用UGT1A1基因检测对1例Gilbert综合征患者的病情进行诊断的价值分析

赵训智

（石首市第三人民医院，湖北 石首 434400）

用UGT1A1基因检测对1例Gilbert综合征患者的病情进行诊断的价值分析

赵训智

（石首市第三人民医院，湖北 石首 434400）

Gilbert综合征又叫体质性肝功能不良性黄疸，是一种常见的遗传性非结合高胆红素血症。该病患者的临床表现主要是出现长期间歇性的轻、中度黄疸，部分患者还可出现乏力、消化不良、肝区不适等临床表现。在本研究中，笔者主要探讨用UGT1A1基因检测对1例Gilbert综合征患者的病情进行诊断的临床价值。

UGT1A1基因检测；Gilbert综合征；血清胆红素

Gilbert综合征是一种先天性的血清胆红素增高症。该病患者的病理改变主要是血清总胆红素（主要为非结合胆红素）的水平出现轻、中度的上升。该病具有一定的遗传性。目前，临床上认为，Gilbert综合征的发病机制主要是肝细胞内质网内的胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（UGT）的活性下降，致使非结合胆红素葡萄糖醛酸化的过程出现障碍，导致非结合胆红素的水平异常升高，进而使患者出现黄疸等临床表现[1]。Gilbert综合征患者的临床表现无特异性，因此其病情容易被漏诊或误诊。近年来，临床上用UGT1A1基因检测诊断Gilbert综合征显现出良好的效果。本文就用UGT1A1基因检测对1例Gilbert综合征患者的病情进行诊断的价值进行分析。

1 病历资料

邓某，女，22岁，家住在山区，职业为文员。该患者因“发现肝功能异常1月余”入院，入院时无特殊不适。既往其身体健康，无饮酒史。对该患者进行查体的结果显示：其双侧巩膜出现轻度黄染，未见肝掌及蜘蛛痣，其肝区无叩击痛，其肝脾肋下未触及。该患者在当地县医院进行肝功能检查的结果显示，其总胆红素的水平为56.3 μmol/L，非结合胆红素的水平为48.0 μmol/L，其余的肝功能指标皆正常。入院后，对该患者进行甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎抗体检查及Coombs试验、PNH试验、HCV-RNA、非嗜肝病毒全套、肝病相关抗体、血清铁加总铁结合力、铜蓝蛋白、α1-抗胰蛋白酶抗体、溶贫全套等检查均未见异常。入院后对其进行肝功能检查的结果显示，其总胆红素的水平为60.3 μmol/L，非结合胆红素的水平为47.2 μmol/L，其余的肝功能指标皆正常。对其进行肝脏影像学检查未见异常。对该患者进行UGT1A1﹡6（G211A）、UGT1A1﹡28（[TA]n）基因检测的结果显示，其UGT1A1﹡28突变杂合子。对该患者进行2 d的饥饿试验（每天让其摄入的总能量约为1400 KJ）。在进行饥饿试验的第1 d，对其进行肝功能检查的结果显示，其胆红素的水平为72.6 μmol/L，非结合胆红素的水平为62.9 μmol/L，其余的肝功能指标皆正常。在进行饥饿试验的第2 d，对其进行肝功能检查的结果显示，其总胆红素的水平为84.6 μmol/L，非结合胆红素的水平为68.0 μmol/L，其余的肝功能指标皆正常。第3 d让该患者正常进食，嘱其勿食用油腻的食物，注意休息，然后对其进行肝功能检查。检查的结果显示，其总胆红素的水平为58.6 μmol/L，非结合胆红素的水平为41.7 μmol/L，其余的肝功能指标皆正常。综合基因检测、生化检查及饥饿试验的结果，诊断该患者患有Gilbert综合征。

