肉鸡用中草药饲料添加剂的抑菌和毒理学试验

莫勇魁，蒋远军，韦庭江，韦金成，宋明杰，莫慢真，葛洪伟*

（1.广西河池市南丹县水产畜牧兽医局，广西南丹 547200；2.来宾市忻城县润华牧业有限责任公司，广西来宾 546200；

3.广西普大动物保健品有限公司，南宁 530004；4.广西大学动物科学技术学院，南宁 530004）

肉鸡用中草药饲料添加剂的抑菌和毒理学试验

莫勇魁1，蒋远军2,3，韦庭江2，韦金成3，宋明杰4，莫慢真4，葛洪伟2,3*

（1.广西河池市南丹县水产畜牧兽医局，广西南丹 547200；2.来宾市忻城县润华牧业有限责任公司，广西来宾 546200；

3.广西普大动物保健品有限公司，南宁 530004；4.广西大学动物科学技术学院，南宁 530004）

为了研究中草药饲料添加剂的的抑菌和毒理学效果，试验设计了两组中草药饲料添加剂提取液的抑菌效果试验和毒理学试验。结果表明，中草药饲料添加剂的抑菌效果较好，无毒副作用。在肉鸡饲养过程中，试验所设计的中草药组方可以作为中药添加剂使用。

中药饲料添加剂；抑菌试验；毒理学试验

每年我国生产的21万t的抗生素中，9.7万t的都流向了畜禽养殖场，大约占到了年产量的46.15%，而这巨大的使用量中，90%的抗生素都是作为动物饲料添加剂而被消耗，致使动物的抗生素滥用现象十分严重，出现了大量的耐药菌株，使得抗生素在动物疾病防治中的作用越来越小，为畜禽养殖业的发展埋下了隐患，同时也为人类的生命与健康带来了巨大威胁。因此寻求有效的抗生素替代物，突破传统肉鸡养殖方式可持续发展的瓶颈是目前肉鸡健康养殖领域的研究重点和热点[1-13]。

中药具有益气养血、固本培元等功效，其抗氧化、抗疲劳、抗衰老、抑菌等作用明显，本试验依据中药配伍的原理，配制两组中草药添加剂提取液，并对其进行抑菌实验、毒理实验，筛选出效果最好的中草药添加剂组方，旨在为肉鸡的健康养殖业提供参考。

1 材料与方法

1.1 中草药饲料添加剂提取物制备

根据单味中草药的抑菌效果和病原菌种类，结合中医药理论，配制出两组中草药饲料添加剂提取液。两组的中药组方分别是A组提取液组中药组方：按照原药材松针、仙人掌、辣蓼、白头翁、诃子、板蓝根、淡竹叶的重量配比24∶20∶12∶15∶12∶10∶10。B组提取液组中药组方：按照原药材党参、黄芪、当归、黄芩、栀子、淫羊藿、牛膝的重量配比22∶17.5∶10∶12.5∶10∶8∶8。

按照A组提取液和B组提取液的组方称取各原药材，首次水提加水量为药材重量的10倍，提取时间为2 h，过滤，制得水提液；再次加入适量的水进行二次水提，提取时间为1h，过滤，制得水提液；合并两次水提液，浓缩至相对密度1.18，即可得到A组提取液和B组提取液的原液，分别为试验A组药液和试验B组药液。

1.2 试验动物

试验动物为体重16～18 g的成年小白鼠50只。

1.3 试验仪器

牛津杯、培养皿、低速台式水平离心机、低温冰箱、电热恒温水浴箱、显微镜等。

1.4 抑菌实验方法

1.4.1 药敏性实验

将培养皿灭菌后分成6个扇区，将琼脂培养基和鲜血琼脂培养基倒入平板，在每个平皿内均匀加入0.5mL已制备的病原菌稀释菌液。将牛津杯内加入100μL药液按顺序放入6个扇区中央，37℃下培养24h，测量抑菌直径。

1.4.2 最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定

根据水提物的抑菌结果，采用10倍稀释法及2倍稀释法，测定最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。具体测定方法参考黄亚东2005年研究方法进行[14]。

1.5 毒理学试验方法

1.5.1 急性毒性试验（LD50的测定）

根据此前预试验结果，设10 000、20 000、40 000、80 000 mg·kg-14个剂量组和1个空白对照组，每组10只小白鼠，连续给药一周，每天观察小白鼠精神状态、食欲和饮水情况、中毒情况，并记录白鼠的死亡数目[15-16]。

1.5.2 蓄积毒性试验

设4个剂量组和1个对照组，按1 000、2 000、4 000、8 000 mg·kg-1的剂量进行灌胃给药，连续给药3周，在给药期间每天观察小白鼠精神状态、食欲和饮水情况、体重情况以及中毒情况，并记录白鼠的死亡数目。给药停止后观察1周内小白鼠的死亡情况[17]。

