常慧红,张路生,王小梦,巴秀成
(山东省滨州市植保站,山东滨州 256600)
瓜类果斑病寄主范围测定
常慧红,张路生,王小梦,巴秀成
(山东省滨州市植保站,山东滨州 256600)
瓜类果斑病严重危害了瓜类产业的健康发展。本文介绍了通过田间接种多种作物叶片和室内菌悬液浸泡不同葫芦科作物种子两种方式进行寄主范围测定。结果表明,西瓜、甜瓜、苦瓜等葫芦科作物都是该病菌的寄主,伤口及种子带菌均可使寄主作物染病。
瓜类果斑病;人工接菌;寄主范围
瓜类果斑病(Acidovorax avenae subsp.citrulli),又称细菌性果腐病,是一种严重的细菌性病害,是瓜类作物生产中的重要病害[1,2]。该病在20世纪80年代后期在美国爆发而受到广泛关注,自此,在世界范围内开始传播[3]。引起该病的病菌为嗜酸菌属燕麦种西瓜亚种,具有高度破坏性,是一种常见的瓜类果实采后腐烂的病原菌[4,5]。该病可以通过多种途径传播,可侵染植株、果实及种子,使幼苗患病,出现褐色坏死斑;带菌果实在采后贮藏运输过程中感染健康果实,使果实表面出现水渍状斑点,进而导致整个果实腐烂,严重影响瓜类产量[6];还可以通过种子远距离传播。果斑病具有发病迅速、爆发性强、传播速度快等特点,感染会给瓜类产量带来巨大的损失,成为影响我国瓜类生产的主要病害之一[7]。该病高温多雨潮湿的年份发病较重,一般田块发病率在45%~75%,严重时高达100%,该病的发生严重危害了瓜类产业的健康可持续发展[8]。目前,瓜类果斑病在国内部分省区发生危害,主要有海南、陕西、河北、山西、吉林、沈阳、内蒙古、新疆[9]。本文介绍通过田间接种多种作物叶片和室内菌悬液浸泡不同葫芦科作物种子两种方式进行寄主范围测定。
1.1 材料
1.1.1 病原菌
采用瓜类果斑病的标准菌株,山东省植保总站提供。
1.1.2 供试植物
选用西瓜、甜瓜、黄瓜、南瓜、丝瓜、西葫芦、苦瓜、白菜、豇豆、番茄、辣椒这11种作物作为田间接菌作物,所选品种为滨州市农户田间地头主栽品种。选用西瓜、甜瓜、黄瓜、南瓜、苦瓜5种葫芦科作物作为室内菌悬液浸种试验,品种及来源见表1。
1.2 方法
1.2.1 田间接种方法
先用4%次氯酸钠浸种15min,清水冲洗后播种在无菌土中,待出苗后植株3~5叶期,分别采用注射和针刺两种方法接种,接种所用菌株是在NA培养基上生长48h,然后用无菌水配制成的1×108cfu/mL菌悬液。每株接种5片叶,4次重复。设置清水对照组。接种后外罩塑料袋保湿2d,2d后开始观察记录不同作物的症状表现,7d后观察记录发病情况,计算发病率和病情指数,研究明确病原菌的寄主范围[10]。
1.2.2 分级标准及计算公式[11]
病斑面积占叶片面积的比例来判断植株的发病级别,分级标准见表2,然后计算发病率和病情指数,公式见式(1)和式(2)。
1.2.3 室内菌悬液浸种试验
用无菌水配制成1×108cfu/mL菌悬液,将不同葫芦科种子浸泡在菌悬液中,震荡浸泡24h,催芽并使种子带菌,取出后用无菌水冲洗3~4次,洗去表面菌悬液,无菌水浸泡5种葫芦科种子为对照,每种种子菌悬液重复处理4次,每次重复30粒种子,进行培养皿之间发芽试验[12]。将种子均匀放在带有湿润吸水纸的灭菌培养皿内,每个培养皿内放置3粒种子,种子上面再覆盖另一张湿润吸水纸保湿,28℃内保湿培养,每天观察发病情况,14d记录不同种子的发病情况,计算病株率。
2.1 田间接种
2.1.1 田间接种后的症状
(1)西瓜症状
4d后出现明显症状,病斑直径0.1mm左右,病斑中间呈暗褐色,周围有明显的黄色晕圈。叶片上病斑密集,叶背面病斑呈灰白色,病健交界处明显,扩展后病斑呈水渍状,有黄色晕圈,严重时病斑融合呈一大斑,黄褐色至黑褐色,病斑沿叶脉进行扩展,后期整个叶片干枯死亡。
(2)甜瓜症状
7d后症状明显,病斑沿叶片主脉明显扩展,叶脉附近叶片颜色变浅,褪绿,病斑呈黄褐色,中间颜色浅,病斑外有黄色晕圈,较严重的可见叶片穿孔、开裂。发病速度较慢。
(3)苦瓜症状
4d后出现明显病斑,直径0.1~0.2mm左右,叶片正面出现暗褐色病斑,病斑明显扩展,具黄色晕圈,叶背面颜色褪绿,随后病斑进一步扩大,沿主脉扩展,受叶脉限制,形成多角形或长条形病斑,暗褐色,周围有黄色晕圈,叶片背面灰白色,后期病斑不融合。
表1 室内菌悬液浸种试验供试植物
表2 植株发病级数判断标准
(4)南瓜症状
注射4d后出现坏死斑,黄褐色至深褐色,具黄色晕圈,后期病斑穿孔,开裂。
