连续四年金黄色葡萄球菌耐药性和克林霉素诱导型耐药分析

韩秀峰(HAN Xiu-feng)，胡志东(HU Zhi-dong)

(1天津市红桥医院，天津 300131； 2 天津医科大学研究生院，天津 300070； 3 天津医科大学总医院，天津 300052)

连续四年金黄色葡萄球菌耐药性和克林霉素诱导型耐药分析

韩秀峰(HAN Xiu-feng)1，2，胡志东(HU Zhi-dong)3

(1天津市红桥医院，天津 300131； 2 天津医科大学研究生院，天津 300070； 3 天津医科大学总医院，天津 300052)

目的 了解某院金黄色葡萄球菌(SAU)耐药性和克林霉素诱导型耐药情况，指导临床医生合理使用抗菌药物。方法 回顾性分析该院2011—2014年临床分离的233株SAU标本分布与药敏结果，并进行克林霉素诱导耐药试验(D-试验)。 结果 共分离233株SAU，标本来源以痰为主，其次是伤口分泌物；科室以重症监护病房(ICU)和呼吸内科为主。药敏结果显示233株SAU对青霉素和氨苄西林的耐药率最高，分别为95.71%、90.99%；对红霉素、克林霉素、环丙沙星、庆大霉素的耐药率分别为83.26%、67.81%、47.21%、43.78%，均>40%；对四环素、头孢唑林、复方磺胺甲口恶唑的耐药率分别为33.48%、27.04%、26.18%；对万古霉素100%敏感。233株SAU 中MRSA检出率为30.47%，2011—2014年MRSA检出率分别为39.78%、34.43%、17.95%、15.00%；D-试验阳性菌株13株，占总菌株的5.58%。结论 加强细菌耐药性监测，利用D-试验检测克林霉素诱导型耐药，对指导临床医生合理使用抗菌药物具有重要意义。

金黄色葡萄球菌； 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌； 克林霉素诱导耐药试验； 抗药性，微生物； 耐药率

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，SAU)广泛存在于空气、水及人的体表、鼻咽部和肠道,可引起多种感染，已经成为医院感染的主要病原菌之一。随着抗菌药物的大量使用，临床分离的SAU耐药性也越来越严重，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA)和红霉素诱导克林霉素耐药菌株引起的感染，给临床医生治疗带来了困难。为了解天津市红桥医院SAU的耐药性和克林霉素诱导型耐药情况，指导临床医生合理使用抗菌药物，笔者回顾性分析了本院2011—2014年临床分离的233株SAU，现报告如下。

1 对象与方法

1.1 菌株来源 233株SAU均分离自本院2011—2014年所有住院患者送检的各类合格标本。同一例患者同时期培养的相同菌株只计1株。

1.2 菌株鉴定与药敏试验 233株SAU的分离培养，触酶试验和血浆凝固酶试验严格按照《全国临床检验操作规程(第三版)》进行，以上菌株均使用上海复星佰珞生物技术有限公司的BIOFOSUN微生物鉴定药敏分析仪进行鉴定和药敏试验，并按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判读结果。鉴定板、药敏板和其他配套试剂均购自该公司。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923和ATCC 29213。

1.2.1 MRSA检测 采用头孢西丁纸片法，在M-H平皿上接种0.5麦氏单位的SAU菌悬液，贴30 μg头孢西丁药敏纸片，经35℃培养24 h后判读结果，抑菌圈直径≤19 mm为阳性。

1.2.2 克林霉素诱导耐药试验(D-试验) 将浓度为0.5麦氏单位的SAU菌悬液均匀涂布于M-H平皿上，然后贴上红霉素纸片(15 μg)和克林霉素纸片(2 μg)，两纸片中心点相距15 mm，经35℃培养24 h，观察在靠近红霉素纸片一侧的克林霉素的抑菌环有无截平现象，即D型环形成，有D型环形成者为阳性，无D型环形成者为阴性。

1.3 统计分析 应用本院Lis系统软件中的统计报表功能对233株SAU的临床分布与药敏结果进行数据处理。

2 结果

2.1 标本分布及构成 233株SAU主要分离自痰及伤口分泌物标本，分别占56.65%(132株)、26.61%(62株)；分布科室以重症监护病房(ICU)和呼吸内科为主，分别占40.77%(95株)、28.76%(67株)。

2.2 药敏试验结果 233株SAU对12种抗菌药物的耐药情况见表1。233株SAU中MRSA检出率为30.47%，4年间MRSA检出率依次为39.78%、34.43%、17.95%、15.00%，呈下降趋势(χ2=12.39，P=0.006)。

表1 2011—2014年SAU对抗菌药物的耐药情况[耐药菌株(%)]

2.3 D-试验结果 233株SAU中E-R/C-S菌株(E为红霉素,C为克林霉素,R为耐药,S为敏感)36株，其中D试验阳性的菌株为13株，占总菌株的5.58%(13/233)，占E-R/C-S菌株的36.11%(13/36)。

3 讨论

本院2011—2014年SAU主要分离自呼吸道(痰)标本，占56.65%，其次是伤口分泌物，占26.61%,此结果与利嘉琦等[1]报道的结果相似；与马玲等[2]报道的分泌物为主,占53.7%，痰次之(占15.2%)结果不相符。科室分布以ICU、呼吸内科为主，分别占40.77%、28.76%，提示该菌在本院以呼吸道感染为主,其次为伤口感染，而ICU和呼吸内科是该菌耐药性与医院感染监测的重点科室。

