菩提树叶斑病病原菌鉴定及室内药剂筛选试验

向见+谭志坚

摘要 通过对重庆南山地区菩提树叶斑病多次分离培养，根据症状和致病特点以及病原菌的显微形态，表明菩提树叶斑病病原菌为假尾孢属Pseudocercospora sp.真菌。室内药剂毒力测定表明，防控效果从好到差依次为25%腈菌唑乳油>50%多菌灵可湿性粉剂>80%乙蒜素乳油>40%福美双可湿性粉剂。

关键词 菩提树；叶斑病；鉴定；药剂筛选

中图分类号 S432.4+4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）23-0115-01

菩提树（Ficus religiosa L.）为桑科榕属植物，树体高大，叶形漂亮，喜高温高湿及阳光充足的环境[1]。重庆市气候环境较适合菩提树生长，市区内栽植有大规格的菩提树。因绿地内有大量同属乔木栽植，黄葛树和小叶榕上常见的病虫害也对菩提树造成了不良影响，褐斑白蚕蛾和叶斑病时常发生危害[2]。笔者于2009年5月至2010年6月对重庆市菩提树叶斑病的症状特点进行了详细调查，并进行了病原菌鉴定以及杀菌剂药效试验，详细结果如下。

1 材料与方法

1.1 试验情况

2009年5月至2010年6月，在重庆南山风景区、华岩寺风景区定点、定期对菩提树叶斑病进行了系统观察，详细记载和描述了病害从发生危害到停止的各个时期的症状特点。供试药剂为40%福美双可湿性粉剂、25%腈菌唑乳油、80%乙蒜素乳油、50%多菌灵可湿性粉剂。

1.2 试验方法

1.2.1 病原菌的鉴定。①分离培养。取菩提树病叶病健交界部分，切成2.5 mm×2.5 mm的小块，接种到预先准备好的 PDA培养基上，置于25 ℃的人工气候箱中培养，观察菌丝的形态及生长状况。②柯赫氏法则鉴定病原菌。从室外采摘无病的叶片，用无菌水仔细清洗叶片后，将分离得到的病原菌接种于该叶片上，并以未接种的健康叶片作对照，放入培养皿中，置于25 ℃的人工气候箱中培养。待接种叶片出现病症后，与田间病叶病症作比较[3]。

1.2.2 不同药剂对病原菌的抑制作用。各供试药剂稀释成5个浓度梯度（40%福美双可湿性粉剂200倍液、400倍液、800倍液、1 600倍液、3 200倍液；25%腈菌唑乳油、80%乙蒜素乳油、50%多菌靈可湿性粉剂的5个浓度梯度均分别为500倍液、1 000倍液、2 000倍液、4 000倍液、8 000倍液），并设常规用农药的常规浓度为标准对照和清水为对照。每个处理接种10个叶盘，3次重复。采用喷雾接种法，分生孢子制成一定浓度的孢子悬浮液，在低倍镜下每视野100个孢子左右，再将健康的叶片洗净，吸干表面水分，经镜检确定无病菌孢子后用打孔器打成直径6 mm的叶盘，将叶盘在各供试药剂的系列浓度梯度药液中浸渍10 s，叶正朝上放在培养皿中，采用喷雾法将菌孢子接种在叶盘正面，培养介质为少许无菌水[4-5]。放在人工气候箱中培养，温度25 ℃，湿度 95%。7 d后调查感染率[6]，计算公式如下：

2 结果与分析

2.1 菩提树叶斑病症状

感病叶表面病斑呈褐色，背面呈淡灰褐色；病健交界处分明，病斑褪绿，起初直径为2～3 mm的近圆斑，后逐渐扩大为椭圆或不规则形状；病部中央可观察到环状突起，环的叶背部常有黑点。

2.2 菩提树叶斑病病原菌

菌丝浅黄色，有隔膜，宽1.5～2.5 μm。分生孢子梗稀疏至紧密簇生，单梗青黄褐色至褐色，色泽均匀，宽度不规则，直立至弯曲，不分枝或偶有分枝，顶部钝圆至圆锥形，多隔膜，30.0～240.0 μm×3.0～5.0 μm。分生孢子呈棍棒形至圆柱形，青黄色至浅青黄褐色，直立或约有弯曲；顶部圆钝，基部倒圆锥形，有1～6个隔膜，有时在隔膜处缢缩。符合假尾孢菌属Pseudocercospora sp.的形态描述。

2.3 室内药剂毒力测定

由表1、2可知，在3种无公害农药中，以25%腈菌唑乳油对菩提树叶斑病的毒力最高，24 h EC50值为11.93 mg/kg；其次为50%多菌灵可湿性粉剂，24 h EC50值为32.44 mg/kg；毒力最低的是40%福美双可湿性粉剂，24 h EC50值为116.57mg/kg；按照对菩提树叶斑病毒力从大到小的顺序是25%腈菌唑乳油>50%多菌灵可湿性粉剂>80%乙蒜素乳油>40%福美双可湿性粉剂。

3 结论与讨论

试验结果表明：普提树叶斑病病原菌为假尾孢菌属Ps-eudocercospora sp.真菌；室内毒力测定结果表明，防控结果为25%腈菌唑乳油>50%多菌灵可湿性粉剂>80%乙蒜素乳油>40%福美双可湿性粉剂。本测定仅为室内毒力，没有涉及田间药效试验。此外，本试验的测定方法或许与生产上有一定的差异，但对生产实践总防治菩提树叶斑病的药剂筛选具有参考价值。

4 参考文献

[1] 中国科学院中国植物志编委会.中国植物志：第14卷[M].北京：科学出版社，1994.

[2] 华南农学院.植物化学保护[M].北京：农业出版社，1979：412.

[3] 方中达.植病研究方法[M].3版.北京：中国农业出版社，1998：37-347.

[4] 刁家文，孙波.金叶女贞叶斑病发生机制及综合防治措施[J].贵阳学院学报（自然科学版），2007（2）：10-12.

[5] 郭英兰，蒋毅.中国尾孢菌属及其近似属的研究Ⅱ.（英文）[J].菌物系统，2000（3）：302-305.

[6] 李玉中，杨芳，刘春，等.衡阳地区莴笋叶斑病病原菌的鉴定及其室内药剂筛选[J].江苏农业科学，2014，42（2）：102-104.