山东人类精子库自精保存的现状分析及对策*

宋晓辉 王 丽刘诗辉 肖艳红 仝海云 韩文凯

山东大学生殖医学研究中心；国家辅助生殖与优生工程技术研究中心；生殖内分泌教育部重点实验室（山东济南 250001）

山东人类精子库自精保存的现状分析及对策*

宋晓辉 王 丽**刘诗辉 肖艳红 仝海云 韩文凯

山东大学生殖医学研究中心；国家辅助生殖与优生工程技术研究中心；生殖内分泌教育部重点实验室（山东济南 250001）

目的 回顾分析山东大学附属生殖医院人类精子库（以下简称山东人类精子库）从2009年1月到2015年12月共317名自精保存患者的情况，总结工作中已取得的经验及存在的不足，探索未来的发展方向。方法 从每年自精保存的人数变化、保存原因、年龄、学历和职业等方面回顾性分析山东人类精子库自精保存的情况。结果 山东人类精子库每年自精保存人数总体呈上升趋势，在自精保存原因中，因来我院辅助生殖取精困难或少弱精子症患者保存备用精子所占比例最高，约为47.6%；其次为保存精子以备未来生育使用，所占比例约为34.7%。自精保存者以中青年为主，人员组成多样化，以具有大专以上学历的知识分子、白领、公务员所占比例最高，且各类人员自精保存原因不同。结论 越来越多的人开始接受自精保存。人类精子库应加大对医务工作者及社会人员的宣传，让更多的人了解自精保存的现实作用，使更多的人在需要时能够到人类精子库进行自精保存，延续自己生育的能力。

精液保存; 精子库; 生殖技术, 辅助

Key woorrddss semen preservation; sperm bank; reproductive techniques, assisted

自精保存又称生殖保险或男性生育力保存，是人类精子库的工作内容之一，它是指以生殖保险为目的，预先将精液保存于人类精子库，待需要时再进行解冻使用[1]。随着辅助生殖技术和人类精子库的发展，精液冷冻技术结合辅助生殖技术更进一步拓宽了不孕不育的治疗范围[2]，冷冻精液在临床被广泛使用，自精保存也越来越受到大众的了解和接受。自精保存可适用于广泛的人群，特别是接受放化疗或接触有害有毒物质的患者、接受辅助生殖时取精困难或少弱精子症患者、保存精子以备未来生育的患者、夫妻长期两地分居接受辅助生殖时男方无法到场等情况。本文主要统计2009年1月到2015年12月7年间到山东人类精子库自精保存患者的情况，总结自精保存工作中的经验与不足并探索其未来的发展方向。

资料与方法

一、资料

选取2009年1月到2015年12月在山东人类精子库进行自精保存的患者共317 人（401人次，其中58人保存两次或两次以上）。自精保存者需携带有效证件来我库提出申请，在详细了解自精保存流程和冷冻风险后签订自精保存知情同意书。自精保存者须进行必要的实验室检查，包括乙肝五项、丙肝、梅毒、艾滋病毒、优生五项（TORCH）等。按照第五版《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》标准对精液的质量进行检查，包括精液量、液化时间、pH值、浓度、存活率、总活力等，并对冷冻的精液做冷冻复苏实验，自精保存者根据实际情况自主决定是否冷冻所留取的精液。

二、方法

对自精保存者每年人数变化、保存原因以及年龄和学历职业等情况进行回顾性分析。

结 果

一、自精保存者每年的人数变化

山东人类精子库每年自精保存人数、人次总体呈上升趋势，2015年自精保存人数已经由2009年的28人升至71人，人次由39次升至89次，见表1。

二、自精保存的原因

自精保存者申请自精保存的原因主要分为以下几个方面：接受辅助生殖技术时取精困难或少弱精子症患者、保存精子以备将来生育、因病接受放化疗和手术、高危职业等。2009年至2015年自精保存的总人数为317人，因来我院接受辅助生殖取精困难或少弱精子症患者而保存备用精子所占比例最高约为47.6%（151/317），其次为保存精子以备将来生育所占比例约为34.7%（110/317），因病接受放化疗和手术所占比例为14.8%(47/317)，因高危职业保存精子所占比例为1.89%（6/317）。另外保存自己精液供科研用1例，因超龄拒绝捐精后自精保存1例，因接触了致病菌的防疫站工作人员来保存精液1例。2009年至2015年的自精保存原因年度分布情况见表2。

