HPLC法测定达斡尔习用药材柳蒿芽不同部位中金丝桃苷的含量

2017-05-18 04:10任飞宇
中国民族医药杂志 2017年1期
关键词:金丝药材回收率

任飞宇

(内蒙古自治区乌兰察布市中心医院,内蒙古 集宁 012000)

HPLC法测定达斡尔习用药材柳蒿芽不同部位中金丝桃苷的含量

任飞宇

(内蒙古自治区乌兰察布市中心医院,内蒙古 集宁 012000)

目的:建立民族药材柳蒿芽中金丝桃苷的HPLC测定方法。方法: HPLC法,流动相:甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25:30:0.1:0.15),流速:1.0mL·min-1,检测波长:350nm,柱温:30℃。结果:金丝桃苷在0.007~0.464μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为98.56%,RSD为0.82%(n=6)。柳蒿芽不同部位金丝桃苷含量,叶0.29%、茎0.24%,根0.06%,金丝桃苷平均含量为0.197%。结论:HPLC法测定柳蒿芽中金丝桃苷含量,方法简便、准确、快速,可做为柳蒿芽质量评价方法之一。

HPLC法;柳蒿芽;金丝桃苷

柳蒿芽学名蒌蒿Artemisin Selengensis Turcz,是菊科属多年草本植物,又名柳叶蒿、香叶蒿,蒙古名库木勒,既可食用,也可全草入药,是达斡尔人药食两用的野生植物,具有养肝健胃、清热解毒作用[1]。药理学研究表明,柳蒿芽有降压、降血脂、抗氧化、耐缺氧、免疫调节、消炎作用[2]。化学成分主要有芦丁、胡萝卜素、谷甾醇、芹菜素、木犀草素、挥发油类[2]。本文建立药材金丝桃苷HPLC的质量评价方法,报道如下。

1 仪器与试剂

1.1 仪器:1100型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司),SPD-2A紫外检测器(岛津),TJ-912型色谱分析平台(太极计算机公司),IN-180型柱温箱(上海英泰科技研究所),SH6150D超生波清洗器(上海昆山),电子天平(梅特勒)。

1.2 试药:金丝桃苷对照品(111521-200303)由中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯;其他均为分析纯试剂;水为纯化水;柳蒿芽于2014年6月采自内蒙古和林格尔南天门林场。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件:Kromasi -C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25:30:0.1:0.15);流速:1mL·min-1;温度:30℃;检测波长:350nm nm;进样量10μL。在此条件下待测组分可达到基线分离。样品中金丝桃苷与其它组分有较好的分离,见图1。

2.2 对照品溶液的制备:精密称取金丝桃苷对照品适量,加甲醇制成0.58mg·mL-1的溶液,即得。

2.3 供试品溶液的制备:取本品干燥、粉碎,过筛,精密称定400mg,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇10mL,称质量,超声处理30min ,放冷,称重,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液备用,即得。

2.4 线性关系考察:精密吸取对照品溶液0.1、0.2、0.4、1、2、4、8mL,分别加到10mL量瓶中,加甲醇稀释到刻度,摇匀,注入高效液相色谱仪,测定峰面积;以峰面积为纵坐标(Y),进样量为横坐标(X)做线性回归, 回归方程为Y = 2284159 X +58465,r=0.9999。结果表明,金丝桃苷在0.0058~0.464μg范围内呈良好的线性关系。

2.5 稳定性实验:取同1份供试品溶液,分别在0,2,4,8h进样测定,以金丝桃苷峰面积值计算RSD为0.36%。结果表明,供试品溶液在8h内稳定。

2.6 精密度实验:吸取同一批供试品溶液,在上述色谱条件下重复进样6次,测得金丝桃苷峰面积RSD为0.42%,符合测定要求。

2.7 重复性实验:取同批药材(叶)按2.3项下平行制备6份样品溶液,并按2.1项下测定,金丝桃苷的平均含量为0.29%, RSD=1.21%,符合测定要求。

2.8 加样回收率实验:取同批药材(叶)已知含量的样品6份,每份取约300mg,精密称定,精密加入金丝桃苷对照品溶液0.2 mL(0.58 mg/mL),按2.3项下制备样品溶液,同法操作,测定含量,计算回收率。结果,金丝桃苷平均回收率为98.56%,RSD为0.82%,符合测定要求。

3 样品测定

按2.3 项下方法制备供试品溶液,按拟定的色谱条件测定柳蒿芽不同部位金丝桃苷含量,叶0.29%、茎0.24%,根0.06%,柳蒿芽金丝桃苷平均含量0.197%。

4 小结

柳蒿芽为达斡尔人习用的野菜,营养丰富、美味可口、风味独特,特别对于脾胃肝肾受损或亚健康状态者极为适合。目前市场有售,多为由人工栽培品。药理学研究已经证实,柳蒿芽无毒副作用,具有调节血脂、血糖、抗氧化作用,是一个具有开发潜力,药食同源的药材。本文初步建立柳蒿芽有效成分含量测定方法,为柳蒿芽的进一步的研究开发提供参考数据。

[1]托亚,金晓红.达翰尔人喜食-柳蒿芽[J].中国民间疗法,2007,8(15):10.

[2]董强.东北林业大学硕士学位论文[D].2010

2016年10月11日收稿

R292.2

B

1006-6810(2017)01-0045-02

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