围手术期营养支持对结直肠癌患者肿瘤细胞cyclin D1表达及复发转移的影响

孙广荣 邹 萍 董瑞强 张丹凤 韩 甜 张伊辉



围手术期营养支持对结直肠癌患者肿瘤细胞cyclin D1表达及复发转移的影响

孙广荣 邹 萍 董瑞强 张丹凤 韩 甜 张伊辉

目的 探讨结直肠癌患者围术期营养支持后对肿瘤细胞cyclinD1表达及复发转移的影响效果。方法 选择148例结直肠癌患者，按照患者是否进行围术期营养支持的意愿，将患者分为营养支持观察组和非营养支持对照组，观察组78例，对照组70例。围术期营养支持为我院配制的营养液，与术前一周及术后5～14 d对观察组患者进行全胃肠外营养，对照组患者进行常规的护理。采用SP免疫组织化学法检测cyclin D1的表达，用TUNEL方法检测细胞的凋亡，细胞核抗原免疫组织化学染色检测细胞增殖，对两组患者进行对比分析。结果 经围术期营养支持的患者肿瘤细胞cyclinD1的阳性表达率为(35.12±5.09)%，凋亡指数为(52.67±5.43)%，细胞增殖指数为(7.35±2.87)%；对照组的阳性表达率为(37.50±6.12)%，凋亡指数为(56.17±6.38)%，细胞增殖指数为(8.42±3.67)%；两组比较无统计学差异(P>0.05)。两组患者术后肿瘤的复发率分别为15.38%(12/78)、15.71%(11/70)，两组比较无显著性差异(P>0.05)。结论 围术期是否对患者进行营养支持对结直肠癌患者肿瘤细胞cyclinD1的表达无显著的影响，同时不会促进肿瘤的复发和转移。

围术期营养支持；结直肠癌；肿瘤细胞cyclinD1；抗原免疫组织化学染色

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1328～1330)

据研究显示，外科的临床患者多有蛋白质-热量缺乏性营养不良现象，调查显示，在入院时约有40%的住院患者已存在着营养不良[1]。胃肠道肿瘤患者在围手术期给予营养支持能够降低或者减少患者手术期的生理和心理创伤应激反应。营养支持已经成为胃肠道肿瘤患者的1个重要的治疗措施。肿瘤的发生、发展与细胞周期调控失常密切相关[2]。营养支持在改善患者机体营养状况的同时，是否也对肿瘤细胞的增殖和凋亡产生影响。cyclin D1是细胞周期重要的调节因子之一，在营养支持前后对其表达水平进行测定，从分子生物学角度寻找营养支持在治疗胃肠道肿瘤中的依据[3-4]。因此我院通过对2014年5月至2017年1月收治的148例结直肠癌患者行围术期营养支持以观察对肿瘤细胞cyclin D1表达及复发转移的的影响情况，取得了一定的研究结果，现将研究报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院自2014年5月至2017年1月收治的经病理科手术切除有明确病理诊断及完整临床资料的结直肠癌患者148例，其中男性77例，女性71例，年龄23～78岁，所有患者手术前均未经化疗或放疗，其中TNMⅠ期34例，TNMⅡ期39例，TNM Ⅲ期45例，TNM Ⅳ期30例。直肠癌患者81例，结肠癌患者67例，所有患者均无活动性出血、感染，无明显的肝肾功能损害。按照患者的意愿，将患者分为营养支持组(观察组)78例和非营养支持(对照组)70例。观察组患者中，男性39例，女性39例，年龄23～78岁，平均年龄(47.2±13.5)岁，Ⅰ期17例，Ⅱ期20例，Ⅲ期24例，Ⅳ期17例。直肠癌患者43例，结肠癌患者35例，对照组患者中男性38例，女性32例，年龄24～77岁，平均年龄(46.9±12.3)岁，Ⅰ期17例，Ⅱ期19例，Ⅲ期21例，Ⅳ期13例。直肠癌患者38例，结肠癌患者32例。两组患者在年龄、性别、病例等方面比较无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 围术期营养支持的方法 参考观察组78例患者的体质量为其提供低热量、低脂肪、低糖的能量，热量范围约为84～105 kJ/kg。供给糖脂比例为1∶1或2∶1，热氮比为 418～627 kJ∶1 g的葡萄糖和脂肪乳剂，并加入氨基酸、各种微量素及维生素等补给非蛋白质热量。采用经外周静脉或中心静脉的方式输注。术前一般给予营养支持3～10 d，术后一般给予5～14 d，并逐步过渡到肠内营养。对照组术前及术后不给予营养支持，仅仅维持正常的常规步骤。

