化脓性脑膜炎患儿血清、脑脊液中蛋白C水平的变化及意义*

王 燕，刘利蕊，李 斌，王文涛，孙 鹏，孙素真

（1.承德医学院附属医院小儿内科，河北承德 067000；2.河北省儿童医院神经内科）

化脓性脑膜炎患儿血清、脑脊液中蛋白C水平的变化及意义*

王 燕1，刘利蕊1，李 斌1，王文涛1，孙 鹏1，孙素真2

（1.承德医学院附属医院小儿内科，河北承德 067000；2.河北省儿童医院神经内科）

目的:探讨化脓性脑膜炎患儿血清和脑脊液中蛋白C（PC）水平的变化和意义。方法：62例化脓性脑膜炎患儿作为实验组，以同期健康体检儿童60例作为对照组，采用ELISA法分检测两组（实验组患儿分别于急性期和恢复期采集标本）受试儿童血清和脑脊液的PC水平。结果：实验组患儿急性期血清和脑脊液PC水平均明显低于对照组和本组恢复期（P＜0.05）；实验组患儿恢复期血清和脑脊液PC水平与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。在急性期，重症化脓性脑膜炎患儿血清、脑脊液PC水平均明显低于轻症患儿（P＜0.05）。结论：检测血清和脑脊液PC水平可为化脓性脑膜炎的诊断、病情判断和疾病转归提供客观依据。

化脓性脑膜炎；蛋白C；血清；脑脊液

化脓性脑膜炎（PM）是儿科临床常见的中枢神经系统感染性疾病，病变累及软脑膜、蛛网膜、表层脑组织，进展迅速，病死率和后遗症发生率极高，严重威胁患儿的生命健康。随着现代医疗技术的进步，化脓性脑膜炎的预后得到极大改善，但在我国病死率仍达10%左右，有约1/3的患儿可遗留各种神经系统后遗症[1]。因此，早诊断、早治疗对于化脓性脑膜炎的预后具有重要意义。蛋白C（PC）是肝脏分泌的一种重要的抗凝血糖蛋白，在抗凝血、抗炎、抗细胞凋亡、抑制炎性因子释放、保护神经元、修复血管内皮等方面发挥重要作用[2-3]。本研究观察了化脓性脑膜炎患儿血清、脑脊液中PC的动态变化，探讨其在化脓性脑膜炎早期诊断、恢复方面的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 我院2011年5月-2015年12月收治的病程5天以内的化脓性脑膜炎患儿62例（均符合第八版《诸福棠实用儿科学》化脓性脑膜炎诊断标准[1]）作为实验组，其中男38例、女24例，年龄1月-10岁，平均1.43±1.14岁，轻症患儿38例、重症患儿24例（依据1995年小儿危重病例评分）。选取同期健康体检儿童60例作为对照组，男35例、女25例，年龄2月-11岁，平均1.65±1.46岁。两组患儿性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。两组患儿均由家属签署知情同意书，并经医院伦理委员会批准。

1.2 标本采集和检测方法 实验组患儿分别于患病急性期（入院24h内）、恢复期（临床治疗10d后）采集空腹静脉血、脑脊液标本各2ml，同期采集对照组儿童空腹静脉血、脑脊液各2ml，所有标本离心后收集上清液置于-70℃冰箱保存。采用ELISA法检测PC水平（采用武汉中美科技有限公司的ELISA试剂盒，所有操作均严格按照试剂盒说明书进行）。

1.3 统计分析 采用SPSS 19.0统计软件处理数据资料，组间计量资料的比较采用t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿血清和脑脊液PC水平检测结果 实验组患儿急性期血清和脑脊液PC水平均明显低于对照组和本组恢复期（P＜0.05）；实验组患儿恢复期血清和脑脊液PC水平与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1：

表1 血清和脑脊液PC水平检测结果（±s，mg/L）

表1 血清和脑脊液PC水平检测结果（±s，mg/L）

与对照组、本组恢复期比较：*P＜0.05（至恢复期，实验组死亡6例、放弃治疗4例）

组别 例数 血清 脑脊液实验组 急性期 62 3.03±0.22* 1.33±0.14*恢复期 52 4.16±0.14 3.59±0.20对照组 60 4.80±0.28 3.62±0.18

2.2 轻、重症化脓性脑膜炎患儿急性期血清、脑脊液PC水平比较 重症化脓性脑膜炎患儿血清、脑脊液PC水平均明显低于轻症患儿（P＜0.05）。见表2：

表2 轻、重症化脓性脑膜炎患儿急性期血清、脑脊液PC水平比较（±s，mg/L）

表2 轻、重症化脓性脑膜炎患儿急性期血清、脑脊液PC水平比较（±s，mg/L）

组别 例数 血清 脑脊液重症组 24 2.85±0.11 1.02±0.08轻症组 38 3.28±0.20 2.15±0.10 P＜0.05 ＜0.05

3 讨论

化脓性脑膜炎（PM）是在细菌毒素和多种炎症相关因子作用下导致的以脑膜病变为主的炎症反应，主要表现为广泛血管充血、大量中性粒细胞浸润、纤维蛋白渗出，严重病例可有血管壁坏死、灶性出血、闭塞性小血管炎等病变[1]。目前，诊断化脓性脑膜炎主要参照临床症状和脑脊液细胞学、生化检查，缺乏有效的生理生化检测指标，因此，进一步探寻量化检测指标对于早期诊断化脓性脑膜炎具有重要意义。

