[2] 吴春先, 高立明, 王广成, 等. 烟嘧磺隆的高效液相色谱分析[J]. 农药科学与管理, 2006, (10): 6－9.

[3] 王小丽, 陈铁春, 李友顺, 等. 硝磺草酮原药高效液相色谱分析方法研究[J]. 农药科学与管理, 2009, (06): 44－46.

[4] 王海霞, 高晓晖. 高效液相色谱法测定氯氟吡氧乙酸异辛酯的含量[J].农药, 2014, (01): 31－33.

Analysis of Nicosulfuron+Mesotrione+Fluroxypyr-meptyl 22% OD by HPLC

DONG Qin, PAN Jing, XU Yan, MA Chao, GAO Jingyu, LIU Runfeng
(Beijing Mindleader Agroscience Co., Ltd, Beijing 100085, China)

The separation and quantitative analysis of nicosulfuron + mesotrione + fluroxypyr-meptyl 22% OD was carried out by HPLC using C8column [250 mm×4.6mm (i.d.)] with UV-absorbance detector at 245 nm, and the mixture of acetonitrile and water as mobile phase. The results showed that the standard deviations of nicosulfuron, mesotrione and fluroxypyr-meptyl were 0.07, 1.64% and 99.52%, the variation coefficients were 0.06, 0.58% and 99.02%, and the average recoveries were 0.05, 0.61% and 99.16%, respectively.

nicosulfuron; mesotrione; fluroxypyr-meptyl ; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.01.12

TQ450.7

A

1009-6485(2017)01-0051-04

东琴(1990—)，女，山东临沂人，硕士研究生，主要从事农药剂型加工研究。Tel: 010-56071481，E-mail：dongqin@mdldagro.com。

2016-11-17。