1.6 统计分析

试验结果采用SPSS10.0软件One Way ANOVA进行统计，并进行Duncan's多重比较，结果以“平均数±标准误”表示。

2 试验结果

2.1 抑菌试验效果

2.1.1 抑菌直径

中草药提取物对抑菌直径的影响见表1。

表1 中草药提取物对抑菌直径的影响 mm

由表1可知，两组提取液均有一定的抑菌作用，A组提取液组在大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌和副嗜血杆菌抑菌直径分别比B组提取液组高出3.85、2.4、0.3和2.7 mm，表明A组提取液的抑菌效果强于B组提取液。

2.1.2 最小抑菌浓度和最小杀菌浓度

最小抑菌浓度和最小杀菌浓度浓度见表2。

由表2可知，两组中药提取液的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度都较为理想，但是相比较而言，试验A组的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度比试验B组更为理想。

2.2 急性攻毒实验

试验小白鼠在急性攻毒后7 d，小白鼠的食欲、精神状态、饮水采食等情况正常，与对照组相比无异常。小白鼠在灌服中草药提取液80 000 mg· kg-1后，没有出现中毒死亡。按毒理学评价标准，无需测定半数致死量即LD50＞80 000 mg·kg-1。急毒性试验结果表明，本试验所设计的肉鸡中草药饲料添加剂是无毒的。

2.3 蓄积毒性实验

蓄积毒性实验见表3。

试验A组和试验B组在给药3周后，两组小白鼠的食欲、精神、饮水等均表现正常，也未出现死亡情况，停止给药一周后，小白鼠表现正常。由表3可知，给药3周后，试验A组与B组相比，在试验初始重、试验结束重和平均增重方面无明显差异。

表2 最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）浓度mg·ml-1

表3 蓄积毒性试验

3 讨论

3.1 中药的抑菌效果

唐艳等用金银花等中草药对大肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌进行抑菌效果试验，结果表明，中草药能对上述细菌有很好的抑菌效果，尤其能够破坏大肠埃希氏菌细胞结构，导致细胞内容物外泄，最终细胞死亡[18]。本试验结果表明，两组中草药饲料添加剂提取液的抑菌效果和杀菌效果都较好。

3.2 中药的毒理学效果

吴永魁等对抗疲劳中药复方制剂的安全性进行毒理学试验，结果表明，抗疲劳中药复方制剂属于无毒、无致突变性的中药制剂[19]。本试验结果表明，所设计的两组中草药饲料添加剂提取液属于无毒类中药制剂，可以安全使用。

4 结论

本试验所设计的提取液具有较好的抑菌杀菌作用，无毒副作用，在肉鸡饲养过程中可以作为中草药添加剂使用。

[1]葛洪伟,顾文松,陈文峰,等.中药复方制剂对绿壳蛋鸡生产性能的影响[J].中国家禽,2009,31（4）:24-26.

[2]顾文松,葛洪伟,陈文峰,等.中药复方提取物对新城疫病毒感染细胞能力的影响[J].中国家禽,2009,31（12）:64-65.

[3]张霞,孙爱东.松针提取物的研究进展[J].中国食物与营养, 2009（9）:23-25.

[4]刘晓庚,陈梅梅.我国松针的利用研究[J].粮食与饲料工业,2003（3）:25-29.

[5]陆海英,葛洪伟,唐燕飞,等.松针提取物对广西麻鸡产蛋性能的影响[J].饲料博览,2014（9）:45-47.

[6]王珏,李升和,王群,等.松针粉麦饭石复合添加剂对肉鸡免疫器官发育的影响[J].中国农学通报,2005,21（5）:63-67.

[7]熊春梅,郭爱伟,吴培福,等.添加松针粉对肉鸡屠宰性能、器官指数及肉品质的影响[J].江西农业大学学报,2011,33（5）: 949-954.

[8]李庆明,莫开菊.几种松针水提液抗氧化活性的比较研究[J].湖北民族学院学报:自然科学版,2008,26（2）:212-216.

[9]陈长武,昌友权,曲红光,等.松针提取物抗衰老氧化作用研究[J].食品科学,2005,26（9）:465-467.

[10]曾明,李守汉,郭层城,等.松针提取液抗疲劳作用研究[J].中国体育科技,2005,41（2）:117-119.

[11]郑晓珂,王小兰.松针提取物降血脂作用研究[J].中药药理与临床,2008,24（3）:81-82.

[12]王春梅,王海莉,李贺,等.松针提取物降糖作用的实验研究[J].北华大学学报:自然科学版,2007,8（2）:121-123.

[13]吴艳梅,顾文松,顾娟.猪用促生长类中草药饲料添加剂集锦[J].北方牧业,2011（5）:27.

