乙型肝炎病毒血清标志物的检测分析

彭 俏

（吉林省辽源市中心医院检验科，吉林 辽源 136200）

乙型肝炎病毒血清标志物的检测分析

彭 俏

（吉林省辽源市中心医院检验科，吉林 辽源 136200）

目的对乙型肝炎血清标志物通过使用酶联免疫吸附试验、时间分辨免疫荧光法、化学发光法免疫分析法进行检测并进行判断其检测方式的精准度。方法通过采用ELISA、ECLIA及TRFIA 3种方法对172例血清样本进行平行测定乙型肝炎病毒，根据DNA定量检测阳性患者的HBSAG水平，判定灵敏度和精密度。结果当进行低浓度HBSAG检测时，ECLIA的阳性检出率与ELISA吸附试验和TRFIA的检出比率高，差异较为明显，具有一定的统计学意义。结论采用ELISA法检验进行HBV血清流行病学的调查中，具有较高的灵感度，对HBSAG进行检验时，发现其呈阳性较高，故ELISA法在对低浓度HBSAG检测值得在临床进行推广及应用。

肿瘤血清标志物；乙型肝炎；检测分析

乙型肝炎表面抗原血清标志物由Blumberg在1963年澳大利亚土著人的血清中发现的，曾被称为澳大利亚抗原，《乙型肝炎表面抗原》是1974年被正式命名。HBSAG实际上也是肝炎病毒的外壳一部分之一，一般血清检测时，它不含病毒颗粒，并不能反映病毒的有无复制性，或者复制程度还有传染性强弱性。故选用血清检测HBSAG呈阳性作为HBV感染的标志。

根据我院收治的172例患者，使用ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）、ECLIA （化学发光法免疫分析法）[1]对乙型肝炎病毒的DNA定量检测的阳性患者的HBSAG水平进行检测，并判定这3种方法的灵敏度和精密度，进而对临床应用价值进行分析。

1 材料与方法

1.1 测试资料：根据我院收治的172例患者，采集其血清样本后，使用ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）、ECLIA （化学发光法免疫分析法）对乙型肝炎病毒的DNA定量检测的阳性患者的HBSAG水平进行检测。其中男性79例，女性93例，年龄15～78岁。

1.2 研究方法

1.2.1 样本采集： 空腹采血作为对检查者初步检测方式，检验师在第一时间分离血清，并将放置于- 18～- 20 ℃的冰箱或冷冻室内，并确保检验在2 d内完成。

1.2.2 检测方法：将ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）、ECLIA （化学发光法免疫分析法）3种肿瘤血清标志物按照试剂盒说明书，进行酶联免疫吸附试验测定，同时按照全自动电化学发光仪和配套试、酶标仪等仪器设备的使用说明书进行操作。

1.2.3 灵敏度实验：将血清稀释成不同的浓度，ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）、ECLIA （化学发光法免疫分析法）分别进行5次重复测验，根据每次测定结果进行研究分析。

1.3 数据统计学：利用PSS1.7统计数据分析软件对所有收集数据进行处理，进行t或卡方检验，P＜0.05具有统计学差异。

2 结 果

2.1 灵敏度检测：3种方法相比较，ECLIA（化学发光法免疫分析法）灵敏度及精密都要相对其他两组监测高。

2.2 ECLIA（化学发光法免疫分析法）与ELISA（酶联免疫吸附试验）测定HBSAG水平各模式的结果：利用3种检测方式对我院收治的172例血液样本检测，ECLIA检测出138例，检测出的比率为80.2%，ELISA检测出125例，检测出的比率为72.6%。通过资料分析：发现ECLIA法的低浓度HBSAG检出率较高，具有统计学意义。

3 讨 论

现今全球大概有将近3亿乙型肝炎病毒的携带者，仅我国就有将近1亿的乙型肝炎病毒携带者，而且我国也是世界上乙型肝炎的高发国之一。以乙型肝炎血清标志物作为临床诊断乙型肝炎患者的诊断标准，受到临床技术人员的高度重视，从早期癌患的免疫程度试验、从免疫电泳实验发展到现在的ECLIA（化学发光法免疫分析法）与ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）[2]。

通过数据结果发现，当前使用最为广泛的ELISA与ECLIA 在HBEAG项目上出现极强的一致性，但是说明尽管ELISA在临床上进行改进，从而使其满足临床检测需要，ELISA在HBSAG项目上出现9例漏洞，说明其敏感度不足，同时还受判断结果影响。但ELISA还有试剂成本低、收费低、适用于普通患者等不可代替的优点[3]。

通过ECLIA对HBSAG的检测，已经具备相应的全自动化，且该方法使用简便，具有良好的精密度和敏感度，但是它只能使用在经确诊为乙型肝炎的患者或者当其他方法学不能确定结果时，然而溯源一致的项目可以通过定量结果的回归分析判定检测的一致性，并对处于病毒复制期或者可能发生病毒变异的患者进行HBV、DNA和进行相关分析，便于明确临床价值和局限性。使用ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）、ECLIA （化学发光法免疫分析法）3种采用单位及溯源性不同，出现较大的数据差异，可以正确检验报告进行治疗，相关评价的相互性也就决定不同方法会产生不同的检验结果[4]。

采用使用ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRFIA（时间分辨免疫荧光法）、ECLIA （化学发光法免疫分析法）3种血清标志物检测方式对低浓度HBSAG样本进行检测的结果表明：发现ECLIA法较ELISA法与TRFIA法对于低浓度的HBSAG检出率较高。为医疗安全保证让低浓度HBSAG的检出，临床应尽可能采用ECLIA法检测。

[1] 陈佑明,黄敬,熊符,等.时间分辨荧光免疫分析法和免疫放射分析法检测HBSAG的对比分析[J].标记免疫分析与临床,2006,13 (1):51.

[2] 张莹.ELISA和ECLIA检测乙型肝炎病毒血清标志物的检测结果分析[J].中国医学工程,2012,20(11):85.

[3] 周迎春,陈辉,关平.3种方法测定低浓度乙型肝炎病毒表面抗原效果评价[J].检验医学与临床,2007,4(11):1070-1071.

[4] 杨凡,单咏梅,周宏,等.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价分析[J].检验医学,2010,25(9):723-726.

R512.6+2；R446.1

：B

：1671-8194（2017）21-0149-01