高致病型蓝耳病快速检测技术的应用

徐建平

（新疆生产建设兵团库尔勒第二师畜牧兽医工作站841023）

高致病型蓝耳病快速检测技术的应用

徐建平

（新疆生产建设兵团库尔勒第二师畜牧兽医工作站841023）

1 高致病型蓝耳病快速检测卡简介

1.1 检测卡的原理

检测卡利用抗体快速金标检测卡法 （简称金标法）检测抗体效价。金标法是在酶联免疫吸附法基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是以微孔滤膜为载体，包被已知抗原，加入待检标本后，经滤膜的毛细管作用，标本中抗体与胶体金结合的抗原相结合，再通过与膜上包被的抗原结合显色而达到检测目的。金标法的试剂为试纸条形式，即为金标试纸条。判定标准：蓝耳抗体阳性≥1：40；蓝耳抗体阴性＜1：40。

1.2 特点

操作简便、特异性好、快捷迅速、易于判断。

1.3 检测卡使用说明

（1）检测卡在夏天、冬天都可使用，但为加快检测速度，建议使用4000转的简易离心机快速析出血清，使整个检测过程在5～10min完成。

（2）说明：只用于防疫的监督检查、检疫的监督检查，免疫自查，不作为免疫抗体结果的最终结论。

2 蓝耳病检测卡检测母源抗体

（1）试剂：所用疫苗：猪蓝耳疫苗 （NVDC-JXA1株）吉林和元生物工程股份有限公司生产，批号：20131213；疫苗使用方法蓝耳1～2头份。

（2）采用检测卡 （金标法）在农牧团场，选取免疫效价合格的母猪所产的仔猪为试验对象。随机抽检在21日龄断奶的6窝仔猪，每窝仔猪抽检采血4～6头，共31头仔猪。以刚出生没有吃上初乳为0日龄，第2天为1日龄，以此类推。可以看出幼畜在未吃初乳前，体内基本没有抗体，吃过初乳后，抗体迅速上升，随着日龄的增加，抗体效价呈明显的线性下降之势。

（3）仔猪蓝耳母源抗体合格率，在0日龄为零，在25日龄达到最高，到40日龄是降到合格以下，所以在40日龄就可以作为猪蓝耳首免日龄。母源抗体检测结果见图1。

3 蓝耳病检测卡检测免疫效价

（1）在农牧团场猪场，采用检测卡对仔猪进行蓝耳的免疫，采用检测卡查看首免、二免、三免测定抗体效价。

（2）单独注射蓝耳疫苗，每次注射间隔15d，检测52头仔猪，免疫15d后采血样。免疫合格率，在首免时效果不理想，二免效果较好，三免最好。但采用spss软件分析第2次和第3次差异也不显著，免疫效价检测结果见图2。

（3）结果。注射一次疫苗效果较差，免疫合格只在20～30%左右。2次免疫效果可以达到合格水平，3次免疫比2次效果好，但差异不显著。故一种疫苗至少免疫2次。

4 讨论

检测卡具有使用简单、快捷、准确、易于操作、夏天、冬天都可使用的特性，且在动物防疫工作中的免疫自查、检疫、监督工作上都可使用，其应用前景广阔，值得推广应用。

图1 母源抗体检测结果

图2 免疫效价检测结果

新疆建设兵团第二师科技项目 （2013NYGG1）。