银丹心脑通软胶囊中大蒜成分的鉴别方法

汪凯莎　李媛媛

(1.安顺学院农学院，贵州　安顺 561000)(2.安顺市食品药品检验所，贵州　安顺 561000)



银丹心脑通软胶囊中大蒜成分的鉴别方法

汪凯莎1李媛媛2

(1.安顺学院农学院，贵州安顺 561000)(2.安顺市食品药品检验所，贵州安顺 561000)

银丹心脑通软胶囊作为在治疗冠心病、脑梗死后遗症、心绞痛等方面得到广泛应用的一种药物，其所含大蒜成分的鉴别方法鲜有报道。论文运用气相色谱法和薄层色谱法分别对银丹心脑通软胶囊中大蒜成分进行了分析比较，结果表明：气相色谱法分离效果好，灵敏度高，但检测成本昂贵；薄层色谱法斑点清晰，无干扰，且检测成本低廉。薄层色谱法简单可行，检测效果好，可作为银丹心脑通软胶囊中大蒜成分的有效鉴别方法供选择。

银丹心脑通软胶囊；大蒜；气象色谱；薄层色谱；定性鉴别

银丹心脑通软胶囊由银杏叶、丹参、大蒜、三七等八味药制成，近年来其在心肌缺血再灌注损伤的保护，在治疗冠心病、脑梗死后遗症、心绞痛等治疗方面得到广泛运用。其制备工艺中大蒜成分的制备是将大蒜提取大蒜油后，与其它原材料混合均匀，压制，即得[1]。

大蒜成分的制备因方法不相同而使得所得组分有差异，但大蒜素均为其主要成分。大蒜素并非单一物质，其由二十多种有机化合物组成，主要有大蒜新素、大蒜辣素等[2]。本文分别采用气相色谱法和薄层色谱法分别对银丹心脑通软胶囊中大蒜成分进行了分析比较并得出了相应结论。

1仪器与试药

1.1仪器

(1)岛津2010-PLUS气相色谱仪，AOC-5000自动进样装置；FID检测器；GC-solution色谱工作站；

(2)TCQ-250超声波清洗器(北京医疗设备二厂)；

(3)电子分析天平 (FA-2004，上海上平仪器公司)；

(4)超声波振荡仪(SK-7200H，上海科导超声仪器有限公司)；

(5)预制硅胶G板(青岛海洋化工厂分厂)

1.2试药与样品

乙酸乙酯(分析纯)；正己烷(分析纯)； 乙醚(分析纯)；

石油醚(60～90℃)(分析纯)；大孔树脂D101(上海希格玛技术有限公司)；大蒜油对照品(由贵州百灵制药有限公司提供，供鉴别使用)，水杨酸甲酯内标物(天津市光明精细化工研究所，批号为：20111122)。样品和阴性样品均由贵州百灵制药有限公司提供。

2气象色谱方法与结果

对银丹心脑通软胶囊中的大蒜成分进行气相色谱鉴别方法研究。《中国药典》2015年版一部收载了大蒜成分的鉴别方法，笔者参考《中国药典》2015年版一部大蒜的鉴别及相关文献资料，对本品中的大蒜成分进行了鉴别，并对鉴别的方法进行了研究。

2.1色谱条件 色谱柱：岛津Rtx-Wax(30meter ，0.32mmID, 0.25um df);柱温：140℃；进样口温度：160℃；检测器温度：180℃；分流比：50:1；理论板数按大蒜成分峰计算应不低于4000.1

2.2系统适用性试验 取大蒜对照品、水杨酸甲酯内标物、供试品和缺大蒜油的阴性样品，用乙酸乙酯配制成相应的溶液进行试验。记录色谱图，从图中可见大蒜成分，水杨酸甲酯的保留时间分别为6.084min，7.608min。阴性空白无干扰，大蒜成分和水杨酸甲酯与相邻峰分离完全(分离度大于1.5)，即本试验条件下大蒜成分、水杨酸甲酯与其他组分分离完全。对照品色谱中大蒜成分、水杨酸甲酯峰的理论板数分别为22545和28453，供试品色谱中大蒜成分、水杨酸甲酯峰的理论板数分别为19213和24622，故暂定理论板数以大蒜成分峰计算为不低于4000。

2.3标准溶液的制备精密称取水杨酸甲酯内标物0.7113g，置500ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，制得内标物溶液(1.4226mg/ml)。

再准确称取大蒜油对照品0.05123g(贵州百灵制药有限公司提供)于25ml量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，制得大蒜油对照品贮备液(1.7469mg/ml)。

2.4样品溶液的制备：取本品装量差异项下的内容物，混匀，取约1.0g，准确称量后置于具塞锥形瓶中，再加入乙酸乙酯内标液20ml，密塞，称重，超声20分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补重，摇匀，过滤，取续滤液用于大蒜成分的鉴别。