蛋白C（PC）是一种维生素K依赖性双链糖蛋白，由肝脏巨核细胞和内皮细胞合成，相对分子量为62KD，在血浆中含量为2-6mg/L。PC系统是体内重要的抗凝体系，经活化为活化蛋白C（APC）后发挥作用，在抗凝、促纤溶、抗炎、抑制细胞凋亡、保护血管内皮屏障等方面发挥重要作用[4-5]。化脓性脑膜炎时细菌侵入机体发生炎症反应，促进促炎因子的释放，炎症细胞因子如TNF-α等可刺激单核细胞释放趋化因子，促使中性粒细胞聚集，造成血管内皮细胞的损伤。PC可降低趋化因子对中性粒细胞的募集作用，减轻内皮细胞的损害，对胶质细胞、神经元、血管起到保护作用[6]；同时，PC还可直接抑制炎症因子的释放，减轻炎性物质和纤维蛋白渗出，减轻和避免脑膜炎后遗症的发生。近年来还有研究发现，PC可透过血脑屏障，对中枢神经系统疾病引起的神经细胞损害起到保护作用[7]。本研究探讨了化脓性脑膜炎患儿血清和脑脊液PC水平的变化，以期为临床早期诊断化脓性脑膜炎提供依据。

本研究发现，实验组患儿血清和脑脊液PC水平均明显低于对照组儿童，提示PC参与了化脓性脑膜炎的发生发展过程，可作为化脓性脑膜炎辅助诊断的指标，与既往研究结果一致[8]。本研究还发现，实验组化脓性脑膜炎患儿恢复期血清和脑脊液水平明显高于急性期，说明随着病情的恢复，PC水平逐渐上升，提示PC水平可作为疾病诊治过程中判断病情转归的指标。本研究结果亦显示，重症化脓性脑膜炎患儿血清和脑脊液PC水平明显低于轻症化脓性脑膜炎患儿，说明感染越严重PC的水平越低，提示PC还可作为判断病情严重程度的指标。

总之，检测血清和脑脊液PC水平可为化脓性脑膜炎的诊断、病情判断和疾病转归提供客观依据。Roback等[9]研究脑膜炎球菌引起的兔休克时发现，活化的PC可降低兔的死亡率，该研究结果也为临床应用外源性PC治疗疾病提供了新思路，值得进一步深入研究。

[1]胡亚美，江载芳，申昆玲.诸福棠实用儿科学[M].第8版.北京：人民卫生出版社，2015.981-1003.

[2]Della Valle P, Pavani G, D’Angelo A. The protein C pathway and sepsis[J]. Thromb Res, 2012, 129(3): 296-300.

[3]唐金凤，陈先春，钟磊，等.血浆凝血因子V、VIII及蛋白C活性与下肢深静脉血栓形成的相关性[J].实验与检验医学，2015，33（1）：103-105.

[4]Gale AJ, Griffin JH. Characterization of a thrombomodulin binding site on protein C and its comparison to an activated protein C binding site for factor Va[J]. Proteins, 2004, 54(3): 433-441.

[5]Tran S, Dahlback B. Novel APC-cleavage sites in FVa provide insights into mechanisms of action of APC and its cofactor protein S[J]. J Thromb Haemost, 2010, 8(1): 129-136.

[6]Zeng W, Matter WF, Yan SB, et al. Effect of drotrecogin alfa (activated) on human endothelial cell permeability and Rho kinase signaling [J]. Crit Care Med, 2004, 32(5 Suppl): S302-308.

[7]Thiyagarajan M, Fernández JA, Lane SM, et al. Activated protein C promotes neovascularization and neurogenesis in post ischemic brain via protease-activated receptor 1[J]. J Neurosci, 2008, 28(48): 12788-12797.

[8]Brueckmann M, Hoffmann U, De Rossi L, et al. Activated protein C inhibits the release of macrophage in fl ammatory protein-1-alpha from THP-1cells and from human monocytes[J]. Cytokine, 2004, 26(3): 106-113.

[9]Roback MG, Stack AM, Thompson C, et al. Activated protein C concentrate for the treatment of meningococcal endotoxin shock in rabbits[J]. Shock, 1998, 9(2): 138-142.

CHANGES AND SIGNIFICANCE OF SERUM AND CEREBROSPINAL FLUID PROTEIN C LEVEL IN CHILDREN WITH PURULENT MENINGITIS

WANG Yan, LIU Li-rui, LI Bin, et al
(Department of Pediatrics, the Affiliated Hospital of Chengde Medical College, Hebei Chengde 067000, China)

Objective:To investigate the changes and signif i cance of serum and cerebrospinal fl uid protein C (PC) level in children with purulent meningitis.Methods:62 children with purulent meningitis were taken as experimental group, 60 healthy children as control group at the same term. ELISA was used to detect the serum and cerebrospinal fl uid PC level of children in 2 groups.Results:The serum and cerebrospinal fl uid PC level of purulent meningitis children in acute stage were obviously lower than purulent meningitis children in recovery stage and control children (P＜0.05). There was no signif i cant difference between purulent meningitis children in recovery stage and control children about serum and cerebrospinal fl uid PC level (P＞0.05). In acute stage, the serum and cerebrospinal fl uid PC level of severe purulent meningitis children were obviously lower than mild purulent meningitis children (P＜0.05).Conclusions:Serum and cerebrospinal fl uid PC level can provide objective basis for diagnosis, condition judgement and prognosis of purulent meningitis.

Purulent meningitis; Protein C; Serum; Cerebrospinal fl uid

R725.1

A

1004-6879（2017）02-0099-03

2016-04-28）