血清可溶性CD40配体、β淀粉样蛋白1-42水平对卒中后认知功能障碍的诊断效能

顾杨，王宏，李军明，刘军

( 石河子大学医学院第一附属医院，新疆石河子832000)

血清可溶性CD40配体、β淀粉样蛋白1-42水平对卒中后认知功能障碍的诊断效能

顾杨，王宏，李军明，刘军

( 石河子大学医学院第一附属医院，新疆石河子832000)

目的探讨血清可溶性CD40配体(sCD40L)、β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)水平对卒中后认知障碍(PSCI)的诊断效能。方法急性脑梗死患者118 例(脑梗死组)，发病后3个月时进行蒙特利尔量表(MoCA)评分并据此将其分为脑梗死认知障碍组64 例、脑梗死认知正常组54 例，同期将51例身体健康者纳入对照组。酶联免疫吸附法检测各组血清sCD40L 、Aβ1-42，并进行比较，分析血清sCD40L 、Aβ1-42 水平与脑梗死认知障碍的关系，通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析sCD40L 、Aβ1-42 水平对脑梗死认知障碍的诊断效能。结果①脑梗死认知障碍组、脑梗死认知正常组、对照组血清sCD40L水平分别为(3.820±1.236)、(3.261±1.131)、(2.663±1.303)ng/mL，三组间任意两组相比，P均lt;0.01；脑梗死认知障碍组、脑梗死认知正常组、对照组血清Aβ1-42水平分别为(94.404±37.332)、(127.936±34.877)、(158.023±35.994)pg/mL，三组间任意两组相比，P均lt;0.01。② 脑梗死组血清sCD40L 水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.640，Plt;0.01)，血清Aβ1-42水平与MoCA评分呈正相关(r=0.758，Plt;0.01)，血清sCD40L水平与血清Aβ1-42水平呈负相关(r=-0.960，Plt;0.01)。③ 脑梗死组血清sCD40L水平ROC的曲线下面积为0.644，血清Aβ1-42水平ROC的曲线下面积为0.740，血清sCD40L联合Aβ1-42水平ROC的曲线下面积为0.918；根据约登指数，入组时sCD40L值为3.60 ng/mL ，其诊断脑梗死认知障碍的阳性预测值为71.154%、阴性预测值为59.091% 、正确诊断率为 57.812%；入组时Aβ1-42值为114.34 pg/mL ，其诊断脑梗死认知障碍的阳性预测值为77.966%、阴性预测值为69.491%、正确诊断率为 71.875%；sCD40L、Aβ1-42联合应用诊断脑梗死认知障碍的阳性预测值为89.855%、阴性预测值为95.918%、正确诊断率为96.875%。结论脑梗死认知障碍患者血清sCD40L水平升高、Aβ1-42 水平降低，两者与MoCA评分有关，检测血清sCD40L、Aβ1-42 有助于PSCI 的诊断。