1.2.2 检测方法 采用SP免疫组织化学法检测cyclinD1的表达，用已知阳性的乳腺癌切片作为阳性对照；采用TUNEL方法检测细胞凋亡，细胞核抗原免疫组织化学染色检测细胞增殖，对两组患者进行对比分析。SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购于北京生物科技有限公司。

1.3 结果判定标准

应用高清晰度彩色医学图文分析系统。细胞核染色呈棕黄色或者棕褐色颗粒为阳性表达。阳性细胞密集度最高的区域计数5个高倍镜视野(>1000个细胞)，分别计数阳性细胞数及总细胞数，计算百分率(以≥5.0%为阳性组)。

1.4 统计学方法

2 结果

观察组及对照组患者cyclinD1阳性表达率分别为(35.12±5.09)%和(37.50±6.12)%；凋亡指数分别为(52.67±5.43)%和(56.17±6.38)%；细胞增殖指数分别为(7.35±2.87)%和(8.42±3.67)%；两组比较无统计学差异(P>0.05)。两组患者术后肿瘤复发率分别为15.38%(12/78)和15.71%(11/70)，两组比较无显著性差异(P>0.05)。

3 讨论

早在1896年Ashworth研究发现，肿瘤疾病的患者的血液中存在循环肿瘤细胞。近几年来，随着肿瘤研究的不断深入发现[5-6]，许多肿瘤患者在临床治疗后虽然检测不到残余的肿瘤病灶，但最终依旧会因为肿瘤的复发和转移而死亡。肿瘤的发生、发展不仅与细胞的异常凋亡有关，也与细胞的异常增殖和分化有关。细胞周期蛋白调节了细胞的分裂，CDKs(CDK1-7)是在细胞周期调节中重要的蛋白激酶。此外与细胞周期调控有关的还有CKIs，其中Kip/Cip家族可以结合并抑制大多数cyclin-CDK的复合物。这些因子引起细胞周期的失控，导致原有正常的细胞平衡被打破，是肿瘤发生、浸润和转移的生物学基础[7-8]。

营养不良对患者预后有着重要的影响，营养支持不仅能够改善因营养不了引起的机体组织、器官损伤，还能够降低手术的风险、术后并发症及死亡率[9-10]。伴有围术期营养不良的结直肠癌患者术后最容易发生并发症，cyclin D1与CDK相互结合，导致视网膜母细胞瘤易感因子(Rb)出现磷酸化，引起细胞异常增殖和凋亡而发生癌变[11-12]。因此，营养支持是治疗结直肠癌患者的重要措施[13-14]。本文对营养支持在改善患者机体营养状况的同时，是否也对肿瘤细胞的增殖和凋亡产生影响进行研究发现，观察组与对照组的cyclin D1的阳性表达率分别为(35.12±5.09)%，(37.50±6.12)%；凋亡指数为(52.67±5.43)%，(56.17±6.38)%；细胞增殖指数为(7.35±2.87)%，(8.42±3.67)%；两组比较无统计学差异(P>0.05)。两组患者术后肿瘤的复发率分别为15.38%(12/78)、15.71%(11/70)，两组比较无显著性差异(P>0.05)。围术期是否对患者进行营养支持对结直肠癌患者肿瘤细胞cyclin D1的表达无显著的影响，同时不会促进肿瘤的复发和转移[15]。

综合上述分析可知，对结直肠癌患者围术期给予低热量、电解质及氨基酸等营养液的支持，不影响患者肿瘤细胞cyclin D1的阳性表达率，同时对复发及转移也没有影响。因此，在对结直肠癌患者可以针对可能出现的并发症，调整合理的护理措施，可以降低术后并发症的发生，提高患者的治疗效果和生活质量，更减轻了患者在治疗过程中的经济负担。

[1] 彭联明,蔡晶晶,何亚光,等.不同营养支持途径对结直肠癌患者术后营养指标的影响〔J〕.重庆医学，2016，23(4)：525-527.

[2] 巩方明,严永峰,王白石,等.肠内外营养支持对老年结直肠癌患者腹腔镜术后疗效的影响〔J〕.中国肿瘤临床与康复，2015，22(10)：1231-1234.

[3] Jirawatnotai S,Sharma S,Michowski W,et al.The cyclin D1-CDK4 oncogenic interactome enables identification of potential novel oncogenes and clinical prognosis〔J〕.Cell cycle,2014,13(18):2889-2900.

