高效液相色谱串联质谱法测定韭菜中16种有机磷农药残留

招钰娟　邓晓华　甘沛明　梁雪琪　黎小鹏

摘 要：建立了韭菜中16种有机磷农药残留的液相色谱串联质谱的分析方法，本实验对2种前处理方法进行考察，线性范围在 0.5～20 ng/mL，线性相关系数 0.991～0.999 之间。使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以及 NY/T761-2008的前处理方法分别对韭菜进行前处理，QuEChERS 方法回收率在 71.23%～100.37% 之间，国标前处理方法回收率在 70.49%～108.32%。结果表明，QuEChERS 方法具有操作简便快速、准确率高、重复性好等优点。

关键词：有机磷；液质联用；韭菜；QuEChERS

中图分类号：O657.7 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20161017001

1 前言

食品的质量安全近年来在我国引起了高度重视，随着有机磷杀虫剂的品种日益争夺，造成了该农药在环境、农作物中的残留。蔬菜中基质复杂，农药残留量低，干扰因素多，主要残留成分不易分离、富集和纯化，因而相关农药检测不准确。[1、2]样品前处理中目标物的提取、基质净化方法的选择与优化成为农药多残留检测的关键。NY/T761-2008[3]的前处理方法是一个成熟的方法，但是前处理耗时长。而QuEChERS[4.5]（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是近年来国际上最新发展起来的一种用于农产品农药残留检测的快速样品前处理技术，此方法快捷简便。因此本次实验采用基质复杂的韭菜为样品以NY/T761-2008和QuEChERS的前处理方法进行比对，液相色谱串联质谱快速检测韭菜中有机磷农药残留。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

Agilent 1200 液相色谱6410 QQQ（美国安捷伦公司）；摇床、T26 匀浆机（IKA 公司）；高速冷冻离心机 3K30（SIGMA 公司）；MUL-TIV APTM 氮吹仪（Organomation 公司）；Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒（含PSA和GCB）；Agilent Florisil 500mg 6cc。

甲酸、乙腈均为色谱纯，由德国 Merck 公司生产；乙腈、丙酮、正己烷、氯化钠等均为分析纯，由广州分析化学试剂厂生产；实验用水为屈臣氏。甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧乐果、久效磷、敌百虫、乐果、敌敌畏、杀扑磷、亚胺硫磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱标准品（农业部环境保护监测所，浓度为 100 mg/L）。

2.2 液相条件

Agilent Poroshell 120 SB-C18 （2.1x100 mm， 2.7μm）；流动相组成及梯度如表 1 所示；柱温 45℃；流速为 0.3 mL/min；进样量 10 μL。按表1梯度洗脱。

2.3 质谱条件

电离方式：ESI+，检测模式：多反应检测 （MRM），毛细管电压：4000V，干燥气流量 10 L/min，干燥气温度：350℃，雾化器压力 50 psi，定性离子对、定量离子对及碰撞能量见表 2。

2.4 样品处理

2.4.1 NY/T761-2008前处理法

称取 25g 的韭菜样品，加入 25 mL 乙腈，匀质机匀浆，10000 rpm 4℃ 冷冻离心 5 min，吸取 10 mL 样品50℃氮吹至尽干，2mL正己烷定容，旋涡震荡，待净化。

净化：5 mL丙酮+正己烷（1：9）活化Florisil柱，下接10mL试管把待测样品全部转移至Florisil柱中，用5mL丙酮+正己烷（1：9）分2次洗涤试管并把溶剂倒入spe中，负压抽干，50℃氮吹至近干。

2.5 mL 初始流动相定容，漩涡震荡 1 min，10000 rmp/min 4 ℃离心 5 min，倒入样品瓶中，上机检测。

2.4.2 QuEChERS 前处理法

称取 10 g 的韭菜样品，加入 10 mL冰冻乙腈，匀质机匀浆，加入陶瓷均质子，加入 Agilent Bond Elut QuEChERS 提取盐包，剧烈震荡 3min，10000 rpm 4℃冷冻离心 5 min，全部上清液倒入有陶瓷均质子的分散固相萃取管中，剧烈震荡 3min，漩涡 1min，10000 rpm 4℃冷冻离心 5min，吸取 0.2mL 样品，初始流动相定容到 1mL，上机检测。

3 结果与讨论

3.1 液相色谱柱选择

色谱条件优化分别使用 Poroshell 120 SB-C18 （2.1×

100 mm，2.7μm）色谱柱（图1）、ZORBAX SB-C18（2.1×

150mm，3.5μm）（图2）和 Atlantis T3（2.1x150mm，3.5μm）（圖3），由图 1可知，采用 Poroshell 120 SB-C18 色谱柱对 16 种有机磷农药进行分离时，色谱峰的分离效果最好，而且分离时间短。

3.2 样品前处理方法

本次实验使用2种前处理方法来对韭菜样品进行检测，韭菜样品中杂质成分较为复杂，NY/T761-2008前处净化效果（见图4黑色基线），红色基线则是QuEChERS（含PSA和GCB），由此证明，含有PSA和GCB的QuEChERS

比NY/T761-2008前处净化效果要优。

3.3 线性范围和相关系数

在该试验条件下标准溶液的浓度在0.5ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL各取10uL进样，记录色谱图，线性方程和相关系数见表3。

3.4 回收率和精密度

以各物质的特征离子色谱峰信噪比S/N>10算出定量限，空白样品，分别加入浓度为10、20、40 ug/kg的混合标准品，做2平行实验，详见表4。

4 结论

本实验建立了韭菜中16种有机磷农药残留的液相色谱串联质谱检测方法，采用2种前处理方法对加标样品进行分析。结果表明QuEChERS 方法比国标方法的提取效率高，净化效果好，灵敏度高、重现性好，适用于韭菜有机磷农药残留检测的实际工作需要。

参考文献

[1]张一宾，张怿.农药[M].北京：中国物资出版社， 1997：

55 -60.

[2]达晶，王钢力，曹进，张庆生.QuEChERS液相色谱-串联质谱法测定植物性食品中30种氨基甲酸酯类农药残留[J].色谱（Chinese Journal of Chromatography），2015，8（33）：830-837.

[3]NY/T 761-2008，蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定[S].

[4]Dimitra A L，Triantafyllos A A[J]. Anal Bioanal Chem，2007（389）：1663.

[5]Angelika B，Marek B. Food Chem[J].2008，108（2）：6694.