可溶性CD40配体；β淀粉样蛋白1-42 ；卒中后认知障碍；脑卒中

认知障碍是卒中的常见并发症。目前对于卒中后认知障碍(PSCI)的临床诊断主要基于患者的症状、影像学检查及神经心理学评分，其诊断通常滞后而导致各种治疗的延误。血清可溶性CD40配体(sCD40L)、β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)被认为是脑部损伤及阿尔茨海默病( AD)等神经退行性疾病的潜在生物标志物[1，2]。本研究观察了脑梗死患者血清sCD40L、Aβ1-42水平变化，探讨二者的相关性及其对PSCI的诊断效能。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016 年11 月～2017 年6月石河子大学第一附属医院神经内科收治的急性脑梗死患者118 例(脑梗死组)，发病后3个月时进行蒙特利尔量表(MoCA)评分，依据MOCA 评分结果分为脑梗死认知障碍组和脑梗死认知正常组(MoCA 评分lt;26 分为认知功能障碍、≥26分为认知功能正常；如果受试者受教育年限≤ 12 a，在测试结果中加上1 分，以校正受教育程度的影响)。脑梗死组纳入标准：①脑梗死诊断符合全国第四届脑血管病学术会议制定的诊断标准，并有CT /MRI检查证实的新发脑梗死灶。②脑梗死发生3周以内(脑卒中急性期)；③患者年龄40～80岁；④患者知情同意并签订知情同意书。排除标准：①抑郁症患者；②严重失语、失明和耳聋等影响量表评定的患者；③有其他中枢神经系统器质性疾患(如脑炎、颅脑肿瘤、正压性脑积水、脑出血、近期脑外伤、癫痫等)者；④血甲状腺素水平异常者；⑤改良Rankin量表评分≥3分者；⑥严重精神疾病(如精神分裂症、躁狂症等)伴认知功能损害者；⑦有脑发育障碍、精神发育迟滞、药物滥用及中枢神经系统感染性疾病史等患者；⑧存在下列情况之一者：有严重的心、肝、肺、肾等脏器功能不全，急、慢性感染(包括2 周内有明确感染史，慢性肝炎急性期或活动期)，自身免疫性疾病，有应用免疫抑制剂史。同期收集51例身体健康者纳入对照组。对照组纳入标准：①年龄40～80岁；②认知功能正常(MoCA评分≥26分)；③既往无脑卒中及其他神经精神疾病。

1.2 血清sCD40L 、Aβ1-42检测 脑梗死组患者取入组次日清晨空腹静脉血5 mL，立即加入EDTA 抗凝管中，3 000r/min 离心15 min 后分离血清，-80 ℃冰箱保存待测。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组血清sCD40L、 Aβ1-42，试剂盒由Elabscience有限公司提供，具体操作按照说明书要求进行。

2结果

2.1 脑梗死组及对照组MoCA评分比较 根据MoCA评分将脑梗死组分为脑梗死认知障碍组64 例、脑梗死认知正常组54 例。 脑梗死认知障碍组、脑梗死认知正常组、对照组的MoCA评分分别为18.5 (16.0，21.0)分、26.0(26.0，27.0)分、27.0(27.0，28.0)分，三组间任意两组相比，P均lt;0.01。

2.2 脑梗死组及对照组血清sCD40L、Aβ1-42 水平比较 脑梗死认知障碍组、脑梗死认知正常组、对照组血清sCD40L水平分别为(3.820±1.236)、(3.261±1.131)、(2.663±1.303)ng/mL，三组间任意两组相比,P均lt;0.01；脑梗死认知障碍组、脑梗死认知正常组、对照组血清Aβ1-42水平分别为(94.404±37.332)、(127.936±34.877)、(158.023±35.994)pg/mL，三组间任意两组相比，P均lt;0.01。

2.3 脑梗死组血清sCD40L、Aβ1-42 水平与MoCA 评分的相关性 脑梗死组血清sCD40L 水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.640，Plt;0.01)，血清Aβ1-42水平与MoCA评分呈正相关(r=0.758，Plt;0.01)，血清sCD40L 水平与血清Aβ1-42水平呈负相关(r=-0.960，Plt;0.01)。

2.4 血清sCD40L、Aβ1-42水平对脑梗死认知障碍的诊断价值 以MoCA量表评分结果作为诊断脑梗死认知障碍的金标准，绘制Aβ1-42、sCD40L、Aβ1-42联合sCD40L的ROC。血清sCD40L水平ROC的曲线下面积为0.644，血清Aβ1-42水平ROC的曲线下面积为0.740，血清sCD40L联合Aβ1-42水平ROC的曲线下面积为0.918。 根据约登指数，入组时sCD40L值为3.60 ng/mL ，其诊断脑梗死认知障碍的阳性预测值为71.154%、阴性预测值为59.091%、正确诊断率为 57.812%；根据约登指数，入组时Aβ1-42 值为114.34 pg/mL ，其诊断脑梗死认知障碍的阳性预测值为77.966%、阴性预测值为69.491%、正确诊断率为 71.875%；sCD40L、Aβ1-42联合应用诊断脑梗死认知障碍的阳性预测值为89.855%、阴性预测值为95.918%、正确诊断率为 96.875%。