[4] Eo HJ,Park GH,Song HM,et al.Silymarin induces cyclin D1 proteasomal degradation via its phosphorylation of threonine-286 in human colorectal cancer cells〔J〕.Int Immunopharmacol,2015,24(1):1-6.

[5] Qin A,Yu Q,Gao Y,et al.Inhibition of STAT3/cyclinD1 pathway promotes chemotherapeutic sensitivity of colorectal caner〔J〕.Biochem Biophys Res Commun,2015,457(4):681-687.

[6] Chen Y,Jiang T,Shi L,et al.hcrcn81 promotes cell proliferation through Wnt signaling pathway in colorectal cancer〔J〕.Med oncol,2016,33(1):3.

[7] 张明明,檀碧波,卢亚敏,等.结直肠癌组织中Vav1、Rac1、CyclinD1、p21表达的意义〔J〕.肿瘤学杂志,2016,22(9):708-712.

[8] 罗其发,杨 桦,肖卫东,等.结直肠癌相关周期蛋白质研究进展〔J〕.现代生物医学进展,2015,15(29):5779-5781.

[9] 陈建新,李瑞平,李力波，等.早期肠内营养支持对结直肠癌根治术患者免疫功能的影响〔J〕.结直肠肛门外科，2015，24(4)：244-246.

[10] 陈治明,周 克,吴 平,等.早期肠内肠外营养支持对结直肠癌患者术后影响〔J〕.局解手术学杂志，2015，25(1)：85-87.

[11] Ok CY,Xu-Monette ZY,Tzankov A,et al.Prevalence and clinical implications of cyclin D1 expression in diffuse large B-cell lymphoma(DLBCL) treated with immunochemotherapy:a report from the International DLBCL Rituximab-CHOP Consortium Program〔J〕.Cancer，2014,120(12):1818-1829.

[12] Qi F,Yuan Y,Zhi X,et al.Synergistic effects of AKAP95,Cyclin D1,Cyclin E1,and Cx43 in the development of rectal cancer〔J〕.Int J Clin Exp Pathol，2015,8(2):1666-1673.

[13] 侯丽莉.围手术期肠内营养治疗对结直肠癌患者的影响研究〔J〕.医药前沿,2016,6(35):115-116.

[14] 顾 磊.NKD1、β-catenin和Cyclin D1在结直肠癌中的表达及意义〔J〕.中国医药导报,2016,13(35):115-118.

[15] 蒋雯娟,杜赵康,李正金,等.双肾上腺皮质激素样激酶-1与细胞周期蛋白D1在结直肠癌组织中的表达及临床意义〔J〕.解剖学杂志,2016,39(2):166-168,182.

(编辑：吴小红)

Effects of Perioperative Total Parenteral Nutrition Support on Cyclin D1 Expression,Recurrence and Metastasis of Colorectal Cancer

SUN Guangrong,ZOU Ping,DONG Ruiqiang,et al.

uoyang Central Hospital Affiliated to Zhengzhou University,Luoyang,471000

Objective To evaluate the effects of perioperative total parenteral nutrition on cyclinD1,recurrence and metastasis of colorectal cancer.Methods A total of 148 cases of colorectal cancer patients,according to whether receive perioperative nutritional support,were divided into the observation group(nutritional support )and the control group(non-nutritional support),the observation group had 78 patients and the control group had 70 cases.Perioperative nugritional support for the preparation of nutrient solution for the hospital,week preoperative and postoperative 5 to 14d on the observation group with total patenteral nutrition,routine care for control group.By SP immunohistochemical method to detect the expression of cyclinD1,and apoptosis using the TUNEL method,cell nuclear antigen immunohistochemical staining was used to detect cell proliferation,the 2 groups of patients were analyzed.Results After perioperative nutrition support,the expression rates of cyclinD1,PT and AI in the 2 groups were(35.12±5.09)%,(37.50±6.12)%;(52.67±5.43)%,(56.17±6.38)%;(7.35±2.87)%,(8.42±3.67)%;there were no significant difference in PI,AI and expression of cyclinD1(P>0.05).The recurrence rates in the 2 groups were 15.38%(12/78)and 15.71%(11/70).Conclusion Perioperative TPN can not promote proliferation and apoptosis of carcinoma cells,and has no significant impact on the expression of cyclin D1,recurrence or metastasis of colorectal cancer.

Perioperative nutritional support;Colorectal cancer;Tumor cells of cyclinD1;Antigen immunohistochemical staining

471000 郑州大学附属洛阳中心医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.08.032

R735

A

1001-5930(2017)08-1328-03

2017-04-05

2017-05-25)