表1 2009年至2015年自精保存人数和人次变化

表2 自精保存的原因年度分布

三、自精保存者的年龄分布

317名自精保存者中年龄最小的为17岁，最大的为68岁，中位年龄为33岁，多数患者年龄为21～40岁，见表3。

四、自精保存者的人员组成

317名自精保存者中，具有大专以上学历的知识分子、白领、公务员等所占比例最高，其次为具有高中以下学历的人员，各人群自精保存的主要原因并不相同，见表4。

表3 自精保存者年龄分布

表4 自精保存者主要人员组成和各类人员自精保存的主要原因

五、特殊病例

317名自精保存者中因取精困难而申请院外取精的为33人；单独罐保存1例乙肝大三阳肿瘤患者；保存自己精液供科研用1人；因精液质量差或冷冻复苏结果差放弃冷冻保存的有35人；3人因精液量太少而未能冷冻保存。

讨 论

1953年世界上首次运用人类冷冻精液成功受孕，此后精子液氮冷冻技术日益成熟，相关法律与行业规范体系逐渐完善，人类精子库得以蓬勃发展[3]。人类精子库的主要任务之一是对供精者的精液进行冷冻保存用于治疗不育症和提供生殖保险服务[4]。全国人类精子库面临的共同问题是大部分精力用在供精者的冷冻保存，而自精保存宣传力度薄弱影响力小，本文则对山东人类精子库自精保存的情况进行了回顾性分析。

自精保存伴随着人类精子库的出现一直作为新鲜的事物而未被广泛接受[5]，2009年全年山东人类精子库仅28人前来保存精子。随着来本院做辅助生殖人数的增多，每年因到我院接受辅助生殖时取精困难或少弱精子症而保存备用精子的人数也有递增趋势，而且在近7年自精保存原因中所占比例也最高。分析显示，2011年后人数增长比较快，主要是因为随着辅助生殖技术的开展且医护人员主动对患者进行宣传后保存精子以备将来使用的人数有所增多。所以，在今后的工作中应加大正面宣传力度，完善合理的宣传方式和宣传渠道，让更多的人了解精子库，了解自精保存。

本文分析显示，自精保存者以中青年为主，原因为这部分人群本身相对有更强烈的生育愿望，对自精保存易于接受。有报道指出大约15%新发男性癌症患者是55岁前被诊断出来的，这其中大约26%的人年龄低于20岁[6]，本文分析发现17名学生自精保存里有16人是因重病接受放化疗的患者，重病或癌症成为年轻未婚人群保存精液的主要原因。肿瘤本身可对精子的生成产生影响，研究表明在未做放化疗前无精子症要多于正常人[7]。化疗、放疗、手术或联合治疗更会导致精子质量显著降低，引起患者暂时或永久的不育症[8]，在接受放疗时因人体中睾丸是对辐射最为敏感的组织之一，直接辐射剂量低至2Gy（200rad）就足以损伤生精功能[9]，甚至造成无精子症即使恢复后也可能改变精子的受精能力，改变胚胎阶段的基因表达[10]，给患者和家庭带来了极大痛苦。随着先进的医疗技术的发展，肿瘤的生存时间大大的延长，使得治疗后的重心转移到生活质量上，对于未婚未育的患者来说生育力保存显得越来越重要。虽然我们的数据显示因病接受放化疗和手术自精保存患者比例在逐年升高，但是也仅占到总人数的14.8%，出现这样低比例的结果我们分析可能存在如下两方面原因：一是我们精子库依托于年周期数巨大的生殖医院，辅助生殖中取精困难、少弱精子症的患者会被推荐做自精保存以备取卵时使用，这部分人占的比例很大，相对而言因病接受放化疗和手术的人群占的比例就显得小了。二是精子库和自精保存对于社会大众甚至肿瘤科医生相对陌生，很多有需要的肿瘤患者并不知晓可以在放化疗前保存生育力。欣喜的是因病接受放化疗和手术的自精保存患者所占的比例正在逐年上升，但保存生育力的肿瘤病人中相当一部分是接受放化疗后才来保存的，这部分人往往因精液质量差导致保存失败，留下终身遗憾。所以人类精子库以后应加大与医院肿瘤相关科室的联系，一方面，共同探讨合适的精液冷冻时机；另一方面，让更多的医务人员和患者了解自精保存的价值，可以牢牢把握自己未来生育的主动权。

