紫外—可见分光光度法测定水产品中二氧化硫残留量

赵飞++高广慧

摘 要：建立了紫外-可见分光光度法检测水产品中二氧化硫残留量的分析方法。方法采用紫外-可见分光光度计进行检测，检测波长为550 nm，以甲醛溶液作为吸收液，盐酸副玫瑰苯胺溶液作为显色剂，环境温度控制在23 ℃时，显色时间为20 min。亚硫酸盐在0.4-2.0 μg范围内有良好的线性关系，相关系数大于0.999，回收率在80.3-87.2%，精密度均小于3.0%。采用新建立的方法对水产品中的亚硫酸盐含量进行检测，该方法重现性好、准确度高、毒性小，适用于水产品中二氧化硫残留量的检测。

关键词：紫外-可见分光光度法；二氧化硫；水产品

中图分类号：O657.3 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2017）02-0227-02

Abstract：An ultraviolet-visible spectrophotometry method for the determination of sulfur dioxide in aquatic products was developed. Methods Ultraviolet-visible spectrophotometry， the detection wavelength was 550 nm， formaldehyde solution as absorption liquid， pararosaniline hydrochloric acid solution as chromogenic agent. The temperature was held constantly at 23 ℃， and the Chromogenic time was contoled at 20 min. sulfur dioxide has good linear relationship in the range of 0.4-2 μg with the correlation coefficient larger than 0.999. The recovery is between 80.3-87.2%， and the precision is below 3.0%. The method was used in the detecting of aquatic products， and the established method has been successfully applied to the determination of sulfur dioxide in aquatic products.

Key words：Ultraviolet-visible spectrophotometry； Sulfur dioxide； Aquatic products

亞硫酸盐是一种较早就被广泛使用的食品添加剂，可作为抗氧化剂、漂白剂和防腐剂，可抑制食物褐变，防止鲜虾生成黑斑等，在酸性介质中，也可作为抗菌剂使用[1]。GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定了各类食品中亚硫酸盐的最大使用量（以二氧化硫残留量计），若摄入过量的亚硫酸盐，会造成胃肠障碍，引起头疼，肾脏障碍等症状。

亚硫酸盐的检测方法通常采用显色法、蒸馏法、离子色谱法[2，3]等，各种方法适用的食品类别不同。蒸馏法适用于色酒、葡萄糖糖浆、果脯；显色法适用范围更为广泛，但该法中使用四氯汞钠溶液作为吸收液，常温下具有微小的挥发性，且配制时使用的氯化高汞为剧毒品，本研究中采用甲醛溶液作为吸收液，避免使用剧毒品，且具有较好的准确度和精密度，适用于水产品中亚硫酸盐的检测。

1 实验部分

1.1 仪器、材料与溶液配制

仪器：紫外-可见分光光度计（日本岛津公司）；涡旋混合器（德国IKA）；分析天平（德国赛多利斯）。

材料：二氧化硫标准溶液（质量浓度为100mg/L，上海沪宇生物科技有限公司），氢氧化钠（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），氨基磺酸铵（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），邻苯二甲酸氢钾（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），甲醛（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），0.2%盐酸副玫瑰苯胺溶液（上海沪宇生物科技有限公司），乙二胺四乙酸二钠盐（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），亚铁氰化钾（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），乙酸锌（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

溶液配制：甲醛吸收储备液：称取2.04g邻苯二甲酸氢钾，少量水溶解，加入20mL0.05mol/L乙二胺四乙酸二钠盐溶液、5.5mL甲醛，用水定容至100mL，摇匀；甲醛吸收使用液：用水将甲醛吸收储备液稀释100倍即得，临用现配；0.05mol/L乙二胺四乙酸二钠盐溶液：称取1.8612g乙二胺四乙酸二钠盐，用新沸后冷却水溶解并定容至100mL，摇匀；氨基磺酸铵溶液：称取0.30g氨基磺酸铵，少量水溶解，加入3mL1mol/L氢氧化钠溶液，用水定容至100mL，摇匀；1mol/L氢氧化钠溶液：称取4.00g氢氧化钠，少量水溶解，并用水定容至100mL，摇匀；盐酸副玫瑰苯胺使用液：移取13mL0.2%盐酸副玫瑰苯胺，加入30mL浓磷酸、12mL浓盐酸，用水定容至100mL，摇匀；亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并定容至100mL，摇匀；乙酸锌溶液：称取22g乙酸锌，用水溶解，加入3mL冰醋酸，并用水定容至100mL，摇匀；2μg/mL二氧化硫标准使用液：精密吸取二氧化硫标准溶液0.2mL，用甲醛吸收使用液稀释定容至20mL，摇匀待用。