2 进行UGT1 A1 基因检测的方法

抽取该患者清晨空腹的外周静脉血，用Sanger双脱氧链终止法对其进行UGT1A1基因检测。以其外周血的DNA为模板，进行聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)试验。将纯化的PCR产物直接进行测序反应，反应的体积为10 μL，反应的温度为96℃，反应的时间为2 min。将进行测序反应所得到的产物用异丙醇进行沉淀，然后用ABIprism3100测序仪（AppliedBiosystems）进行UGT1A1基因检测。

3 讨论

Gilbert综合征是一种常见的遗传性非结合高胆红素血症。该病属于一种常染色体隐性遗传疾病。该病的发生与胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（UGT）的活性下降密切相关。临床研究表明，控制Gilbert综合征发病的UGT1A1基因在人类染色体2q37上。正常情况下，UGT1A1基因编码的蛋白能够促使胆红素与葡萄糖醛酸结合，使非结合胆红素转化为结合胆红素。当UGT1A1基因发生遗传变异时，其基因的表达水平明显下降，从而可导致非结合胆红素葡萄糖醛酸化的过程出现障碍，最终引发Gilbert综合征[2]。在UGT1A1基因中，控制Gilbert综合征发病的是TA盒，该因子位于启动子上游距离启动子25～35个bp处。TATA盒序列正常的野生型纯合子为-A(TA)6TAAA(TA)6TAA-(TA6/TA6)，突变纯合子为-A(TA)7TAAA(TA)7TAA-(TA7/TA7)，突变杂合子为 -A(TA)6TAAA(TA)7TAA-（TA6/TA7， 也 叫 UGT1A1﹡28）。由于有TA的插入，使TATA盒序列延长，导致TATA盒序列与转录因子的结合减少，使UGT1合成受限，进而可使UGT的活性下降。在Gilbert综合征患者的基因序列中，较为常见的外显子突变位点有UGT1A1﹡6、UGT1A1﹡ 7、UGT1A1﹡27和UGT1A1﹡ 62[3]。UGT1A1基因发生遗传变异的类型谱包括UGT1A1启动子TATA盒TA插入突变、c-3279T＞G和外显子突变。Gilbert综合征兼有染色体隐性遗传和显性遗传的特点，隐性遗传由启动子遗传变异起主导作用，显性遗传由外显子编码区突变起主导作用。目前，临床上主要采用UGT1A1基因检测诊断Gilbert综合征，而辅助诊断该病的方法有饥饿试验（即低热量饮食试验）、苯巴比妥试验、烟酸激发试验、利福平试验和肝脏穿刺术等[4]。在本文中，1例Gilbert综合征患经基因检测、饥饿试验及生化检查，其病情得到确诊。后对该患者进行随访，发现其孪生妹妹亦出现相同的症状。对该患者的妹妹进行UGT1A1基因检测，也诊断其患有Gilbert综合征。这说明Gilbert综合征具有一定的遗传性。大多数Gilbert综合征患者不需要进行特殊的治疗，其在注意休息、严格戒酒及摄入足够的热量后，黄疸可自然消退。对于部分黄疸症状严重的患者，可用苯巴比妥、格鲁米特、氯贝丁酯等药物进行治疗。

[1] 宋华,司徒爱明,宋力,等.一个Gilbert综合征家系UGT1A1基因突变报告[J].临床儿科杂志,2010,28(12):1141-1144.

[2] Drenth J P,Peters W H,Jansen J B.From gene to disease; uncon jugated hyperbilirubinemia:Gilbert’s syndrome and Crigler-Najjar types I and II[J].Nederlands Tijdschrift Voor Geneeskun de,2002,146(32):1488-1490.

[3] 车芳,骆子义.UGT1A1基因在Gilbert综合征及Crigler-Najjar综合征发病机制中研究进展[J].中华实用诊断与治疗杂志,2015,29（3）:219-222.

[4] 朱俊乐,施斌.Gilbert综合征的研究现状[J].临床肝胆病杂志,2011,27(1):110-112.

R446

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2095-7629-（2017）20-0169-02

赵训智，男，1974年9月出生，汉族，湖北石首人，本科学历，主任医师，研究方向：中西医结合治疗肝胆病