目前，从事高危职业者（如军人、运动员、矿工等）对于自精保存的了解还很少，但这部分人较其他人更需要提早保存。有报道指出高原缺氧、高温、寒冷、电磁辐射、高强度作业、大运动量训练、艰苦环境、过度疲劳、精神紧张和压力等都会对军人的精液质量产生影响[11]，特别是高原低氧环境存在多种对人体生殖功能不利的因素[12]。本文分析发现12名军人自精保存中有5人是因少弱精子症患者辅助生殖而做自精保存，这与相关报道相符合，所以在加强生殖健康教育和保健意识的同时应建议有条件的入伍军人提早做生育力保存。

分析显示具有大专学历以上的知识分子或白领等高收入人群是保存精子以备未来使用的主要人群，占到56.2%。该类人群知识水平高，经济条件较好，年龄多为中青年，生育愿望较强烈，对自精保存容易理解与接受，所以人类精子库可以多采用青年人喜好的新媒体方式进行宣传，比如通过微信、QQ、微博、网站等方式进行宣传，让更多的该类人群及早了解并及早选择自精保存。

随着山东人类精子库多年的发展，我们对自精保存的流程也进行了改革和创新。在接受辅助生殖的患者中，有很多因怕取卵的当天男方无法取出精液，所以先到精子库取精冷冻备用。而取精困难的患者中有一部分因心理等因素在精子库仍然无法取出精液，本着为病人服务的原则我们制定院外取精的条款，严格执行伦理原则并送交医院伦理委员会审核通过[13]对这部分保存者的精液留取DNA样本，患者本人及妻子（已婚者）签字按手印确认。317名自精保存者中有33人申请院外取精并且大多数取得成功。

Tedder等[14]发现同一液氮罐中有病毒阳性的标本可以引起交叉污染，样本包装存在缝隙时液氮就会成为病毒相互污染的媒介，虽然尚无生殖中心使用精子库冷冻精液发生交叉污染事例发生，但是不能就此忽视交叉污染的风险，它只是难以被估计的，很难确定发生可能性大小[15]，所以我们精子库建立了严格的规范和标准操作程序文件，患者在申请自精保存时必须提供完整有效的实验室检查报告单，分装冷冻过程与捐精志愿者分开，并且用自精保存专用液氮罐储存。因现阶段申请自精保存的患者实验室检查报告单必须为阴性而像乙肝等传染病患者就失去了生育力保存的机会，给患者留下了一辈子的遗憾。本精子库本着服务病人的原则，对1例乙肝大三阳的肿瘤待化疗患者采用单独罐进行自精保存。未来我们计划使用密封冷冻管取代传统的螺纹冷冻管对自精保存精液分罐储存，使这部分病人同样享有保存自身生育力的权利。

总之，自精保存具有广泛的适应人群，为这些人群保存生育能力带来了可能，自精保存人数呈逐年上升趋势，但目前仍明显偏少，这就使得很多患者失去了保存生育能力的机会，留下终生的遗憾，未来人类精子库应在提高冷冻保存技术的基础上加大宣传力度，让更多的人了解自精保存，更好地发挥生殖保险的作用，为更多的患者保留生育的希望。

1 张军荣, 姚康寿. 自精保存在生殖保险中的应用及研究进展. 国际生殖健康/计划生育杂志 2011; 30(4): 309-313

2 Kyono K,Nakajo Y,Doshida M, et al. Birth of a healthy male infant after transfer of vitrifi ed-warmed blastocysts derived from intracytoplasmic sperm injection with vitrifi ed-warmed oocytes and frozen-thawed spermatozoa. J Assist Reprod Genet 2009; 26(8): 451-453

