犬瘟热临床病理学和SLAM细胞受体的研究进展

王翠兰

（山东省乳山市畜牧兽医工作站 264500）

犬瘟热临床病理学和SLAM细胞受体的研究进展

王翠兰

（山东省乳山市畜牧兽医工作站 264500）

犬瘟热是一种危害宠物饲养业、野生动物保护业，以及水貂、狐狸、貉等毛皮动物养殖业的重要传染病，发病率和死亡率较高。本文从临床病理学、细胞受体等方面对犬瘟热病毒的研究进展进行了综述。

犬瘟热(Canine Distemper, CD)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus，CDV)感染引起的犬科、鼬科和其他食肉目动物的急性或亚急性、高度接触致死性传染病，对当前养犬业、特种经济动物养殖业和野生动物保护业危害巨大。1905 年卡尔(Carre)发现其病原为一种病毒，所以本病也曾称为Carre氏病。l926年，Laidlaw和Duncan通过人工感染试验，主要是用完全隔离饲养的犬和易感性极高的雪貂，结果也确定了本病的病原为病毒。我国于1980年从病犬体内首次分离到犬瘟热病毒，现在犬瘟热病已在全国各广泛流行。该病是目前对我国养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业危害最大的疫病之一。

1 临床与病理学

1.1 临床表现 CDV的潜伏期根据传染来源的不同差异较大，同种动物感染潜伏期为3-10 d，异种动物感染可达30-90d，病毒需要在异种动物体内进行一段时间的适应。临床症状会因病毒毒力、动物机体状况、免疫水平、外界环境的差异而表现多种多样[1]。CDV具有淋巴亲嗜性(Lymphotropic)和神经侵蚀性(Neurotropic)，会导致体内和体外的细胞病理学感染和持续感染感染[1]。一般情况下，急性感染会引起呼吸道或胃肠道疾病，在早期或晚期还包括中枢神经系统的感染。自然感染早期发热一般不易被发现，犬瘟热急性病例典型表现体温双向热，主要表现为结膜炎，眼分泌物增多，初期为浆液性分泌物，后为脓性粘液；鼻镜干燥，打喷嚏，咳嗽，先干咳后转为湿咳，呼吸加快，肺泡呼吸音粗劣，出现锣音；呕吐，腹泻，粪便有时呈暗红色血便水样，有恶臭味。犬瘟热的神经症状是影响预后和感染恢复的最重要因素，由于CDV侵害部位不同临床表现有所差异。幼犬经胎盘感染可在28～42d时产生神经症状，母犬表现轻微或无明显症状。慢性病例后期共济失调，后躯麻痹。少数病犬的足垫表现为肿胀，最后表现过度增生、角化，形成所谓硬脚掌病。

1.2 病理变化 新生幼年动物患犬瘟热的主要病变随病程的发展和有无继发感染的发生而存在差异，未继发细菌感染时仅见胸腺萎缩与胶样浸润，脾、扁桃体等组织脏器中的淋巴组织减少，在发生细菌继发感染后会伴发呼吸系统和消化系统严重的炎症反应。成年动物感染主要表现为结膜炎、化脓性鼻炎，支气管肺炎或化脓性肺炎，卡他性或出血性胃肠炎。出现神经症状的病犬早期可见有非化脓性脑炎与白质中的空泡形成；晚期病犬则有可能见到由自体抗原--抗体反应引起的脱髓鞘现象。

