分析食品微生物检验中的无菌操作技术

宋红梅

摘 要：无菌是指当前环境当中的微生物孢子或者营养细胞不存在，因此，无菌操作技术就是在无菌的环境下，通过无菌的器材进行细胞传代以及植物组织培养工作。无菌操作属于微生物检测当中的重要工作，只有保障检测设备在无菌的状态下，才能确保样品不受到任何污染。该文主要分析食品微生物检验中的无菌操作技术。

关键词：食品 微生物检验 无菌操作

中图分类号：TS207 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2016）12（b）-0221-02

食品的微生物检测主要是测试食物菌群繁殖状况，比如大肠菌群、酵母菌群等的状况，对于保障食品安全具有十分重要的作用，为食品安全标准以及卫生标准提供必要的科学依据。然而，由于食品当中存在糖、蛋白质等成分，为微生物繁殖提供很好的营养环境，从而对检验产生干扰，导致微生物检验比较困难以及复杂。因此，应当严格按照无菌操作的流程以及规范进行操作。

1 无菌操作方法及注意事项

通过对食物微生物进行详细的检查、分析，总结出无菌操作方法。无菌的定义是在生活中不包括对生命活动营养细胞情况的保障。无菌制作是用无菌装备来分析植物构成、细胞接种等方法来提高制作水平，进而可以阻止微生物潜入无菌的环境。通過对微生物的检查、分析获知，如果没有检查装备，养殖菌无菌的根基就不可能对抽样物品进行保护。因此，可以把无菌操作定义为安全保障制作。以下对无菌制作方法应注意的事项进行一些介绍。

第一，在食物微生物检查、分析的基准上，在无污染的区域范围中进行普通的抽样检查。如，试验平台、共同操作平台、讨论平台等。在观察病原微生物方面，一定要在生物二级试验室中进行。其目的就是为了使无菌室内清洁，保障墙四周、桌子上、台上等的消菌工作。但是在操作前运用紫外线装备进行30 min的照射。还要在每一个时间段内对沉降菌的信息进行计数、对微生物新陈代谢状况进行观察。不许经常在无菌室内走动，避免在无菌室中侃侃大笑。

第二，就是对检查工作人员的具体要求。例如，踏入试验室前要洗干净手，禁止穿上与工作无关的平常着装，穿上室内所要求的工作服、鞋子、帽子等。

第三，在微生物操作步骤中，打开抽样物品时要注意检查人员与抽样物品间的距离关系，物品没进行消毒前是禁止与抽样物品进行触碰，抽样物品只允许在短时间内在空气中暴露，利用无菌器件进行取样，检查工作员绝不可将手放在样品上面及禁止取出来过的样品再放回去。操作时动作只许慢不许快，裁接装备在使用前后都要利用灼烧方法进行消毒，吸管严禁与嘴巴接触。

第四，开封袋口或瓶口前，要通过酒精涂擦的方法进行清洁，在液体接种培养方面，禁止将使用液在其他装备或工作桌上溅洒，确保一个安全干净的环境。假如真出现这样的意外，就要用到酒精涂擦，再用消毒液进行清洁。但是具有菌液的玻璃片或吸管要在消毒液中进行消毒。

第五，对物品进行分类、物品设置也要进行分类安放、做出检查计划。

2 无菌操作技术在微生物检验中的应用

2.1 显微镜技术

微生物体积极小，肉眼不便观察。可以利用显微镜装备来观看。而在实验室中光学显微镜更易于观察微生物的形态结构。在使用显微镜时，了解染料的技能、涂片技能也是极其重要的。无论在染料过程还是在涂片过程中，都要利用无菌制作来预防对杂菌的污染。如果玻片在操作中被污染，那么以上所做的观察都是没有准确保障的。毋庸置疑，在制作阶段中，为了达到无菌制作，应对以下几点进行关注：（1）在实验室观看平板栽培物中，一般不采用开瓶检查，只是利用检查结果来进行开瓶检查。如，在移植培种及样品涂片过程中，可以开缝隙，但要适度，绝不可以完全开瓶；（2）涂片过程，玻片要被架子牢牢夹住，禁止与手进行直接性的接触，避免细菌受到感染；（3）玻片在用前或是在用后都要进行清洁消毒。

2.2 无菌操作技术

在微生物检查的过程中接种菌苗、分离操作、移植操作都要排除与杂菌间的干扰，才达到培养体的要求。其中就要营造出无杂菌干扰的工作氛围，在这个工作氛围中对无菌制作的要求必须严格，才能为制作的安全指数做出质量保证。常态下，无菌接种要在酒精灯周围操作，要达到操作的严格要求，就可以在无菌室内与生物安全、高能清洁工作台相结合进行工作。无菌制作技能包括无菌范围、无菌装备及无菌制作共3个方面。当然，所谓的无菌范围是具有相对性的。就是在无菌室内环境中所提供的无菌环境，其中需要生物安危等装备对危害飘浮颗粒进行隔离，确保抽样物品的安全性、环境的无污染性、人员的安危性。对无菌室的设计要求要达到布局合理性、运作安全性、成本优惠性。与生物安危相比较，更易清洁消毒、外形小、移动性高，但在使用过程中不易于操作。与普通接种制作相比较，处于适中层次。就如致命菌检查接种制作：高能清洁工作台的使用率高，而无菌状况下也是以高细过滤无菌气体来达到的。然而，无菌装备常用于微生物的检查装备中，其含有灭菌装备和消毒装备。灭菌装备在检查操作中的灭菌程序，如，稀释液体、养殖基地、玻璃容器等。在器皿装备材料的灭菌中，首先要利用纸进行打包整理。但是也有些东西又不能进行灭菌的操作。在消毒材料上，就要关注检查中操作未能使用的灭菌处理材料，就需要用到消毒的方法。例如，工作装、称枰、试管器材等，常用带有化学性物品处理。最终，实现无菌制作。

2.3 纯种分离、培养技术

首先，食品微生物检测的过程中，为了确定微生物群体，应当将微生物群体从混杂的物体当中分离开来，从而得到纯种的培养物。一般情况下，具有根据微生物的不同特点设计培养基，促使微生物大量繁殖。或者采取某些微生物的抑制素等，通过抑制其他微生物，从而将其他无关的菌群淘汰。然后，通过稀释的方式，在培养基上形成单菌落，保障分离的菌群为纯菌群。其次，纯种培养技术，微生物检验的过程中，纯种培养物从器皿当中调换，肉眼无法观察到其中的污染物质，然而，打开器皿之后，可能导致培养基被空气中的微生物污染。因此，在微生物的移接过程中，应当保障在无菌的环境下进行严格的无菌操作。接种是非常基础的操作，关键是做到无菌，如果操作不严格，将导致培养基污染，从而影响检验的效果。

3 结语

综上所述，该文主要论述了无菌操作技术以及操作过程中的注意事项，无菌操作技术在食品的微生物检测中得到应用并发挥重要作用，只有无菌操作，才能切实保障食品微生物检验的可靠性以及准确性。

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