直肠粘膜5－羟色胺表达水平与直肠癌前切除患者生活质量及前切除综合征发病的关系

周 昱

（江苏省无锡市第二人民医院普外科，江苏 无锡 214002）

直肠粘膜5－羟色胺表达水平与直肠癌前切除患者生活质量及前切除综合征发病的关系

周 昱

（江苏省无锡市第二人民医院普外科，江苏 无锡 214002）

目的：研究直肠粘膜5－羟色胺表达水平与直肠癌前切除患者生活质量及前切除综合征发病的关系。方法：选择2012年5月至2105年10月期间确诊为直肠癌并接受Dixon手术的138例患者进行研究，采集直肠黏膜并检测5－HT的表达量，随访患者发生前切除综合征（ARS)的情况，评估患者的生活质量以及排便功能。结果：ARS患者直肠黏膜中5－HT的染色等级显著低于非ARS患者，mRNA含量显著低于非ARS患者；不同5－HT表达量ARS患者的GIQLI评分、SF－36量表评分、WCS评分以及WIS评分有差异；5－HT的表达量越高，ARS患者的GIQLI评分以及SF－36量表中的生理功能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康、健康变化评分越高，WCS评分以及WIS评分越低。结论：直肠粘膜5－羟色胺表达水平降低与前切除综合征的发生密切相关，5－羟色胺表达水平降低会加重ARS患者的排便功能的异常程度、降低生活质量。

直肠癌； 前切除综合征； 5－羟色胺； 生活质量

本文分析了直肠粘膜5－羟色胺表达水平与直肠癌前切除患者生活质量及前切除综合征发病的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象：选择2012年5月至2105年10月期间在我院确诊为直肠癌并接受Dixon手术的138例患者进行研究，所有患者均经病理学活检确诊为直肠癌、TNMI－Ⅲ期，符合手术指征。排除因语言沟通障碍而无法详细描述自身症状的患者、发生术后吻合口瘘的患者。随访换术后前切除综合征（ARS）的发生情况，共101例患者发生ARS、37例患者未发生ARS。ARS患者中男性78例、女性23例，年龄59.6±7.2岁；非ARS患者中男性28例、女性9例，年龄60.2±6.6岁。所有入组患者均取得本人及家属的知情同意，研究获得医院伦理委员会的批准。

1.2 研究方法

1.2.1 直肠黏膜内5－HT的表达量：取手术切除后的标本，于肿瘤边缘剪取正常的黏膜组织并分为两份，一份用于4％多聚甲醛固定、另一份在液氮中迅速冷冻并保存在－80℃冰箱。取多聚甲醛固定的直肠黏膜组织，石蜡包埋后制作厚度为5μm的切片，采用福建迈新的免疫组织化学试剂盒进行试验，对5－HT进行染色并在高倍视野（×400）进行观察，染色结果分为“－”、“＋”、“＋＋”、“＋＋＋”四个等级。取液氮冷冻后的组织，采用RNA提取试剂盒抽提组织中的总RNA，采用反转录试剂盒将组织中的总RNA反转录为cDNA，而后取cDNA标本并采用荧光定量PCR试剂盒扩增5 －HT和β－actin，根据扩增曲线计算5－HT mRNA含量的相对值。

1.2.2 调查问卷评估：术后3个月时，采用胃肠道生活质量评分（gastrointestinal quality of life index，GIQLI）和SF－36健康问卷（36－item short form health survey）评价两组患者的术后生活质量，得分越高、生活质量越高；SF－36健康问卷包括生理功能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康、健康变化。采用Wexner便秘评分（WCS）和Wexner失禁评分（WIS）评价两组患者的排便功能异常程度，得分越高、排便功能异常程度越严重。

1.3 统计学方法：采用SPSS20.0统计软件进行分析，符合正态分布的计量资料进行t检验，不符合正态分布的计量资料以及等级资料均进行非参数秩和检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 直肠黏膜中5－HT的表达量：直肠黏膜中5－HT表达量的免疫组化染色结果分析如下：ARS患者直肠黏膜中5－HT的染色等级显著低于非ARS患者；直肠黏膜中5－HT表达量的荧光定量PCR结果分析如下：ARS患者直肠黏膜中5－HT的mRNA含量显著低于非ARS患者。两组患者5－HT染色等级以及mRNA含量对比，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 直肠黏膜中5－HT的表达量n（％)

