干片法与气相色谱法两种方法测试酒精结果比较及实际应用

华 星，荆成宝，刘 婕，唐麟成

（陕西省安康市中心医院检验科，陕西 安康 725000）

干片法与气相色谱法两种方法测试酒精结果比较及实际应用

华 星，荆成宝，刘 婕，唐麟成

（陕西省安康市中心医院检验科，陕西 安康 725000）

目的：探究对比干片法与气相色谱法两种方法对血液酒精的测试结果。用同一患者的血清，血浆，全血分别用两种方法检测得出的结果比较。方法：选择来我院体检的健康志愿者与疑似酒精中毒病患100例，碘伏消毒后同时抽取肝素钠抗凝管和普通生化真空管取得血液后得到全血，血浆和血清。分别采用干片法和气相色谱法对血清酒精浓度进行检测，并对比检测结果。结果：干片法与气相色谱法对血浆可检测的范围更大，通过统计对比发现，气相色谱法全血检测的均值显著高于干片法和气相色谱法中血浆、血清检测的结果。并且干片法回收率及用时均显著低于气相色谱法，差异均有统计学意义（均P＜0.05)。结论：干片法对血清酒精浓度的测试具有操作简便、环保等显著优势，结果的准确度相对较低。而气相色谱法操作结果准确度高，但检测成本高。两种检测方法对酒精的检测结果具备统一的同向性，且伴有一定的差异性，可以根据实际情况对检测方法进行选择。

酒精测试； 干片法； 气相色谱法； 变异系数； 回收率

本文通过对比干片法与气相色谱法两种方法对血液酒精的测试，得到一些结论，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源：选择来我院体检的健康志愿者与疑似酒精中毒病患100例，经碘酒对皮肤消毒后取得血液，并常规分离得到血清、血浆以及全血。

1.2 仪器与试剂：美国强生（VITROS）350干化学仪配套酒精检测干片试剂，以及北京北分天普仪器技术有限公司SP－2100A气相色谱仪。

1.3 检验方法：其中强生350只用血清和血浆，气相色谱法用同一患者的血清，血浆，全血三种标本类型检测。

1.3.1 干片法：①原理：配套的试剂是一种干燥的、具有多涂层的，并且在支撑基片上涂油分析成分的化学干片。这些干片带有染色剂、粘合剂、稳定剂、表面活性剂、蛋白质以及聚合物交叉连接剂，在使用过程中起到主要作用。当100μl的血清滴加在干片上，血清会迅速逐层分布。这时血清中的酒精就会被酒精脱氢酶氧化为乙醛，同时二磷酸砒啶核苷酸就会被分解为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。最后通过340mm的波长对整个化学过程进行检测，并根据二磷酸砒啶核苷酸在一个单位时间内减少量以及摩尔吸光系数对酒精浓度进行测定。②整个测试过程按照仪器以及实际说明说进行操作，一般用时5min。

1.3.2 气相色谱法：①原理：（原理太简单请详细说明）通过色谱图的分析，依据“物质的浓度（C）＝物质的比例系数（F）×色谱峰面积（A）”得到结果，则有Ci ＝Fi×Ai，Cs＝Fs×As。其中分别为组分i和内标物s的浓度，而是组分i和内标物s的比例系数，Ai和As是组分i和内标物s的气象色谱峰面积，通过两式转换得到Ci/Cs＝Fi/Fs×Ai/As，Fi/Fs＝Ci/Cs×As/Ai。Fi/ Fn称为相对校正因子，只需通过配制抑制浓度的组分i和内标物s，平衡后测定两峰面积值，就可以对相对校正因子进行计算。最后转换得到待测物浓度公式：Ci＝f×Ai/A×Cs。②色谱条件：柱温150℃、进样室以及检测器温度为190℃，载气（氮气）与氢气流速比为2：3。从柱头直接进样，进样量为1μl。③根据气相色谱原理对酒精浓度进行计算，每个样本进行两次得到结果。

1.4 统计学方法：采用SPSS13.0统计软件分析。计量资料以均数±标注差（±s）表示。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 干片法与气相色谱法测定酒精浓度的回收率：对所有参与者分离得到的血清进行混合，分别采用两种方法配制回收样品：其中基础样品为0.9Ml＋0.1ML回收样品①～⑤，加入的酒精浓度标准液为0.02Ml、0.04ML、0.06ML、0.08mL以及0.1ML，生理盐水浓度为0.08ML、0.06ML、0.04ML、0.02ML以及0ML。通过对每个样品2次测试求得平均值，对回收率进行计算。见表1、2。

表1 干片法测定酒精浓度的回收率（mg/dl，×10－2)

表2 气相色谱法检测酒精浓度的回收率（mg/dl，×10－2)

2.3 干片法与气相色谱法检测结果：干片法与气相色谱法对血浆可检测的范围更大，其中气相色谱法全血检测的均值稍高于干片法和气相色谱法中血浆、血清检测的结果。见表3。

