比较两种途径釆血对比色法测定水杨酸钠血浆半衰期的影响

田瑞敏　杨梅　廖荣琼　贾惠荔　曾頔　张语　谭茜　孔永　廖桃红　陈建华Δ

(1.川北医学院药学院药理教研室，四川 南充　637100；2.川北医学院临床医学系，四川 南充　637100)



比较两种途径釆血对比色法测定水杨酸钠血浆半衰期的影响

田瑞敏1杨梅2廖荣琼2贾惠荔2曾頔2张语2谭茜2孔永2廖桃红2陈建华1Δ

(1.川北医学院药学院药理教研室，四川 南充637100；2.川北医学院临床医学系，四川 南充637100)

目的：观察心脏釆血和颈总动脉釆血对比色法测定家兔水杨酸钠血浆半衰期的影响。方法：将12只家兔(雌雄不限)分为心脏釆血组和颈总动脉釆血组，经耳缘静脉注射10%水杨酸钠溶液(2 ml·kg-1)，分别于给药前、给药后10 min和40 min釆血，处理血样，分光光度计在510 nm下测定血浆水杨酸的光密度值，计算其半衰期。结果：心脏釆血组家兔10%水杨酸钠溶液的半衰期比颈总动脉釆血组明显延长(P<0.05)，颈总动脉釆血组家兔的实验数据较心脏釆血组更为稳定。结论：颈总动脉釆血法较心脏釆血法对水杨酸钠半衰期的测定更为稳定。

水杨酸钠；半衰期；心脏；颈总动脉；比色法

药物血浆半衰期(或称消除半衰期，Elimination half-life time，t1/2)是指血浆药物浓度下降一半所需时间。它是重要的药动学参数之一，可表明药物在机体代谢，排泄的规律。“水杨酸钠血浆半衰期的测定”实验属于药理学实验或机能学实验当中的一个重要内容[1]，然而关于其半衰期的测定结果各个医学院实验室相差较大。在该实验操作中，多次、准确、及时的采取足量的动物血液是保证实验成功的重要因素。本文分别采用了心脏釆血和颈总动脉釆血两种途径釆血，在检测方法上采用了比色法，观察其对水杨酸钠半衰期测定结果的影响，为以后该实验方法的改进提供一定依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物

健康家兔12只(2.5 kg左右，由川北医学院实验中心提供)。

1.1.2实验器材

V1200分光光度计(上海美普达仪器有限公司)，离心机(CENTRIFUGE，MODEL 0406-1)，哺乳动物手术器械，5 ml注射器及针头，动脉插管、动脉夹、三通管、纱布、兔台由川北医学院机能实验中心提供。

1.1.3药物试剂

10%水杨酸钠溶液(成都市科龙化工试剂厂生产)，10%三氯乙酸溶液(成都市科龙化工试剂厂生产)，10%三氯化铁溶液(成都市科龙化工试剂厂生产)，1%戊巴比妥钠(默克公司生产)，1%肝素钠溶液(成都市科龙化工试剂厂生产)和蒸馏水，由川北医学院机能实验中心提供。

1.2方法

1.2.1分组与血样采集

将家兔随机数字单盲法分为两组，每组6只：心脏釆血组和颈总动脉釆血组；分别将两组家兔用1%戊巴比妥钠溶液(3 ml·kg-1)全身麻醉，颈部正中皮肤做5-7 cm纵行切口；将心脏釆血组的家兔用1%肝素钠溶液(1 ml·kg-1)全身肝素化；将颈总动脉釆血组的家兔的左侧颈总动脉分离出来，用1%肝素钠溶液(1 ml·kg-1)全身肝素化，然后在颈总动脉上插管；分别自心脏和颈总动脉取血2 ml，置于加了7 ml 10%三氯乙酸的离心管A中；耳缘静脉注射10%水杨酸钠溶液后，分别自心脏和颈总动脉于10 min和40 min各取血2 ml置于加了7 ml 10%三氯乙酸的离心管B和C中备用。

1.2.2处理血样

将各离心管中的血液与三氯乙酸摇匀，以2000 r/min的转速离心5 min。准确吸取离心后的上清液各6 ml 分别置入编号的试管中，每管加10%三氯化铁溶液0.5 ml，摇匀，显色。

1.2.3样品测定

以A管为对照，用分光光度计在510 nm波长处分别测定B管和C管的光密度值D1和D2。

1.2.4计算半衰期

根据公式计算水杨酸钠的血浆半衰期值t1/2=0.301t/(lgD1-lgD2)