2.2 不同5－HT表达量ARS患者的生活质量：不同5 －HT表达量ARS患者的GIQLI评分以及SF－36量表中的生理功能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康、健康变化评分有差异；5－HT的表达量越高，ARS患者的GIQLI评分以及SF－36量表中的生理功能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康、健康变化评分越高。

表2 不同5－HT表达量ARS患者的GIQLI评分以及SF－36量表评分

2.3 不同5－HT表达量ARS患者的WCS评分以及WIS评分：不同5－HT表达量ARS患者的WCS评分以及WIS评分有差异；5－HT的表达量越高，ARS患者的WCS评分以及WIS评分越低。

表3 不同5－HT表达量ARS患者的WCS评分以及WIS评分

3 讨 论

ARS是直肠癌术后常见的并发症，患者的主要表现是不同程度的排便功能异常，包括排便频率增加、肛门坠胀、排便失禁以及粪便排出困难等，会对患者的术后生活造成极大影响[1]。近年来的研究认识到，肠黏膜内信号传导过程与肠动力的调节密切相关，ARS患者所表现出的排便功能异常可能与肠黏膜内信号传导过程异常有关。肠黏膜是体内5－HT最主要的合成场所，各种物理因素和化学因素刺激均能够增加5－HT的合成并调节肠道功能[2]。

为了明确直肠黏膜5－羟色胺表达水平与直肠癌前切除患者生活质量及前切除综合征发病的关系，我们首先分析了前切除综合征患者和非前切除综合征患者直肠黏膜中5－HT的表达量。由免疫组化对直肠黏膜组织中5－HT染色结果的分析可知：ARS患者直肠黏膜中5－HT的染色等级显著低于非ARS患者；由荧光定量PCR对直肠黏膜组织中5－HT mRNA含量检测的分析可知：ARS患者直肠黏膜中5－HT的mRNA含量显著低于非ARS患者。这就说明直肠黏膜组织红5－HT的低表达与ARS的发生密切相关，ARS患者新建直肠的粪便储存功能明显减弱，肠黏膜细胞受到的物理刺激减少并抑制5－HT的释放；同时，5－HT分泌的减少能够也是机体反馈性增加排便次数的自我调节机制[3]。

ARS患者最突出的临床表现是排便功能异常，WCS量表以及WIS量表是临床上评估排便功能的常用方法，得分越高、排便功能异常程度越严重。为了明确直肠黏膜中5－HT表达量与ARS患者排便功能异常程度的关系，我们分析了不同5－HT表达量ARS患者的WCS评分以及WIS评分并发现：5－HT的表达量越高，ARS患者的WCS评分以及WIS评分越低。这就说明直肠黏膜中5－HT的表达量与ARS患者的排便功能密切相关，5－HT的表达量越高、排便功能异常的程度越弱，由此也提示5－HT对直肠癌患者术后的肠道功能具有调节作用。

直肠癌术后发生ARS会引起多种排便功能异常有关的临床症状，进而影响术后的正常生活。已有研究报道，ARS患者存在不同程度的生活质量受损，表现为术后GIQLI评分以及SF－36量表评分显著降低；随着术后时间的延长，上述生活质量评分逐步提升，生活质量得到提高。为了明确5－HT表达量与ARS患者生活质量的关系，我们分析了不同5－HT表达量ARS患者的生活质量评分，结果显示：5－HT的表达量越高，ARS患者的GIQLI评分以及SF－36量表中的生理功能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康、健康变化评分越高。这就说明直肠黏膜中5－HT的表达量不仅与ARS患者的排便功能密切相关，还与患者的生活质量有关；其表达量越高，患者的排便功能越理想，生活质量也越高。

[1]王木勇，张森.低位直肠癌前切除综合征[J].现代肿瘤医学，2014，22（4)：948～952.

[2]俞媛洁，陈继红.5－羟色胺与胃肠动力障碍的关系[J].医学综述，2016，22（4)：636～639.

[3]王智，徐瑞鑫，李丽娟.慢性束缚应激对大鼠行为学和杏仁核5－HT、5－HIAA含量的影响及加味甘麦大枣汤的干预[J].中医药学报，2014，42（4)：79～82.

江苏省自然科学基金项目，（编号：BHK2008256）

1006－6233（2016)10－1676－04

A【doi】10.3969/j.issn.1006－6233.2016.10.038