3 讨论

PSCI的发生很普遍，且与痴呆的发病有关[3]。PSCI不仅严重影响患者的日常生活能力[4],也对患者躯体功能的恢复产生一定的影响[5]。PSCI发生风险最高时段在卒中后3～6个月，而且认知障碍可能持续存在[6]。在脑卒中早期发现认知障碍可以为患者的早期认知康复及后续治疗提供帮助。检测认知障碍的常用手段包括祌经心理学测试量表、相关影像学检查、体液生物标记物检查等。量表的测定需要患者无言语及听力和理解力障碍，而体液获取相对方便，且检测较为简单，所以寻找PSCI的生物学指标有着重要的现实意义。

当前流行的淀粉样蛋白引发的炎症级联反应假说认为Aβ1-42在脑内异常沉积是导致AD的关键因素。研究[7]发现，AD的特征性病理表现为淀粉样蛋白Aβ沉积和神经纤维缠结。在脑卒中动物模型和血管性痴呆患者脑组织中都发现有Aβ1-42的沉积[8]。血脑屏障上晚期糖基化终产物受体、低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)之间的平衡表达与脑内Aβ的异常沉积密切相关，RAGE主要转运Aβ与晚期糖基化终产物由血入脑，LRP-1则相反，两者表达的动态平衡对血、脑之间Aβ的转运起到重要作用，血浆中Aβ水平也能在一定程度上帮助鉴别PSCI[9]。

肿瘤坏死因子受体超家族成员CD40及其同源配体CD40L与Aβ的产生及清除关系密切。在正常人体中，Aβ的产生和清除保持一种动态平衡。生理情况下低浓度可溶的Aβ不表现出神经毒性，当达到临界浓度，Aβ构象就会发生变化,产生神经毒性，进一步损伤神经元。研究[10]发现，CD40L可以增强Aβ1-42寡聚体诱导的炎症反应,引起炎性因子、补体因子、活性氧等毒性物质的释放[11，12]，上述毒性物质会进一步激活并损伤胶质细胞、T 细胞等免疫细胞功能，降低其清除Aβ蛋白的能力，同时CD40-CD40L通过核转录因子途径使Aβ蛋白产生增多[13]，过多的Aβ蛋白在脑内沉积，持续对神经元、突触等产生损伤，从而形成炎症反应级联放大效应，最终导致神经细胞变性坏死及突触功能损害[12，14，15]。体外实验[13，16]发现，给予CD40L干预时，Aβ蛋白生成增多，而给予抗CD40L抗体阻断CD40-CD40L通路时，Aβ蛋白生成减少。

本研究发现，脑梗死认知障碍患者血清sCD40L水平升高、Aβ1-42水平降低，两者与MoCA评分有关。以MoCA量表评分结果作为诊断脑梗死后认知功能障碍的金标准，绘制Aβ1-42 、sCD40L和Aβ1-42联合sCD40L诊断脑梗死后认知功能障碍的ROC，结果显示血清sCD40L水平的ROC曲线下面积为0.644，血清Aβ1-42水平ROC的曲线下面积为0.740，血清sCD40L联合Aβ1-42水平ROC的曲线下面积为0.918；根据约登指数，脑梗死患者入组时sCD40L值为3.60 ng/mL，对脑梗死后认知障碍阳性预测值为71.154%、阴性预测值为59.091% 、正确诊断率为 57.812%；入组时Aβ1-42 值为114.34 pg/mL诊断脑梗死后认知障碍的阳性预测值为77.966%、阴性预测值为69.491%、正确诊断率为71.875%；sCD40L与Aβ1-42联合应用诊断脑梗死后认知障碍的阳性预测值为89.855%、阴性预测值为95.918%、正确诊断率为 96.875%。

