专家问答

专家问答

问1: 脑组织取材注意事项?

答：用于组织学实验时，需经心脏灌流预冷的PBS和4%多聚甲醛后取出脑组织，分离待检测部位并以包埋剂包埋。用于提取蛋白和RNA的实验，需经心脏灌流预冷的PBS后迅速取出脑组织，冰上分离待检测部位后以液氮速冻，可立即提取也可长期保存于液氮或-80度冰箱中。

问2： 基因敲除小鼠繁殖注意事项？

答：繁殖基因敲除小鼠时需注意以下几点：(1)对得到的子代小鼠进行序列分析，确定突变位点；(2)选择来自于同一只F0代得到的杂合子雌性和雄性小鼠进行交配，可得到纯合子。但如果一直未能得到纯合子，则需考虑该基因纯合敲除引起的胚胎致死等问题，并选择条件性基因敲除小鼠用于实验；(3)由于基因敲除小鼠可能出现繁殖力弱和母性差等情况，因此需做好繁殖记录，并密切关注新生小鼠的状况，可在母鼠怀孕至小鼠离乳前给予瓜子；(4)不同小鼠品系的遗传背景可影响其表型，因此需要根据实验需要选择合适的品系；(5)使用雌雄杂合子作为交配笼，通常需大量交配笼，才能得到足够数量同周龄的纯合子和野生型对照小鼠(或根据实验需要，还需得到杂合子)。

(感谢中国医学科学院医学实验读完研究生邱彬博士的解答)