2.5实验结果供试品溶液主峰的分离度好，供试品溶液主峰的保留时间与大蒜油对照药材溶液主峰的保留时间一致，阴性无干扰。结果见图1至图3。

图1　 蒜油(乙酸乙酯)总离子流图

图2　大蒜油阴性总离子流图(乙酸乙酯)

图3　银丹心脑通软胶囊中大蒜总离子流图

3薄层色谱方法与结果

3.1供试品溶液的制备：取银丹心脑通软胶囊内容物1g，用石油醚(60～90℃) 20ml时时振摇提取20分钟，过滤取滤液，加在已处理好的大孔吸附树脂D101上，用10ml 石油醚(60～90℃)洗脱，收集相应的石油醚洗脱液，蒸干，残渣加乙酸乙酯2ml溶解，作为供试品溶液。

3.2大蒜油对照品溶液的制备：另取大蒜油对照品0.1g，加乙酸乙酯100ml制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.3检查法：照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，取上述两种溶液3 ul，点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷为展开剂，展开，取出，晾干，并置碘缸中熏至斑点显色，取出，在日光下检视。供试品在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

图4　大孔吸附树脂D101除杂比较① 性未除杂供试品溶液；②阳性未除杂供试品溶液；③除杂阴性供试品溶液；④ 除杂供试品溶液；⑤大蒜油对照品溶液；

3.4实验结果：未经D101大孔树脂洗脱除杂的阴性供试品有干扰，故为确保检验结果准确，样品需经过大孔树脂D101洗脱除杂。结果见图4。

提取四个不同批号的银丹脑心通软胶囊供试品溶液，除杂后点样，点样量各3ul、大蒜油对照品溶液，点样量2ul，点于同一硅胶G板上。对4批银丹心脑通软胶囊药品进行薄层实验，实验结果表明：薄层鉴别方法重现性、稳定性均较好,专属性强,斑点清晰。结果见图5。

图5　不同批号药品的薄层色谱① 药品批号20120218；②药品批号20120219；③药品批号20120220；④ 药品批号20120221；⑤大蒜油对照品溶液；

由于银丹心脑通软胶囊成分复杂，含有多个活性成分，含量测定与质量控制较为困难。本研究参考中国药典及其他相关论文，以大蒜油为对照品，对银丹心脑通软胶囊中所含的有效成分之一——大蒜成分进行定性分析，结果显示，气相色谱检测法操作方便，灵敏度高，专属性强，检测结果直观可见，但检测设备需求及耗材费用较高；薄层色谱法各供试品斑点清晰，分离效果较好，重现性和适用性较好，检测成本低，普通实验室均可操作，但存在实验过程复杂的不足。

对两种方法进行比较，提示两种方法对大蒜成分的检测均有较好的专属性，且无阴性干扰，检测结果清晰，分离性及重复性均较好，可根据实际情况进行选择。本实验可对银丹心脑通软胶囊的大蒜成分鉴定与质控等提供一定指导和参考。

[1]第五秉政,刘彦民,刘敬欣·银丹心脑通软胶囊的薄层色谱研究[J].现代中医药,2012,5,28(3):77-79.

[2] 赵东升,李新霞,关明·大蒜药材的薄层鉴别方法[J].西北药学杂志，2011,12,26(6):391-394.

[3]中国药典[S]2015年版，一部：23.

[4]蒋利，孙力，常军民·大蒜有效部位的薄层鉴别[J].中国药物与临床,2012,12(6):768-769.

[5] 郑屏,盛旋,张祥·天然大蒜油及合成大蒜素的气相色谱-质谱分析[J].分析化学研究简报，2005,9(33)：1321-1323.

[6]魏宁漪,吴建敏,张启明·GC-MS法测定大蒜有关物质和稳定性研究[J].药物分析杂质,2011,31(9):1699-1702.

(责任编辑：王德红)

Research on Identification Methods of the Garlic in Yindanxinnaotong Capsule

Wang Kaisha1Li Yuanyuan2

(1.Anshun University,Anshun 561000,Guizhou,China)(2.Anshun Institute for Food and Drug Control, Anshun 561000,Guizhou,China)

The identification of medicinal materials used in Yindanxinnaotong capsule in explicit reports to identify, the garlic, the quality control is more effective, the author used gas chromatography and thin layer chromatography method respectively to identify the garlic in Yindan Xinnaotong Capsule. The results show that: gas chromatography separation effect is good, high sensitivity, but the detection cost is expensive; TLC spots were clear, without interference from negative control, and detection cost is low. Conclusion: the established method is reproducible and feasible,and can be provided as effective identification method of garlic in the Yindan Xinnaotong Capsule for selection.

Yindanxinnaotong capsule，garlic，GC，TLC，identification

2016-07-10

1.汪凯莎(1982.10～)，女，贵州安顺人，安顺学院讲师。研究方向：微生物与生化药学。

H159

A

1673-9507(2016)05-0127-03

2.李媛媛(1990.08～)，女，贵州安顺人，安顺市食品药品检验所检验员。研究方向：药品检验。