盐度对叶尔羌高原鳅受精卵孵化和仔鱼存活率的影响

陈生熬��+姚娜��+王帅��+宋勇+谢从新��+任道全��+范镇明

摘要：采用急性毒理学试验方法，探讨6个盐度0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%对叶尔羌高原鳅受精卵孵化率、仔鱼成活率等的影响。结果显示，在不同盐度梯度下，叶尔羌高原鳅受精卵的孵化时间、孵化率、畸形率均表现出显著差异（P<0.05）。不同盐度下的孵化时间差异不显著，而在0.2%～0.6%之间孵化率较高，3个梯度差异不显著（P>0.05）。畸形率在0.4%、0.6%盐度下较低，在0.4%盐度下最低，低至2.67%。叶尔羌高原鳅仔鱼不投喂存活系数（SAI）的测定分析表明，仔鱼在48 h内死亡数量较大，但盐度对其影响极大，适宜盐度为02%～0.8%，最适盐度则为0.4%，SAI值较高，且差异不显著（P>0.05）。盐度与SAI相关性较高，关系式为Y=-1.146 8X2+11.231X+5.236 4（r2=0.959 8）。在0.2%～0.6%盐度梯度之间，SAI与孵化率存在直线相关，关系式为Y=0.007 5X+0.703 5（r2=0.937 1）；SAI与畸形率的关系式为Y=-0.005 3X2+0.302 7X-3.394 7（r2=1）。研究表明，在叶尔羌高原鳅资源早期发育过程中，盐度胁迫至关重要，对其盐度的选择将直接影响其生长和发育。

关键词：叶尔羌高原鳅；盐度；受精卵；仔鱼；存活数量

中图分类号： S917.4文献标志码：

文章编号：1002-1302（2016）08-0303-03

叶尔羌高原鳅[Triplophysa （Hedinichthys） yarkandensis （Day）]别称狗头鱼、小大头，属于鲤形目（Cyprinidformes）鳅科（Cobitidae）条鳅亚科（Nemachilinae）高原鳅属（Triplophysa）鼓鳔亚属（Hedinichthys）塔里木河水系土著鱼类[1-3]。关于塔里木河水系渔业的研究多集中在渔业环境调查、外来物种、裂腹鱼类及鳅科鱼类生物学[3-7]，对于该水系高原鳅的研究仅为新种报道、形态特征、摄食与生长等，对于叶尔羌高原鳅也仅有生物学特征、生长与摄食、繁殖习性等方面的研究[3-4，8-10]。

近年来，塔里木河干流水量日益减少，盐碱加剧，环境因子对渔业资源的影响颇大，导致叶尔羌高原鳅资源锐减，其前景令人堪忧，可能成为塔里木河水系继扁吻鱼（Aspiorhynchus laticeps）和塔里木裂腹鱼（Schizothorax biddulphi）之后的第3种濒危鱼类[2-3]。鉴于此，开展盐碱化对叶尔羌高原鳅生长和发育胁迫的研究已迫在眉睫。已有关于塔里木河盐碱化防治等水利方面的研究[5-7]，但关于盐碱化对塔里木河流域水生生物的影响，尤其对于叶尔羌高原鳅等土著鱼类盐碱胁迫的研究尚未见报道。

在人工繁殖成功的基础上，采用盐度胁迫和存活率研究方法，系统总结叶尔羌高原鳅受精卵和仔鱼在盐度影响下的变化情况，以期为孵化率及育苗成活率的提高、半咸水人工驯养、增殖保护、苗种生产提供依据。

1材料与方法

1.1材料

供试受精卵和仔鱼由塔里木大学水产试验基地提供。叶尔羌高原鳅亲鱼经人工催产后自然产卵，受精卵在50 L塑料桶改装的孵化桶内流水孵化。孵化及仔鱼养殖均采用曝气48 h以上的自来水，pH值为6.5～7.5，溶解氧保持在 8.0 mg/L 以上，水温控制在（20±1） ℃。仔鱼孵出后，挑选肉眼观察无畸形的正常仔鱼，用于不投饵存活系数的试验。

1.2方法

盐度设置分别为0%（自来水）、0.2%、0.4%、0.6%、08%、1.0%共6个梯度，采用速溶海水晶（上海海业生物科技有限公司产品）配置，并采用HANNAHI931101型盐度计矫正盐度，每个组合设置3个平行和1个对照。采用1 000 mL 烧杯作为试验容器，每个烧杯放100粒。采用 ACO-004型电磁式空气泵（功率为0.75～1.10 kW）进行微充气。

1.3取样和观察

在孵化过程中严格记录48 h内叶尔羌高原鳅受精卵（原肠胚后期）的孵化时间、周期、孵化率、畸形率、存活率等。孵化时间以50%的个体出膜为准，畸形率以尾部弯曲、个体脊椎弯曲、卵黄囊短小等为标准[13-17]。

