不同直径樟树茎枝与樟树根提取物抗炎及镇痛作用对比分析

吴先辉

.实验研究.

不同直径樟树茎枝与樟树根提取物抗炎及镇痛作用对比分析

吴先辉

目的探讨比较不同直径樟树茎枝与樟树根提取物的抗炎及镇痛作用.方法选取昆明(KM)小鼠进行观察研究, 分别通过小鼠毛细血管通透性抗炎实验、小鼠热板镇痛实验、小鼠醋酸扭体实验观察不同直径樟树茎枝与樟树根提取物的对小鼠的抗炎作用和镇痛作用, 并进行对比分析.结果实验后, 樟树根组小鼠光密度(OD)值为(0.090±0.034)、樟树茎枝Ⅱ组为(0.102±0.029)、樟树茎枝Ⅲ组为(0.088±0.026)、复方乙酰水杨酸片组为(0.089±0.033), 均明显低于对照组的(0.143±0.042),差异具有统计学意义(P<0.05);樟树茎枝Ⅰ组小鼠OD值为(0.132±0.028), 低于对照组的(0.143±0.042),但差异无统计学意义(P>0.05).樟树根组、樟树茎枝Ⅰ组、樟树茎枝Ⅱ组、樟树茎枝Ⅲ组、复方乙酰水杨酸片组小鼠的扭体次数明显少于对照组, 差异具有统计学意义(P<0.05).结论同等剂量的樟树茎枝与樟树根提取物在抗炎、镇痛等方面的作用有较大相似性, 且直径越大的樟树茎枝抗炎、镇痛作用效果可能还强于樟树根.

樟树茎枝提取物;樟树根提取物;直径;抗炎;镇痛

樟树为樟科常绿大乔木, 别名木樟、乌樟等, 是我国珍贵用材和经济树种[1].肠炎宁糖浆是目前临床治疗大肠湿热的主要药物, 而樟树树根作为其主要成分, 为避免樟树树根资源匮乏导致肠炎宁糖浆治疗药效发生变化, 本研究通过对比分析樟树根与樟树茎枝在抗炎、止泻、镇痛等方面的药效,旨在为樟树茎枝代替樟树根作为肠炎宁糖浆的主要成分的开发研究提供参考依据, 具体报告如下.

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取小鼠均由常州卡文斯实验动物有限公司提供, 型号为KM小鼠, 品牌为CAVENS, 大小均在18～22 g,雌雄兼用.

1.2 药物 樟树根及直径1～2 cm、2～3 cm、>3 cm的樟树茎枝提取物(西安天瑞生物技术有限公司);复方乙酰水杨酸片(山西天源制药有限公司, 国药准字H4024066);罗通定片(赤峰蒙欣药业有限公司, 国药准字H15020512).临用前复方乙酰水杨酸片、罗通定片均用蒸馏水分别制成浓度为10 mg/ml、1.7 mg/ml的溶液.

1.3 试剂 醋酸(湖南尔康制药股份有限公司, 国药准字H43020194);伊文思蓝(品牌:Spectrum, 上海恒远生物科技有限公司).

1.4 仪器 紫外分光光度仪(广州科晓科学仪器有限公司,型号:UV-6100).

1.5 方法

1.5 . 1 小鼠毛细血管通透性抗炎实验 选取72只健康KM小鼠, 将其按随机数字表法分为对照组、樟树根组、樟树茎枝Ⅰ组(直径1～2 cm)、樟树茎枝Ⅱ组(直径2～3 cm)、樟树茎枝Ⅲ组(直径>3 cm)、复方乙酰水杨酸片组, 每组12只.前5组(除对照组)小鼠给药剂量为3.96 g生药/kg, 复方乙酰水杨酸片组给药剂量为0.2 g/kg.所选小鼠均连续灌胃给药4 d, 给药容量为0.2 ml/10 g, 末次给药前所选小鼠均需禁食不禁水16 h, 给药1 h后, 所选小鼠均于尾部静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1 ml/10 g, 同时腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml, 于20 min后均脱颈椎处死所选小鼠, 打开小鼠腹腔,用5 ml 0.9%NaCl溶液分2次洗涤腹腔, 将洗涤液吸出, 以3 000 r/min离心速度离心15 min, 离心后取上清液于试管内,将其置入分光光度计590 nm处测定OD值.

1.5 . 2 小鼠醋酸镇痛实验 取72只健康KM小鼠, 将其按随机数字表法分为对照组、樟树根组、樟树茎枝Ⅰ组、樟树茎枝Ⅱ组、樟树茎枝Ⅲ组、复方乙酰水杨酸片组, 每组12只.前5组(除对照组)小鼠给药剂量为3.96 g生药/kg, 复方乙酰水杨酸片组给药剂量为0.2 g/kg.所选小鼠均连续灌胃给药4 d, 给药容量为0.2 ml/10 g, 末次给药前所选小鼠均需禁食不禁水16 h, 给药1 h后, 所选小鼠均腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml, 观察20 min内小鼠扭体次数.