(5)丝瓜症状
4d后表现发病症状,针刺孔附近出现褪绿斑,颜色变黄,病斑周围具有明显黄色晕圈,随后病斑进一步扩大,具明显黄色晕圈,较严重的可见病斑融合,形成穿孔,叶背面病斑呈水渍状,中间灰白色。
(6)黄瓜症状
病斑颜色较浅,呈白色至灰白色,叶背面症状与正面相似,扩展范围较小,与其他瓜类的症状有区别。
(7)西葫芦症状
注射后出现褐色枯死斑,周围有浅黄色晕圈,叶背面颜色较浅,褪绿;针刺接种处发病明显,但症状较轻。
(8)番茄、辣椒、白菜、豇豆症状
接种后上述作物未发现病斑,也未在叶片中分离到病原物。
2.1.2 田间寄主作物发病情况
表3显示的是11种作物的发病情况调查结果。由表3可知,瓜类果斑病对西瓜、甜瓜、苦瓜的致病力最强,发病率均达到100%,病情指数分别为49.44、38.89、45.56;对南瓜、西葫芦、丝瓜、黄瓜的致病力也较强,但病斑扩展速度不同;对番茄、白菜、辣椒、豇豆没有致病力。
2.2 室内菌悬液浸种作物测定
不同葫芦科作物浸种后发芽时期表现不同,培养2d后甜瓜种子最先发芽,平均发芽率为12.2%。培养7d后,5种作物均发芽,发病症状基本相同,具体表现为子叶发病,出现深绿色小点,凹陷,根茎部发病较少,发病轻,部分茎基部、根微变黄色,还未表现典型发病症状。培养14d后,不同作物发病症状及侵染部位存在区别。西瓜、甜瓜发病最重,部分西瓜、甜瓜种子开裂后即死亡,根系、子叶还未长出。另部分西瓜、甜瓜受侵染后,部分植株根部发病较重,表现为根系不发达,须根少,且部分根系颜色变为黄褐色;部分甜瓜苗茎部发病较重,茎褪绿凹陷,后开裂腐烂,植株死亡;5种作物叶片发病表现症状基本相同,初为水浸状褪绿病斑,后病斑扩大,部分连片,部分病斑周围出现菌脓。由表4可知,甜瓜病株率最高,为93.33%;其次为西瓜,病株率为90.83%;黄瓜病株率最低,为41.67%。
表3 瓜类果斑病的田间寄主范围测定结果
表4 瓜类果斑病的室内寄主范围测定结果
通过田间人工接种和室内菌悬液浸种试验表明,瓜类果斑病作为一种较危险的病害,对多种作物特别是瓜类具有较强的致病能力,种子带菌及植株伤口侵入均能导致瓜类作物致病,对西瓜、甜瓜、苦瓜等造成较大的损失。田间接种试验中,番茄、白菜、辣椒、豇豆未表现发病症状,说明未对其有致病力。室内菌悬液浸种试验中,5种葫芦科作物均表现发病症状,可见,种子带菌是其传播途径之一,生产过程中应注意种子的处理。总之,瓜类果斑病可以通过多种途径传播,危害多种作物,在生产中应引起足够的重视,防止其扩展蔓延。
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Host Range Determination of Melon Fruit Blotch
CHANG Hui-hong,ZHANG Lu-sheng,WANG Xiao-meng,BA Xiu-cheng
(Binzhou Plant Protection Station of Shandong Province,Binzhou 256600,China)
Melon fruit spot disease seriously endanger the healthy development of the melon industry.In the paper,the author carry out the host range test through two ways,including field inoculation many blades and indoor bacterial suspension with different cucurbit seeds.The results showed that the watermelon,muskmelon,bitter gourd and other cucurbit crops were the host pathogen,wound and seed could make the host infected.
Melon fruit spot disease;artificial host
S436.42 S436.429
A
1008-1038(2017)04-0075-04
2017-02-19
常慧红(1978—),女,农艺师,从事农作物病虫害综合防治工作