仔鱼活力以不投饵存活系数（survival activity index，SAI）作为衡量指标[15-17]。仔鱼孵出后，挑选健康仔鱼作为试验用鱼，采用2 000 mL烧杯作为试验容器，每个烧杯放50尾，微充气，不投饵。发现死亡及时捞出，每天按时统计死亡尾数，直至全部死亡，计算平均值比较其SAI值。SAI值计算公式为：

[JZ]SAI=∑[DD（]k〖〗i=1[DD）]（N-hi）×i/N。

式中：N为起始的仔魚数，k为仔鱼全部死亡所需时间，d，hi为第i天时仔鱼的累计死亡数，尾。

1.4数据处理

采用SPSS 16.0软件进行数据处理，采用多重比较法进行组间差异显著性检验，以P<0.05为差异显著。结果以“平均值±标准差”（x[TX-5]±s）表示。

2结果与分析

2.1不同盐度下叶尔羌高原鳅受精卵的孵化情况

叶尔羌高原鳅受精卵在不同盐度梯度下孵化情况见表1。采用原肠胚后期受精卵发育，已完全经过20 h以上，从此时开始计时。从3批受精卵的孵化时间可知，孵化时间在不同盐度下没有显著差异（P>0.05），基本一致，但盐度升高则缩减了孵化时间。孵化率随着盐度梯度的升高先升高，从06%开始直线下降，孵化率的变化幅度随盐度的变化差异显著（P<0.05）。畸形率总体变化幅度不大，但表现特征与孵化率相反，差异极显著（P<0.01）。叶尔羌高原鳅受精卵 12 h 的存活率在0%～0.6%梯度之间，表现为差异不显著，尤其在0%与0.6%、0.2%与0.4%差异不显著（P>0.05）。在24 h时，0.2%与0.4%、0.6%与0.8%差异不显著，但二者间差异显著（P<0.05）；盐度为1.0%时，同批次比较差异极显著，存活率严重下降，期间下降明显的盐度梯度为02%、1.0%。在48 h时表现尤为凸出，盐度为0%、1%则存活率直线下降，达到最低点1.67%，仔鱼基本无法存活；盐度为0.2%～0.6%时虽然下降，但趋势不明显，差异不显著（P>0.05）；盐度为0.8%时持续下降至60.17%，但总体仍保持一定的存活率。本试验中，盐度0.2%和0.6%可作为叶尔羌高原鳅孵化和仔鱼培育中的盐度关键点或临界点，超出范围孵化率和存活率均会受到影响，出现下降趋势；虽然盐度为1.0%时孵化率下降至一半，但此盐度严重影响后期存活率，应舍弃此梯度。盐度的大小不仅影响孵化时间、孵化率、畸形率，对于不同时间段受精卵的存活率也起到关键作用，直接影响叶尔羌高原鳅的生长和发育。

2.2不同盐度下叶尔羌高原鳅的仔鱼存活系数

仔鱼存活系数指不投饵存活系数，本试验中依据仔鱼存活率和个数对其SAI进行测定。由表2可知，盐度为0.4%、0.6%时SAI较高，且表现为差异不显著（P>0.05）；盐度为0.2%、0.8%时表现为差异不显著（P>0.05）；两组相比差异显著（P<0.05）；盐度为0%、1%时两组相比差异显著，与其他盐度组相比差异极显著（P<0.01）。由表2还可知，盐度为04%、0.6%[JP3]时仔鱼存活时间最长，可达10 d；在其他盐度梯度下，最短存活时间为2 d，这与上述48 h存活的研究结果相一致。

由叶尔羌高原鳅仔鱼盐度和SAI关系式可知，SAI值随着盐度的升高呈抛物线趋势，先上升后下降，回落差异显著。盐度中单一0.4%梯度显示，标准差幅度较大，其他虽然不及0.4%梯度，但盐度总值影响其存活。由表1、表2还可知，盐度升高会影响其存活时间，盐度为0.4%～0.6%时存活系数较高，且半致死时间延长至4～5 d，表明此梯度对叶尔羌高原鳅仔鱼存活起到关键作用。

由表1的孵化率、畸形率指标结合表2可知，在0.2%～0.6%的盐度梯度之间，其指标表现为最高和最低，这与本节阐述仔鱼存活盐度在0.4%～0.6%之间相一致。可见，在盐度梯度试验中，盐度梯度0.4%是叶尔羌高原鳅早期发育中的临界关键点。

在叶尔羌高原鳅的仔鱼存活系数中，盐度与SAI的相关性表现为二项式的关系式，相关性较高。在 0.2%～0.6%盐度梯度之间，SAI与孵化率之间存在直线相关，关系式为Y=0.007 5X+0.703 5（r2=0.937 1）；SAI与畸形率则表现为二项式的关系式，即Y=-0.005 3X2+0.302 7X-3.394 7（r2=1.000 0）。

3结论与讨论

3.1盐度对叶尔羌高原鳅受精卵孵化的影响

对于鱼类的繁衍生息，繁殖成败取决于其栖息中形成的繁殖策略，这也是决定子代成活的关键，与鱼类的繁殖时间、繁殖地点、孕育子代机体能量资源分配密切相关。繁殖行为必须在有效的水体中进行，水体中盐碱等离子过高或过低均会影响其生殖[11-14]。