1.3统计学处理

2　结果

心脏和颈总动脉两种途径釆血对水杨酸钠半衰期测定结果的影响如表1所示，心脏采血组半衰期较颈总动脉釆血组明显延长(P=0.001)，可见，颈总动脉釆血组的半衰期测定数据较心脏釆血组更为稳定。

表1　心脏釆血和颈总动脉釆血对药物半衰期的比较±SD，n=6)

注：与颈总动脉釆血组相比，*P<0.05。

3　讨论

水杨酸钠属于非甾体类抗炎药中的水杨酸类，能抑制前列腺素的生物合成，具有解热、镇痛和抗炎抗风湿作用，其中抗炎抗风湿作用较强，曾用于风湿热和风湿性关节炎的治疗，因其刺激性大，不良反应多，现临床使用少见。而水杨酸钠在药理学实验中却是一个重要的药物，“水杨酸钠半衰期的测定”实验是药理学中研究药物药动学的一个重要实验。目前该实验半衰期计算所需测定参数为不同时间点血液中的水杨酸钠的光密度值，多采用比色法[1-4]，但有关半衰期的测定结果各实验室相差较大[2]。

影响实验结果的一个重要因素是需要在不同时间点采集定量的血样。血样的采集目前多采用心脏釆血法[1]，也有改良使用兔耳中央动脉取血法[5]，但这两种方法取血对学生的技术要求较高，很难准时取出足量血，造成测定误差。为了缩小由于取血不及时所致误差，张团笑等[4]采用颈总动脉和颈外静脉插管釆血法，测定水杨酸钠的半衰期。

本文中我们分别采取颈总动脉釆血法和心脏釆血法两种途径取血，比色法测定水杨酸钠半衰期，为了避免由于手术和麻醉所致误差，两组采用均在全麻下进行，观察到心脏釆血组半衰期比颈总动脉釆血组明显延长，颈总动脉釆血组的实验数据较心脏釆血组更为稳定，该实验结果提示颈总动脉采血时间容易控制，采血量充足，可多次采血，能满足实验要求，缩小实验误差。但是相比于心脏采血法，颈总动脉釆血操作较为复杂，对学生的动手能力要求较高，该法可以在学生实验中探索应用。

1郑茜. 医学机能学实验[M]. 北京: 科学出版社, 2013, 113-114.

2张慧芝,李丽芬,李进霞,等. 水杨酸钠血浆半衰期的测定及其意义[J]. 大同医学专科学校学报, 2004, 11(2): 1-2.

3李姝,李荣,吴红. 改进水杨酸钠血浆T1/2测定方法提高实验成功率[J]. 牡丹江医学院学报, 2009, 30(5): 90-91.

4张团笑,买文丽,牛彩琴,等. 麻醉和手术对实验动物血浆药物半衰期的影响[J]. 四川生理科学杂志, 2009, 31(1): 19-20.

5范平,陈蓉春. 水杨酸钠血浆半衰期测定方法的改进[J]. 川北医学院学报, 1995, 10(1): 38-39.

Effect of blood samples collected from two ways on the half-life of plasma sodium salicylic by colorimetric method

Tian Rui-min1,Yang Mei2, Liao Rong-qiong2, Jia Hui-li2, Zeng Di2,Zhang Yu2, Tan Xi2, Kong Yong2, Liao Tao-hong2, Chen Jian-hua1△

(1.Department of Pharmacology，North Sichuan Medical College，Sichuan Nanchong 637100;2.Department of Clinical Medicine, North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637100)

Objective：To observe the effect of blood samples collected from heart and common carotid artery on the half-life of plasma sodium salicylic in rabbits by colorimetric method. Methods: Twelve rabbitsof either genderwere divided into two groups according to blood collection method: group A: the blood samples were collected from the heart and groupB: the blood samples were collectedfrom the common carotid artery.All rabbits were injected 10% sodium salicylic solution 2 (ml·kg-1)through the ear vein. Blood samples were collected before the administration, 10 and 40 min after the administration respectively from heart and common carotid artery to measure the half-life of plasma salicylic sodium by colorimetric method. Results: The half-life in the groups whose blood samples were collected from heart were significantly longer than those in another groups (P<0.05). The experimental data in the groups whose blood samples were collected from common carotid artery were more stable. Conclusions: The blood samples from common carotid artery are more stable than those from heart on the half-life of plasma sodium salicylic.

Sodium Salicylic; Half-life; Heart; Common carotid artery; Colorimetric method

田瑞敏，女，讲师，主要从事药理学研究，Email：truimin@126.com。

陈建华，女，职称，主要从事药理学研究，Email：623551832@qq.com。

2016-4-28)