干片法血清与血浆、气相色谱法血清与血浆之间检测结果没有差异，而干片法以及气相色谱法检测的血浆、血清结果与气相色谱法全血检测的结果存在显著差异。差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表4。

表3 干片法与气相色谱法检测结果

表4 两组检测均值对比（n，±s)

表4 两组检测均值对比（n，±s)

组别　　干片法血清和血浆气相色谱法血清与血浆干片法血清与气相色谱法血清气相色谱法血浆与干片法血浆T值　0.792　0.749　1.815　1.694 P值　0.429　0.455　0.071　0.09组别　　气相色谱法血清与全血气相色谱法血浆与全血干片法血清与气相色谱法全血干片法血浆与气相色谱法全血T值　25.532　25.014　26.770　26.034 P值　0.000　0.000　0.000　0.000

2.4 干片法与气相色谱法回收率、用时长短对比：干片法回收率及用时均显著低于气相色谱法，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表5。

表5 两组回收率、用时长短对比（n，±s)

表5 两组回收率、用时长短对比（n，±s)

组别　　例数　　回收率（％）　　用时（min）干片法　100　101.9±0.94　5.12±0.78气相色谱法　100　102.8±0.98　9.23±1.21 T值　　－　6.628　28.549 P值　　－　0.000　0.000

3 讨 论

随着我国生活水平逐渐升高，越来越多的人自驾出行。这也在很大程度上增加了酒驾引起的交通事故，给社会以及家庭造成严重的危害。酒精在现阶段是众多酒类饮品中的必备成分，许多人员在过量饮用此类饮品后容易出现酒精中毒[1]。酒精检测大于20mg/dl即为提示饮酒驾驶，大于80mg/dl即为醉酒驾驶。长期、过量饮用酒类饮品会导致酒精在体内聚集，从而对身体造成严重的伤害。尤其是酒精中毒后会引起高血压、严重肝脏疾病以及长期昏迷，并有可能造成死亡[2]。而酒驾者在高浓度的酒精作用下神经系统被麻痹，进而导致大脑反应迟钝以致肢体不受控制。饮酒与醉酒量刑不同，责任重大，需检测者试验过程慎重细心，每次测定均需带上已知浓度的酒精标准品与样本同时检测以保证结果的准确性。一般，对酒精浓度的检测方法以呼气酒精分析、化学发光法，最主要的参考方法是气相色谱法。因为气相色谱法全血检测相对其他检测方法，检测样本而言具有准确度高、稳定性强，用血量少，中间环节少，等显著优势，整个过程自动化程度相对更高，这样受外界因素影响程度更低，更有利于结果诊断。但是气相色谱法在使用过程中需要气相色谱仪，这就直接升高了检测成本。而且检测过程较长，对于快速检测是不利的。

本文通过对比干片法与气相色谱法对血液酒精浓度的测试，结果发现：干片法与气相色谱法对血浆可检测的范围更大，通过统计对比发现，气相色谱法全血检测的均值显著高于干片法和气相色谱法中血浆、血清检测的结果。并且干片法回收率及用时均显著低于气相色谱法。符合李芳等人的报道[3]。气相色谱法作为最标准的检测方法，得到的结果准确度更高、检测范围更广。但是在整个过程中对样品的处理以及相关色谱条件的要求上均存在较大的难度，不能再普通环境或水平下实施操作。尤其是在一些设备不健全的单位无法开展检测，这样的样品制备以及检测过程都加长了时间，这在很大程度上限制了气相色谱法的应用范围。干片法在使用过程中不会对待测物质产生干扰现象，并且对相对有干扰作用的物质选择性去除。整个反应过程所用时间短，自动加样。最主要每个干片仅使用一次，避免样本及干片间的结果干扰。整个操作过程耗时短、操作简单，干片的使用同时具有显著的环保意识。目前对酒精浓度的测试主要是在酒驾中的测试，有效鉴定浓度范围在20～80mg/dl间。因此，在能保证检测力度的情况下以节约成本为主。除此之外，气相色谱法肝素抗凝后全血检测，应用于公安机关酒驾定性重要依据，因其检测一次需要1mL样本，一般要保证两次的检测量还有样本剩余保存量，大约需3～4mL血量。如果用血清或是血浆那就需要更多的血量才能分离出来。而且每次采血要求采双管，检测用一份，公安交警人员带走一份，这是气相色谱法用全血样本检测的一个最大好处，这样可以最大程度节省用血量。

[1]Giasov ZA，MakhsumkhonovKA.Specific features of suicides committed in a state of alcoholic intoxication[J].Sud Med Ekspert，2015，58（3)：17～20.

[2]曹一显，李良平.非酒精性脂肪性肝炎与内皮功能异常和动脉粥样硬化的关系[J].中华肝脏病杂志，2014，22（3)：205～208.

[3]邓红莲，徐小作.利用气相色谱法检测食品中反式脂肪酸含量[J].临床和实验医学杂志，2009，8（7)：25～27.

1006－6233（2016)10－1745－03

A【doi】10.3969/j.issn.1006－6233.2016.10.071

陕西省科技攻关项目，（编号：2009k13－G6（7））