2 SLAM细胞受体

2.1 信号淋巴细胞激活因子(SLAM) 现在已经证实的与CDV感染有关的细胞受体是信号淋巴细胞激活因子(Signaling lymphocyte activation molecules，SLAM，也称为CD150, CDw150, PIO-3)和肝素/硫酸肝素(Heparan/ heparan sulfate，HP/HS)受体。SLAM是近些年被证实为麻疹病毒属病毒的识别受体，在高亲和力受体SLAM存在的情况下，类肝素样受体的作用是微弱的，SLAM是CDV感染宿主的主要受体[2]。SLAM是包含有胞质内尾部和特征信号序列的一类双功能受体，属于免疫球蛋白CD2超家族成员之一。目前，国内外学者主要从建立SLAM受体细胞系、利用免疫组化进行受体组织定位、构建动物模型进行攻毒试验、以及分析病毒遗传变异性等方面探索细胞受体影响CDV感染的分子机制。Wenzlow等[3](2007)使用CDV强毒株A75/17接种CDV抗体检测阴性的犬，待发病后用免疫组化检测SLAM受体在CDV感染犬组织中的分布和数量，结果发现CDV感染引起肠系膜淋巴结、胃、肠、肺、脑和膀胱中SLAM受体的上调。Pillet S等[4](2009)建立了作为研究麻疹病毒的发病机制、并发症和疫苗的雪貂模型，该模型已被用于评估辅助蛋白C和V，以及SLAM的作用。Sawatsky B等[5](2012)为了研究上皮细胞在麻疹病毒致病中的重要性，利用上皮细胞受体(EPR)缺失的CDV进行攻毒试验，发现这种病毒低效率地感染犬和鼬的上皮细胞，但并没有引起细胞融合形成合胞体。另一方面，EPR缺失的CDV在表达犬SLAM受体的细胞中复制，与野生型CDV有相似动力学。EPR缺失的CDV感染的动物没有产生疾病的临床症状，但导致白细胞减少症和淋巴细胞增殖活性抑制。上述研究表明CDV上皮细胞的感染是产生临床症状必需的，但不适用于免疫。因此，建立开展SLAM受体研究的相关技术平台，从SLAM受体的角度探寻CDV的感染机制和增殖特性，分析SLAM受体分布和表达量变化规律与病毒感染之间相关性，有助于深入研究SLAM受体影响CDV感染的分子机制，有助于解释CDV在宿主体内的组织嗜性和感染宿主的广泛性

[6]，为开展阻断CDV感染的药物和防控技术等领域的研究奠定重要理论基础。

2.2 稳定表达SLAM的细胞系 为了在体外研究CDV，传统上犬肾细胞(MDCK细胞)或非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)被用来进行病毒的分离和增殖，但这些细胞不表达CDV感染的主要受体犬信号淋巴细胞激活分子(SLAM)，CDV的分离培养通常不会有明显的细胞病变效应(CPE)，但稳定表达SLAM受体细胞系能提高分离CDV的敏感性和保持病毒毒力，这对开展CDV的体外研究和疫苗研制十分重要。Nielsen O等[7](2008)用表达SLAM的Vero细胞系、Vero细胞和原代海豹肾(primary seal kidey, PSK)细胞，分离海豹瘟热病毒(Phocine distemper virus, PDV)，表达SLAM的Vero细胞系无论接细胞毒还是病料毒，敏感性和接毒后的病毒含量均优于Vero细胞或PSK细胞。闫如勋(2011)[8]建立了稳定表达犬、狐狸、貉和水貂受体SLAM的Vero细胞系，病毒分离敏感性和分离CDV毒力评价结果表明，建立的Vero细胞系能显著提高分离CDV的效率，并且很好的保持了病毒毒力，为CDV强毒株的获得提供保障。

3 研究展望

CDV进入易感组织需要由细胞受体介导，膜表面受体与CDV H结合并引起穿膜活动，在病毒粘附与侵染过程中起重要作用。目前受体是研究热点，改善不同细胞组织对某一病毒的敏感性起到立竿见影的作用。通过开展细胞受体的相关研究，探索阻断CDV感染的机制，对于该病的预防与控制具有重要意义。

[1] Appel M J, Shek WR, Summers BA. Lymphocyte-mediated immune cytotoxicity in dogs infected with virulent canine distemper virus[J]. Infect Immun 1982, 37:592-600.

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[3]Wenzlow N, Plattet P, Wittek R, Zurbriggen A, Gröne A.. Immunohistochemical demonstration of the putative canine distemper virus receptor CD150 in dogs with and without distemper[J]. Vet Pathol, 2007, 44: 943-948.

[4] Pillet S, Svitek N, von Messling V. Ferrets as a model for morbillivirus pathogenesis, complications, and vaccines[J]. Curr Top Microbiol Immunol, 2009, 330: 73-87.

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[7] Nielsen O, Smith G, Weingartl H, Lair S, Measures L. Use of a SLAM transfected Vero cell line to isolate and characterize marine mammal morbilliviruses using an experimental ferret model[J]. Journal of wildlife Diseases, 2008, 44(3): 600-611.

[8] 闫如勋. 稳定表达不同动物犬瘟热病毒受体SLAM的Vero细胞系的建立[D]. 镇江: 江苏科技大学, 2011.

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