[14]黄亚东,王仁雷,孔庆新.奶牛乳腺炎病原菌的中草药体外抑制试验[J].中国动物检疫,2005,33（11）:27-29.

[15]杨猛,王仁雷,黄亚东.中草药饲料添加剂对小白鼠的毒理作用[J].江苏农业科学,2010（2）:227-228.

[16]关立增,鞠玉琳.“壮阳促孕散”的急性毒性与蓄积毒性试验研究[J].黑龙江畜牧兽医,2005（2）:68.

[17]潘玉善,苑丽,胡功政,等.肉鸡大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶的检测与药敏分析[J].江苏农业科学,2010（2）:225-227.

[18]唐艳,张宾,霍健聪,等.12种中草药抑菌作用研究[J].浙江海洋学院学报（自然科学版）,2012,31（2）:147-152.

[19]吴永魁,李乾学,张祚新,等.抗疲劳中药复方制剂的安全性毒理学试验[J].吉林农业大学学报,2008,30（1）:93-97.

表2 泰乐欣对母猪繁殖性能和哺乳仔猪生长性能的影响

3 结论

泰乐欣能缓减妊娠母猪便秘的发生，提高哺乳仔猪的生长速度，提高仔猪的成活率和健康水平。

[参考文献]

[1]李超,王发强,李强,等.规模猪场母猪饲养管理技术要点[J].畜牧与饲料科学,2010,31（9）:106-108.

[2]程建云,周黎明.规模猪场能繁母猪的饲养管理技术[J].内蒙古农业科技,2012（3）:123.

[3]李勇.有效提高能繁母猪的饲养管理技术[J].山东畜牧兽医,2014（9）:22-23.

[4]刘晗璐,李光玉,孙伟丽.益生菌益生特性的研究进展[J].中国畜牧兽医,2010,37（2）:166-169.

[5]周洁,朱俊萍,诸欣平.益生菌对肠道疾病的作用机制及应用进展[J].中国新药杂志,2015,24（13）:1 484-1 487.

[6]徐廷生,雷学芹,董淑丽,等.益康XP酵母培养物在养殖业上的应用[J].河南科技大学学报,2003,23（1）:51-53.

[7]崔黎,郭雪娜,王肇悦,等.乳酸酵母菌的研究现状及其在饲料添加剂中的功能[J].食品与发酵工业,2009,35（5）:118-121.

[8]Alexopoulos C,Georgoulakis I E,Tzivara A,et al.Field evaluation of the effect of a probiotic-containing Bacillus licheniformis,and Bacillus subtilis,spores on the health status,performance,and carcass quality of grower and finisher pigs[J].Transboundary and Emerging Diseases,2004,51（6）:306-312.

[9]罗德军,廖巧英,高登进,等.益宝素对猪生长影响试验[J].福建畜牧兽医,2000,22（1）:32.

[10]张艳平,王福志,梁作之.母猪及仔猪饲喂“EMPI制剂”的效果观察[J].现代畜牧兽医,2001（4）:28-29.

[11]李波,杨利,易学武,等.日粮中添加天蚕素抗菌肽对母猪繁殖性能的影响[J].中国畜牧兽医,2011,38（1）:26-28.

[12]顾亚美,化世鹏,杨旭.益生菌制剂在养猪生产中应用效果分析[J].今日畜牧兽医,2007（10）:7-8.

Inhibition and Toxicity Test of Chinese Herb Feed Additive for Broiler

MO Yongkui1,JIANG Yuanjun2,3,WEI Tingjang2,WEI Jincheng3,SONG Mingjie4, MO Manzhen4,GE Hongwei2,3*

（1.Bureau of Animal Husbandry of Nandan County Hechi City,Nandan 547200,Guangxi China;
2.Xincheng County of Laibin City Runhua Animal Husbandry Co.,Ltd.,Laibin 546200,Guangxi China;
3.Guangxi Puda Animal Health Products Co.,Ltd.,Nanning 530004,Guangxi China;
4.College of Animal Science and Techlogy,Guangxi University Nanning 530004,Guangxi China）

This test was conducted to evaluate the effect of traditional Chinese medicine.The results showed that the antibacterial effect of traditional Chinese medicine feed additive was good with no toxic and side effects.Chinese medicine prescription designed in this experiment could be used as a traditional Chinese medicine additive in broiler breedingprocess.

Chinese medicine feed additive;inhibition test;toxicology test

S816.7；R286

A

1001-0084（2016）11-0027-04

2016-10-15

2016年来宾市科学研究与技术开发计划（来科攻162917）

莫勇魁（1974-），男，广西南丹人，兽医师，主要研究方向为动物疫病防控。

*通讯作者：E-mail:ghwxyl@163.com。