高效液相法测定薏苡中各部位薏苡素的含量

黄克俊，裴学海，蒋让勇，洪 亮，陈治明*

（贵州师范大学化学与材料科学学院，贵州贵阳 550001）

高效液相法测定薏苡中各部位薏苡素的含量

黄克俊，裴学海，蒋让勇，洪 亮，陈治明*

（贵州师范大学化学与材料科学学院，贵州贵阳 550001）

使用HPLC法测定薏苡中各部位薏苡素的含量，测定部位分别是根、茎、叶、种。在检测中所用的色谱柱型号是C18phenomenex250×4.60mm 5 micron，高效液相色谱仪型号为LC2000；流动相是乙腈：0.1%磷酸水溶液（25∶75），流速设为0.743/min；色谱柱温度为30℃，检测器波长为232nm。测定结果显示，各部位薏苡素含量从大到小的依次是根＞叶＞种＞茎，其中根的含量为46mg/100g，叶的含量为21mg/100g，种的含量为0.8mg/100g，茎的含量约为2mg/100g。因此，建议多以根、叶作为药用部位。

薏苡；薏苡素；根；径；叶；种

在医学上，薏苡素是具有重要意义的药物之一。薏苡为禾本科植物，亦称“薏米”，味甘、淡、性微寒。薏苡在禾本科植物中首屈一指，被誉为“世界禾本科植物之王”［1］。薏苡是食药两用的物质，现代中西医临床试验结果表明，薏苡中有效成分是薏苡素，亦称为薏苡内脂。薏苡素对肌肉具有收缩作用［2］，对中枢神经系统具有镇静、抑制、镇痛及降温与解热作用。在人们追求美的背景下，充分发挥薏苡的美容功效。最新研究发现［6］，薏苡仁中的薏苡仁酯（CXL）被认为是抗癌的有效成分，CXL最大功效是抑制癌细胞的异常性繁殖，并通过新陈代谢来改善体质。20世纪中期［7］，U-kita（日本）等分离出薏苡仁酯，这是世界上第一次从薏苡仁中提取得到薏苡素，不久之后，便使用人工合成薏苡素，减少对薏苡植株的依赖，通过进一步研究，将薏苡素作为薏苡中抗击癌细胞的主要成分。Hu［8］运用超临界流体萃取方法，在薏米中提取出薏苡仁酯以及薏米油，提取效率相对于常用化学方法，比较可靠科学。国内对薏苡研究用的方法主要有分光光度法、高效液相色谱法等，如李厚聪等［3］，张明昶等［4］，吴英梅等［5］都用的是高效液相色谱法，但是他们都用的索氏提取法，加热时间长，有机溶剂多，样品前处理复杂，本实验经过探索用浸泡超声法进行前处理，不仅缩短时间也不浪费溶剂，操作简单且实验效果显著。

1 实验方法

1.1 仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪LC-2000（日本）、LC-2050溶剂箱、LC-2030紫外可见检测器、LC-输液泵，色谱柱为C18phenomenex250×4.60mm 5 micron，以及烘箱、粉碎机、超声仪、有机膜、天平（感量为0.000 1g）。

试剂：超纯水、甲醇为色谱纯、丙酮、0.1%磷酸、乙腈以上试剂均为分析纯。

1.2 标准溶液的配制

标样的配备：称量大约1g薏苡素于250mL三角瓶中。加入25mL甲醇，浸泡过夜（24h以上），再超声45min，然后用有机膜过滤，最后取滤液于20mL试管中上机备用。

1.3 仪器条件

流动相∶乙腈∶0.1%磷酸水溶液=25∶75，流速为0.7mL/ min。色谱柱温度为30℃，每次取样为20μL，检测波长为232nm。

1.4 实验方法

1.4.1 样品的制备

称取已混合均匀的粉末试样约1g（精确到0.1mg）于250mL洁净三角瓶中，将三角瓶一一贴标签，再往其中加入25mL甲醇使其充分混合均匀。（注：薏苡素的试样需要同时做回收率实验）。

1.4.2 待测液的制备

将装有处理的试样溶液的三角瓶放入冰箱内保存，使之过夜至次日，且必须保证甲醇浸泡24h以上；再将其放置超声仪中，频率调至100Hz，时间调至45min，使其在超声过程中充分混合、充分提取薏苡素。然后再将试样取出，用有机膜进行抽滤，当然在抽滤之前要充分震荡，使得试样混合更充分，取一定量滤液于20mL试管中，同样对试管进行贴相应标签。将装有试样的试管放入冰箱，且调节温度至零下20℃存放。

1.5 标准曲线的制备

1.5.1 薏苡素标准曲线的绘制

用甲醇处理的标样样品，使薏苡素浓度为 0.012mg/mL。高效液相色谱法进行测定，进样量为20μL，绘制谱图，见图1、图2。

图1 薏苡素对照图

1.5.2 线性关系

精密量取1、2、4、6、8、10、12、15、20μL薏苡素对照品溶液，进样并计算出峰面积。以对照品溶液进样量为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，计算得线性回归方程为：A=63 871.015 36+27 458.038 9X（r=0.999 7，n=3）。

The Content of Each Part in Coix Coix by HPLC

Huang Ke-jun，Pei Xue-hai，Jiang Rang-yong，Hong Liang，Chen Zhi-ming

The determination of Coixol in each part that Coix lacryma-jobi L.var.mayuen Stapf by HPLC.The part of determination are root、stem、leaf and seed.The model of chromatographic column si C18phenomenex250×4.60mm 5 micron in detection，The model of high performance liquid chromatography is LC2000；Mobile phase is acetonitrile of 25%、water of 75% and in the water the phosphate solution of 0.1%，Flow rate is 0.7mL/min；The temperature of the chromatographic column is 30℃，The wave length of detector is 232nm.The consequence of determination show the content of Coixol is root＞leaf＞seed≈stem.and the content of root is 46mg/100g，the content of leaf is 21mg/100g，the content of seed is 0.8mg/100g，the content of stem is 2mg/100g.so I suggest root and leaf serve as medicine of Coix lacryma-jobi L.var.mayuen Stapf.

coix lacryma-jobi L.var.mayuen Stapf；Coixol；root；leaf；seed；stem

O657.72；R284

A

1003-6490（2016）07-0049-02

2016-06-25

受贵州师范大学研究生创新基金资助（NO：研创201517），贵州省自然科学基金（黔科合J字［2009］2021）。

黄克俊（1989—），男，贵州遵义人，硕士，主要研究方向为有机合成。

陈治明（czm000219@163.com）。