SAU是引起医院感染最常见的条件致病菌之一, 其在医院感染的革兰阳性病原菌中排在首位[3]。随着临床抗菌药物使用的增加，其耐药越来越严重，尤其是MRSA和克林霉素诱导型菌株引起的感染给临床治疗带来了困难。MRSA主要是产生了青霉素结合蛋白2a(PBP2a)，PBP2a由位于葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)上的mecA基因编码[4]；而大环内酯类抗生素的耐药机制是因erm基因编码的23S rRNA甲基化可导致核糖体构型的改变，导致大环内酯类、林可酰胺类、链阳菌素类与细菌核糖体靶位的结合能力下降。由于上述抗生素均具有相同的或重叠的靶位作用位点，故细菌可同时对此三类抗生素交叉耐药，被称为MLSB耐药[5]。而红霉素耐药克林霉素敏感的诱导型耐药菌株，只有通过试验才能检测出[6]。

本组结果显示，SAU对青霉素与氨苄西林耐药率最高，分别为95.71%、90.99%，与马瑛[7]报道的结果相近，建议临床医生停止使用该类药物治疗SAU感染；对红霉素、克林霉素、环丙沙星、庆大霉素的耐药率分别为83.26%、67.81%、47.21%、43.78%，耐药率均>40%,可依据药敏试验结果合理选择抗菌药物；对四环素、头孢唑林、复方磺胺甲口恶唑的耐药率分别为33.48%、27.04%、26.18%，可用于经验性治疗该菌引起的感染；万古霉素100%敏感,与曹敏[8]报道的结果相符，建议在治疗由该菌引起的严重感染，或MRSA菌株引起的感染时，可首选对该菌保持高敏感性的糖肽类药物万古霉素。本组SAU中MRSA检出率为30.47%，低于王凤玲等[9]报道的55.4%，高于马玲等[2]报道的20.3%；2011—2014年4年间MRSA检出率依次为39.78%、34.43%、17.95%、15.00%，呈下降趋势，可能与本院近几年严格执行多重耐药菌管理制度有关。另外，由于克林霉素具有口服吸收好，对胃肠道刺激小，对肾脏毒性低等特点，临床上也常用来治疗SAU引起的感染，但本院常规的药敏试验检测不出克林霉素诱导型耐药菌株，给临床治疗带来困难。233株SAU中D-试验阳性菌株有13株，占E-R/C-S菌株的36.11%，此结果低于王凤玲等[10]报道的63.6%。因此，建议微生物检验人员对红霉素耐药克林霉素敏感的菌株，做D-试验，阳性菌株及时提示临床医生，避免使用克林霉素治疗，可依据药敏结果合理选用抗菌药物。

总之，准确及时地分析细菌耐药性，对指导临床医生治疗感染，控制和延缓耐药菌株的增加均有重要的意义。

[1] 利嘉琦，张莉滟，邹伟民，等.金黄色葡萄球菌临床感染与耐药性分析[J].国际检验医学杂志，2012，33(23)：2879-2880,2882.

[2] 马玲，叶扬，张芳.医院感染金黄色葡萄球菌的临床分布与药敏结果分析[J].国际检验医学杂志，2015，36(2)：225-226.

[3] 吴迪，胡静仪，张弢.2002—2011年医院病原菌分布与耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2014，24(9)：2096-2098.

[4] 王璐,徐元宏.金黄色葡萄球菌杀白细胞素的研究进展[J].国际检验医学杂志，2014，35(9)：1156-1159.

[5] Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically; approved standard-ninth edition[S]. CLSI, 2012: M07-A9.

[6] 钱凤根，唐文明.772株葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药检测[J].抗感染药学，2010，7(1)：44-46.

[7] 马瑛.109株金黄色葡萄球菌培养及药敏结果分析[J].国际检验医学杂志，2014，35(15)：2095-2096.

[8] 曹敏.78株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药分析[J].国际检验医学杂志，2014，35(24)：3388-3389.

[9] 王凤玲，侯振江，张金艳，等.金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的相关性研究[J].国际检验医学杂志，2011，32(16)：1820-1821.

[10] 王凤玲，李洪志，陈洋，等.金黄色葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药性分析[J].国际检验医学杂志，2013，34(1)：100-101.

(本文编辑：张莹)

Antimicrobial resistance and inducible clindamycin resistance inStaphylococcusaureusfor four consecutive years

(1 Tianjin Hongqiao Hospital, Tianjin 300131, China; 2 Graduate School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China; 3 Tianjin Medical University General Hospital, Tianjin 300052, China)

2016-06-23

韩秀峰(1979-),男(汉族),河北省武安市人，检验技师，主要从事临床微生物检验研究。

韩秀峰 E-mail:hanxiufeng0826@163.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2017.03.021

R446.5

B

1671-9638(2017)03-0270-03