四川省2016年小反刍兽疫免疫抗体监测与分析

周莉媛，张 毅，邵 靓，张 睿，邓 飞，李 丽

（四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

四川省2016年小反刍兽疫免疫抗体监测与分析

周莉媛，张 毅，邵 靓，张 睿，邓 飞，李 丽

（四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041）

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒感染小反刍兽的一种急性、烈性、接触性传染病，该病对我国畜牧业发展造成了极其严重的影响。为了解四川省2016年小反刍兽疫免疫抗体情况，我们分别在两次集中免疫后，从四川省42个县采集2557份羊血清，采用竞争ELISA法进行小反刍兽疫免疫抗体检测，结果有1833份样品免疫合格，免疫合格率为71.69%。

小反刍兽疫；竞争ELISA；免疫抗体

小反刍兽疫（PPR）又称“羊瘟”，是由副粘病毒科麻疹病毒属小反刍兽疫病毒引起的急性、接触性传染疫病，主要感染绵羊和山羊等小反刍兽，以高热、口炎、胃炎、腹泻和肺炎为特征，易感羊群的发病率和死亡率可达100%。该病是OIE法定报告动物疫病，也是全球计划根除的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

小反刍兽疫是1942年在非洲的科特迪瓦首次报道，我国首次发生小反刍兽疫是在2007年的西藏自治区。2014年以来，新疆、甘肃、内蒙、辽宁、湖南等地相继发生了小反刍兽疫疫情，四川省在日常监测中也零星监测到小反刍兽疫病原学阳性。为防范小反刍兽疫疫情在四川发生，四川省采取了小反刍兽疫的强制免疫，于每年的3月到4月、9月到10月各进行一次集中免疫。为切实了解疫苗的免疫效果，我们分别在2016年5月和11月选取了四川省21个市州的部分规模羊场和散养户进行了免疫抗体水平监测。

1 材料

1.1 检测试剂 兰州兽医研究所小反刍兽疫竞争ELISA抗体检测试剂盒，批号：20161010118。

1.2 样品采集 血清样品采集自四川省21个市（州）42个县的规模羊场及散养户，共计2557份羊血清（其中5月份采集1264份，11月份采集1293份）。抽样范围覆盖全省21个市（州），每个市（州）随机抽取两个县，每个县随机抽取2个规模羊场，2个乡镇（10个散养户）。

2 方法

2.1 检测方法

2.1.1 使用前将所有试剂恢复至室温。

2.1.2 在酶标板上检测样品孔中依次加50μL待检血清，每份样品做两个重复孔；其中标准阴性血清设2孔，标准阳性血清设2孔，每孔加入相应血清50μL；空白对照设2孔，每孔加100μL血清稀释液；单克隆抗体对照设4孔，每孔加50μL血清稀释液。

2.1.3 将单克隆抗体用血清稀释液作1∶100倍稀释，除空白对照孔外其他各孔加50μL稀释后的单克隆抗体；37℃孵育1h。

2.1.4 取出酶标板甩干，用洗涤液洗涤3次，在吸水纸上甩干。

2.1.5 每孔加入50μL酶结合物，37℃孵育1h。

2.1.6 按洗涤步骤洗涤3次。

2.1.7 每孔加入底物溶液50μL，37℃避光作用10min。

2.1.8 每孔加50μL终止液，在酶标仪450nm波长处测定每孔的OD值。

2.2 检测结果判定 通过血清样品和对照孔的OD值计算血清样品的抑制率（PI值），当待检血清PI值≥45%时，判为抗体阳性，即为免疫抗体合格。

3 结果

3.1 2016年全年共检测免疫羊血清2 557份，合格1833份，平均合格率为71.69%。其中5月份平均合格率为70.09%，11月份平均合格率为73.24%。

3.2 在1680份规模场羊血清中，合格1217份，平均合格率为72.44%。其中5月份平均合格率为70.36%，11月份平均合格率为74.52%。

3.3 在877份散养户羊血清中，合格616份，平均合格率为70.24%。其中5月份平均合格率为69.58%，11月份平均合格率为70.86%。

表12016 年四川省小反刍兽疫免疫抗体检测结果 份

4 分析讨论

4.1 从检测结果看，2016年全年小反刍兽疫免疫抗体平均合格率在70%以上，达到农业部规定的要求，可以对羊群产生免疫保护，表明四川省小反刍兽疫强制免疫工作基本达到预期效果。下半年抗体合格率较上半年有所提高，这与实行强制免疫后，防疫人员及养殖场（户）主免疫意识增强和免疫操作水平提高有一定关系。

4.2 小反刍兽疫尚无有效的治疗方法，疫苗接种是阻止该病发生，减少病毒扩散及潜伏感染的有效手段。免疫平均合格率与疫苗种类、冷链系统、免疫操作、动物身体状态等多种因素相关，要进一步提高免疫合格率，还需从多方面优化，从而降低疫情发生的风险。

4.3 不同养殖方式下，小反刍兽疫免疫抗体的合格率有所差异。散养户羊的抗体合格率低于规模场，说明除了免疫意识，饲养环境和管理水平也对羊群小反刍兽疫的免疫效果有一定影响。四川省目前对小反刍兽疫进行强制免疫，能有效地保护易感动物，然而应该强调的是，加强引种检疫、改善养殖环境、重视饲养管理也是远离传染源、阻断传播途径的重要措施。■

[1] 蔡冬冬，李金海,邢坤，等.小反刍兽疫概述[J].四川畜牧兽医，2014，41（5）：31-33.

[2] 龙云凤，刘小慧，周晓黎，等.小反刍兽疫流行病学及防控研究进展[J].动物医学进展，2012，33（5）：94-98.

[3] 殷震，刘景华.动物病毒学[M].2版.北京：科学出版社，1997.

[4] 刘永宏，赵丽，曹胜波，等.小反刍兽疫在中国的流行趋势及应对措施[J].动物医学进展，2015，36（1）：110-113.

[5]Zhang G R，Yu R S，Zeng J Y，et al.Development of an epitope-based competitive ELISA for the detection of antibodies against Tibetan peste des petits ruminants virus[J].Intervirology，2013，56（1）：55-59.

[6] 刘佩红，沈素芳，黄忠，等.动物外来疫病—小反刍兽疫防控技术研究进展[J].上海畜牧兽医通讯，2008（6）：14-15.

[7] 孙圣福，陈伟，马慧玲，等.小反刍兽疫免疫抗体检测与分析[J].山东畜牧兽医，2016，37（3）：4.

Surveillance and Analysis of Immune Antibodies on Peste des Petits Ruminants in Sichuan Province in 2016

Zhou Liyuan，Zhang Yi，Shao Jing，et al.
（Animal Disease Prevention and Control Center of Sichuan Province，Sichuan Chengdu 610041，China）

Peste des petits ruminants（PPR）is a severe acute，potent，contagious infection on ruminants. This disease caused extremely serious influence on the development of animal husbandry in China.In order to understand the immune antibody of PPR in Sichuan province，2 557 samples of goat serum from 42 counties were collected after two concentrated immunization in 2016.Competitive ELISA was used to detect immune antibody of PPR，of which 1 833 samples had qualified immunity and the immune qualified rate was 71.69%.

Peste des petits ruminants；Competitive ELISA；Immune antibody

S854.43

：B

：1001-8964（2017）04-0030-02

2017-02-10

周莉媛（1988-），女，四川德阳人，大学本科，助理兽医师。