综上所述，笔者认为检测血清sCD40L、Aβ1-42 有助于PSCI 的诊断。后续研究将扩大样本量，追踪随访现有患者，进一步确定血清sCD40L、Aβ1-42 检测对PSCI的诊断价值。

[1] 李玲,钟笑梅,施海姗,等.阿尔茨海默病与轻度认知障碍患者血浆sCD40及sCD40L浓度研究[J]. 中国神经精神疾病杂志,2016,42(08):460-464.

[2] 李萌,王宏,王茂松. 血清Aβ1-42浓度与缺血性卒中后认知障碍的相关性研究[J]. 中国现代医药杂志,2016,18(1):9-12.

[3] Arba F, Quinn T, Hankey GJ, et al. Determinants of post‐stroke cognitive impairment: analysis from VISTA[J]. Acta Neurol Scand, 2017,135(6):603-607.

[4] Sturm JW, Donnan GA, Dewey H M, et al. Quality of life after stroke[J]. Stroke, 2004,35(10):2340-2345.

[5] Stephens S, Kenny RA, Rowan E, et al. Association between mild vascular cognitive impairment and impaired activities of daily living in older stroke survivors without dementia[J]. J Am Geriatr Soc, 2005,53(1):103-107.

[6] Merino JG. Dementia after stroke: high incidence and intriguing associations[J]. Stroke, 2002,33(9):2261.

[7] Kalaria RN. Comparison between Alzheimer's disease and vascular dementia: implications for treatment[J]. Neurol Res, 2003,25(6): 661-664.

[8] Armstrong RA. The interface between Alzheimer's disease, normal aging, and related disorders[J]. Curr Aging Sci , 2008, 1(2): 122-132.

[9] Moulin S, Leys D, Schraen-Maschke S, et al. Aamp;β1-40 and Aamp;β1-42 Plasmatic Levels In Stroke: Influence of Pre-Existing Cognitive Status and Stroke Characteristics[J]. Curr Alzheimer′s Res，2017,14(6):686-694.

[10] Tan J, Town T, Paris D, et al. Microglial activation resulting from CD40-CD40L interaction after β-amyloid stimulation[J]. Science, 1999,286(5448):2352-2355.

[11] Hickman SE, Allison EK, El Khoury J. Microglial dysfunction and defective β-amyloid clearance pathways in aging Alzheimer's disease mice[J]. J Neurosci, 2008,28(33):8354-8360.

[12] Cameron B, Landreth GE. Inflammation, microglia, and Alzheimer's disease[J]. Neurobiol Dis, 2010, 37(3): 503-509.

[13] Ait-Ghezala G, Volmar CH, Frieling J, et al. CD40 promotion of amyloid beta production occurs via the NF-κB pathway[J]. Eur J Neurosci, 2007,25(6):1685-1695.

[14] Griffin WS , Sheng JG, Royston MC, et al. Glial‐neuronal interactions in Alzheimer's disease: the potential role of a 'cytokine cycle'in disease progression[J]. Brain Pathol, 1998,8(1):65-72.

[15] Lue LF, Kuo YM, Beach T, et al. Microglia activation and anti-inflammatory regulation in Alzheimer's disease[J]. Mol Neurobiol, 2010, 41(2-3):115-128.

[16] Obregon D, Hou H, Bai Y, et al. CD40L disruption enhances Aβ vaccine-mediated reduction of cerebral amyloidosis while minimizing cerebral amyloid angiopathy and inflammation[J]. Neurobiol Dis, 2008,29(2):336-353.

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.43.015

R743.3

B

1002-266X(2017)43-0049-03

王宏(E-mail: wang832000@ sina．com)

2017-09-15)