3 平萍, 曹小蓉, 闫峰, 等.上海市人类精子库捐精现状及临床应用回顾性分析.中国男科学杂志 2011; 25(10): 47-50

4 卫生部关于修订人类辅助生殖技术与人类精子库相关技术规范、基本标准和伦理原则的通知. 中华人民共和国卫生部公报 2003; (3): 1-10

5 平萍, 朱晓斌, 刘勇, 等. 上海地区男性生殖保险6年回顾性分析. 中国男科学杂志 2009; 23(8): 41-44

6 Steliarova-Foucher E, Stiller C, Kaatsch P, et al. Lancet 2004; 364(9451): 2097-2105

7 盛慧强, 张欣宗, 洪艳. 男性肿瘤患者精液冷冻保存后常规参数分析. 中华男科学杂志 2015; 21(1): 44-47

8 奚颖霞, 张欣宗. 恶性肿瘤及其治疗对男性生育力的影响研究进展. 中国男科学杂志 2013; 27(5): 70-72

9 马永江. 工作环境对男性生殖健康的影响. 中国男科学杂志 2000; 14(3): 203-205

10 Maselli J, Hsles BF, Robaire B. Paternal exposure to testis cancer chemotherapeutics alters sperm fertilizing capacity and affects gene expression in eight-cell stage rat embryo.Andrology 2014; 2(2): 259-266

11 傅正英. 特殊环境与军人生殖健康. 解放军预防医学杂志2009; 27(4): 309-311

12 何江, 崔建华, 王瑞, 等. 高原低氧环境对成年男性精液质量及血清生殖激素的影响. 中国男科学杂志 2013; 27(2): 21-24

13 朱文兵, 范立青, 涂玲, 等. 人类精子库伦理管理的困惑与对策.医学与哲学, 人文社会医学版 2007; 28(9A): 26-28

14 TedderRS, ZuckermanMA, GoldstoneAH, et al. Hepatitis B transmission from contaminated cryopreservation tank. Lancet 1995; 346(8968): 137-140

15 Mazzilli F, Delfino M, Imbrogno N, et al. Survival of microorganisms in cryostorage of human sperm. Cell Tissue Bank 2006; 7(2): 75-79

（2016-07-15收稿）

Current situation analysis and countermeasures on autologous sperm preservation in Shandong human sperm bank*

Song Xiaohui, Wang Li**, Liu Shihui, Xiao Yanhong, Tong Haiyun, Han Wenkai Center for Reproductive Medicine, Shandong University; National Research Center for Assisted Reproductive Technology and Reproductive Genetics, China; The Key laboratory for Reproductive Endocrinology of Ministry of Education, Jinan 250001, Shandong, China

Objectivee To retrospectively analyze the situation of autologous sperm preservation of 317 patients from January 2009 to December 2015 in Shandong human sperm bank, and summarize work experience and defi ciency for discovering the future development direction. Metthhooddss Based on the aspects of the annual changes in the number of autologous sperm preservation, the reasons of preservation, age, education and occupation, the situation of autologous sperm preservation in the human sperm bank of Shandong was retrospectively evaluated. Ressuullttss The number of autologous sperm preservation patients in Shandong human sperm bank gradually increased every year. The proportion of the patients with difficulty of assisted reproduction and spare sperm accounted for 47.6%. The proportion of patients with sperm preservation for future use accounted for 34.7%. The most of people for autologous sperm preservation was young men. Most of them were intellectuals, white-collar workers, civil servants with college education background. They had different reasons for autologous sperm preservation. Concluussiioonn More and more people begin to accept the autologous sperm preservation; Human sperm bank should spread the propaganda in medical staff and society, and let more people understand the value of autologous sperm preservation, and reduce the occurrence of infertility.

doi:10.3969/j.issn.1008-0848.2016.08.004

R 321-33

资助：人类辅助生殖技术质量控制体系建立的相关研究，卫生公益性行业科研专项（201402004）

**通讯作者，Email: wangli_0531@163.com