1.5 . 3 小鼠热办法镇痛实验 首先筛选合格小鼠, 具体措施如下:每次将1只小鼠放在热板上, 若小鼠出现疼痛反应舔后足时间<9 s或>24 s或跳跃者视为不合格者, 将选取合格小鼠按随机数字表法分为对照组、樟树根组、樟树茎枝Ⅰ组、樟树茎枝Ⅱ组、樟树茎枝Ⅲ组、罗通定片组, 前5组(除对照组)小鼠给药剂量为3.96 g生药/kg, 罗通定片组给药剂量为54 mg/kg.所选小鼠给药前均测定其正常痛阈值作为给药前痛阈值, 连续灌胃给药3 d, 给药容量0.2 ml /10 g, 末次给药前所选小鼠均需禁食不禁水12 h, 分别测量给药后0.5、1.0、1.5 h时的痛阈值.如60 s仍无反应, 将小鼠取出, 其痛阈值以60 s计算.

1.6 统计学方法 采用SPSS21.0统计学软件对研究数据进行统计分析.计量资料以均数 ± 标准差表示, 采用t检验.P<0.05表示差异具有统计学意义.

2 结果

2.1 小鼠毛细血管通透性抗炎实验结果比较 实验后, 樟树根组小鼠OD值为(0.090±0.034)、樟树茎枝Ⅱ组为(0.102±0.029)、樟树茎枝Ⅲ组为(0.088±0.026)、复方乙酰水杨酸片组为(0.089±0.033), 均明显低于对照组的(0.143±0.042),差异具有统计学意义(P<0.05);樟树茎枝Ⅰ组小鼠OD值为(0.132±0.028), 低于对照组的(0.143±0.042), 但差异无统计学意义(P>0.05).

2.2 小鼠醋酸镇痛实验结果比较 实验后, 樟树根组小鼠扭体次数为(5.54±4.21)次、樟树茎枝Ⅰ组为(9.64±6.34)次、樟树茎枝Ⅱ组为(6.77±5.26)次、樟树茎枝Ⅲ组为(6.48±5.06)次、复方乙酰水杨酸片组为(6.48±5.06)次, 均明少于对照组的(17.96±10.53)次, 差异具有统计学意义(P<0.05).

3 讨论

肠炎宁糖浆是纯中药制剂, 其中樟树根是肠炎宁糖浆中的主要成分之一, 为樟树科植物红叶木姜子的根, 有着祛风散寒、理气活气、止痛止痒、强心镇痉等功效, 主治风湿骨痛、跌打损伤、感冒头痛等[2].红叶木姜子属多年生落叶乔木,其生长年限较长, 生长速度缓慢.而樟树分布广泛, 樟树茎枝药用资源丰富, 随着近年来对其研究的深入, 其药用价值日益被人们所重视.据相关报道称, 樟树根与樟树茎枝均具有祛风、行气血、除风湿、得关节的功效, 临床主要用于治疗心腹胀痛、痛风、跌打损伤、霍乱呕吐等, 同时樟树树根与枫树叶合剂治疗痢疾肠炎有较好疗效[3].

本次研究结果显示, 樟树根组小鼠光密度(OD)值为(0.090±0.034)、樟树茎枝Ⅱ组为(0.102±0.029)、樟树茎枝Ⅲ组为(0.088±0.026)、复方乙酰水杨酸片组为(0.089±0.033),均明显低于对照组的(0.143±0.042), 差异具有统计学意义(P<0.05);樟树茎枝Ⅰ组小鼠OD值为(0.132±0.028), 低于对照组的(0.143±0.042), 但差异无统计学意义(P>0.05).说明樟树茎枝与樟树根均能明显降低伊文思蓝的渗出量.樟树根组、樟树茎枝Ⅰ组、樟树茎枝Ⅱ组、樟树茎枝Ⅲ组、复方乙酰水杨酸片组小鼠的扭体次数明显少于对照组, 差异具有统计学意义(P<0.05).说明樟树茎枝与樟树根均有一定的外周镇痛作用.提示樟树根和直径为2～3 cm和>3 cm的樟树茎枝均能减少炎症渗出量, 达到抗炎效果, 同时发现不同直径的樟树茎枝与樟树根均能减少醋酸疼痛引起的小鼠扭体次数, 有较好的外周性镇痛作用.

综上所述, 同等剂量的樟树茎枝与樟树根在抗炎、镇痛等方面的作用有较大相似性, 而且直径越大的樟树茎枝抗炎、镇痛作用效果可能还强于樟树根, 但在其他药理作用方面的研究还需进一步探讨.

[1] 龚琴, 陈兰英, 罗颖颖, 等. 不同直径的樟树茎枝和樟树根提取物主要药效学比较研究. 江西中医药, 2012, 43(6):55-57.

[2] 彭颖, 欧阳婷, 颜红, 等. 樟树挥发油的提取及包合物制备与鉴定研究. 中国中医药信息杂志, 2014, 26(6):86-88.

[3] 周富强, 田素英, 潘建龙, 等. 樟树茎与沉香醇提物药理作用对比研究. 中医学报, 2013, 28(12):1849-1850.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.22.116

鹰潭市科技局科技计划项目(项目编号:鹰科鉴字[2012]第6号)

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2017-10-11]