1.2 标准系列的配制

分别精密移取2μg/mL二氧化硫标准使用液0、0.2、0.4、 0.6、0.8、1.0mL于试管中，以甲醛吸收液定容至10mL，摇匀，加入0.5mL氨基磺酸铵溶液，摇匀，加入1.0mL1mol/L氢氧化钠溶液，摇匀待用；取另一套试管，分别加入0.5mL盐酸副玫瑰苯胺使用液，将第一套管中溶液快速倒入第二套管中，立即盖塞并摇匀，23℃条件下20min测定。

1.3 样品前处理

（1）提取准确称取混合均匀的水产品样品5-10g（精确至0.01g），置于100mL容量瓶中，加入相当于20mL的甲醛吸收液，浸泡4h以上，加入亚铁氰化钾和乙酸锌溶液各3mL，摇匀，用水稀释定容至刻度，摇匀并用定量滤纸过滤待用。

（2）显色：精密移取上述滤液0.5-5mL于试管中，其余操作同标准系列配制中“以甲醛吸收液定容至10mL”至“23℃条件下20min测定”。

1.4 紫外-可见分光光度计条件

检测波长550nm。

2 结果与讨论

2.1 吸收液的选择

本文中采用甲醛吸收液代替国家标准GB/T5009.34《食品中亚硫酸盐的测定》方法中采用四氯汞钠吸收液提取样品中的二氧化硫，其目的在于避免使用剧毒试药氯化高汞，以及避免各单位采购、领取、使用和废液处理中带来的诸多不便；采用甲醛吸收液进行亚硫酸盐检测的原理是样品在酸性条件下释放出二氧化硫，被甲醛吸收液中甲醛结合形成羟甲基磺酸加成物，并与显色剂盐酸副玫瑰苯胺形成紫红色络合物，通过紫外分光光度计进行检测。

2.2 显色条件的优化与控制

盐酸副玫瑰苯胺显色法检测亚硫酸盐含量中，显色反应受温度影响较大，温度较低时，显色反应较慢，相同显色时间较温度稍高时的灵敏度低；温度过高时，显色反应快，有效测定待测液吸光度值的时间较短，重复性较差，因此在均衡考虑显色速度与显色时间两者，通过实验测试表明，在23℃下，显色20min较优，且标准系列溶液同样品溶液应在相同条件下显色，并控制显色时间一致才能保证检测的准确度和精密度。

2.3 方法的线性

在相同的检测条件下，依次测试标准系列溶液，得到相应的响应值，以响应值为纵坐标、含量为横坐标作图，得到标准曲线的线性为y=0.0342x-0.0006，相关系数为0.9993，线性关系较好。如图1所示。

2.4 方法的精密度和准确度试验

称取空白样品六份，分别加入一定浓度的标准溶液，按样品前处理方法进行处理并检测，分别计算回收率和精密度，得出回收率在80.3%-87.2%之间，RSD小于3.0%，测定结果见表1。

3 结语

本文采用紫外可见分光光度计检测水产品中亚硫酸盐的含量，采用甲醛吸收液代替四氯汞钠作为吸收液，避免使用剧毒試药，同时也避免了剧毒试药采购、使用等方面的一系列问题；同时方法中需要注重的细节也一一进行详细的阐述；且本文建立的方法具有较好的回收率、精密度，线性关系良好，适用于水产品中亚硫酸盐的检测。

参考文献：

[1]李雪莲，杨丽等.食品中亚硫酸盐研究进展[J].亚太传统医药，2015，11：34-37.

[2]黄慧玲，王玉健等.食品中亚硫酸盐的离子色谱法测定[J].分析试验室，2009，08：15-18.

[3]宋莲芳.食品中亚硫酸盐的离子色谱法测定分析[J].生物技术世界，2016，2：57.