在盐度胁迫试验中，盐度过高或过低均会影响诸多鱼类受精卵的孵化和成活，海水鱼类对盐度的适应性较高。已有研究表明，豹纹鳃棘鲈（Plectropomus leopardus）受精卵孵化的适宜盐度范围为2.2%～4.2%，最适盐度范围为1.6%～34%[15]。赵明等研究七带石斑鱼（Epinephelus septemfasciatus）受精卵的孵化周期、孵化率、畸形率以及卵黄囊仔鱼的畸形率表明，受精卵孵化的最适盐度范围为3.0%～3.5%，盐度高于3.5%时孵化率随着盐度的升高而降低，仔鱼畸形率随之升高；盐度低于2.5%时孵化率随盐度降低而降低[16]。淡水鱼类胚胎发育的适宜盐度通常较低，且它们之间存在差异[17]。郭永军等研究表明，在盐度为0.1%～1.2%的条件下，鲤鱼（Cyprinuscarpio）胚胎孵化率与盐度呈负相关关系，鲤鱼胚胎及前期仔鱼发育的最佳孵化盐度为01%左右[18-19]。王杰等研究发现，乌鳢（Ophiocephalus argus Cantor）的最佳孵化盐度为0.150%～0.712%[17]。王茂元等研究表明，新吉富罗非鱼（NEW GIFT Nile Tilapia Oreochromis niloticus）受精卵在盐度为0.6%～1.5%时孵化率较高，达到8.90%～9.27%，比较接近于本试验中的9.467%；盐度低于0.3%、高于1.8%时孵化率较低[20]。对于咸淡水鱼类而言，赵俊等报道尖鳍鲤（Cyprinus acutidorsalis Wang）在盐度0%～1.25%下发育正常，超过此范围则发育不完全；最佳受精卵孵化梯度为0.5%，范围在0.25%～0.75%之间[21]。海水鱼类的盐度远大于塔里木河叶尔羌高原鳅的生存极限，这与本试验结果相一致。叶尔羌高原鳅受精卵的最佳孵化盐度梯度为0.4%，范围为0.2%～0.6%，高于淡水且栖息水域符合咸淡水，这与塔里木河的水质特点[5-7]密切相關，盐度在0.1%～0.5%范围内。

3.2盐度对叶尔羌高原鳅仔鱼成活率的影响

盐度对仔鱼存活率的影响比较显著，当盐度超出一定范围时，孵化培育周期缩短、畸形率升高，影响胚胎发育的正常进行，造成仔鱼存活率低、对环境变化的耐受性差。鱼类机体过弱、发育不完全，尤其是渗透压调节不完善将导致仔鱼死亡率过高，当环境盐度较低时，仔鱼为维持体内渗透压稳定而消耗的能量也减少[13-14，17]。

赵明等对七带石斑鱼（Epinephelus septemfasciatus）仔鱼的最适生存研究发现，此鱼类在盐度为3.0%～3.5%时仔鱼存活系数为24.70、23.27[16]。王贵宁等对卵形鲳鲹（Trachinotus ovatus）初孵仔鱼的存活和发育研究发现，盐度为2.8%～3.6%时仔鱼存活率较高，均大于5.0%；在最适温度24 ℃下，最佳盐度为3.2%，此时仔鱼存活系数最高[22]。王涵生等观察比较发现，在盐度为3.8%～4.1%、2.1%～2.4%的2个盐度梯度内，赤点石斑鱼（Epinephelus akaara）仔鱼的SAI值为3.19～12.42[23]。如果只有SAI值大于5的仔鱼才可能被进一步培育成苗，则本试验中除了1%盐度梯度以外基本都可以，但最佳范围盐度梯度较小。

强俊等研究发现，在不同盐度下，奥尼罗非鱼（Oreochromis mossambicus）仔鱼24 h的死亡率显著不同，盐度越高则畸形率越高、死亡个体越多、仔鱼存活系数越低[24]。本试验中，在盐度0.4%、0.6%时叶尔羌高原鳅仔鱼存活时间最长，可达10 d；1%梯度下仅能存活48 h，随着盐度的升高死亡数显著上升，SAI值直线下降。

王杰等、易祖盛等研究发现，盐度对初孵仔鱼SAI值的影响主要通过对渗透调节的影响来实现；在不同盐度下，仔鱼需要消耗能量调节其渗透压，初孵仔鱼能够在盐度范围较广的水体中存活，机体结构与组分使其保持了一定渗透，并有能力维护其渗透，可主动调节渗透压以保持平衡[17，25]。本试验的结论与之一致，内陆水域咸淡水栖息的高原鳅鱼类具有不同的渗透调节，仔鱼在一定盐度范围内存活，盐度范围内SAI值呈抛物线趋势，先上升后下降，回落差异显著。

致谢：在盐度分析和文章修订中得到了中国水产科学院长江水产研究所马宝珊博士的大力协助，谨致谢忱！

参考文献：〖HJ1.5mm〗

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