纤溶酶原激活物抑制物-1基因4G/5G位点多态性与脑梗死的相关性研究

茅新蕾，韩丽雅，黄向东，管朝红

·论著·

纤溶酶原激活物抑制物-1基因4G/5G位点多态性与脑梗死的相关性研究

茅新蕾，韩丽雅，黄向东，管朝红

目的研究纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）基因4G/5G位点多态性与脑梗死的关系。方法根据急性缺血性脑卒中Org10172治疗试验（TOAST）分型，收集大动脉粥样硬化型（LAA）脑梗死患者125例，小动脉闭塞型（SAO）脑梗死患者147例，以及同期体检中心体检者127例。比较脑梗死患者临床特征及PAI-1基因4G/5G位点多态性。结果与对照组相比，LAA组和SAO组脑梗死患者高血压患病率、吸烟及饮酒比例显著增高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平低（均＜0.05）。LAA组，SAO组及对照组均出现了4G/4G、4G/5G、5G/5G 3种基因型，3组基因型的分布差异有统计学意义（＜0.05）。结论高血压、吸烟、饮酒、HDL-C水平降低是温州地区脑梗死患者的重要危险因素。温州地区人群PAI-1基因4G/5G位点4G/5G基因型是脑梗死的危险因素。

脑梗塞；纤溶酶原激活物抑制剂-1；基因多态性

［Modem Practical Medicine，2016，28（8）：988-989，1008］

脑梗死的病因可归为血管壁病变、心脏病和血流动力学病变、血液成分和血液流变学改变。血液成分改变导致血液凝固的过程中凝血、抗凝、纤溶系统相互协调、相互制约。纤溶酶原激活物抑制物-1 （PAI-1）是纤溶系统中的主要成分，对调节纤溶系统活性的平衡起着重要的作用。PAI-1基因4G/5G基因多态性可能影响纤溶系统而促使脑梗死。本研究对此进行探讨，报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2014年5—9月浙江省温州市中心医院收治的脑梗死患者，进行急性缺血性脑卒中Org10172治疗试验（TOAST）分型：大动脉粥样硬化型（LAA）脑梗死患者125例，小动脉闭塞型（SAO）患者147例。另选同期来本院体检者127例为对照组。所有研究对象均排除：（1）血小板计数＞450×109/L或＜100×109/L；（2）血红蛋白＜9g/dl；（3）有骨髓增生症病史；（4）心房颤动；（5）恶性肿瘤；（6）对照组既往脑卒中者。

表1　研究对象一般资料比较

1.2方法

1.2.1血标本检测利用奥林帕斯5400全自动生化分析仪检测血脂，包括总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。

1.2.3PAI-1基因4G/5G基因多态性检测引物：rs1799768-FO，5’CGTTGGTCTCCTGTTTCCTT3’；rs1799768-RO，5’AGCCAGCCACGTGATTGT3’。聚合酶链式反应（PCR）反应体系：模板1l，引物Fi 1l，引物Ri 1l，dNTP 10 mmol/L 1l，Taq Buffer 5l，25 mmol/L MgCl25l，Taq酶0.5l，水35.5l。PCR反应程序：95℃预变性3 min，94℃变性30 s，60℃退火35 s，72℃延伸50 s，共35个循环，72℃修复延伸8 min。PCR产物纯化回收后，应用ABI3730XL DNA测序仪进行检测。

1.3统计方法应用SPSS19.0统计软件进行分析。计量资料以均数±标准差表示，组间比较用方差分析；计数资料比较用2检验；对基因型资料进行遗传平衡检验（Hardy-weinberg法）。＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.13组一般资料比较3组高血压病患病率、吸烟、饮酒及HDL-C水平差异均有统计学意义（均＜0.05）。见表1。

2.2PAI-1基因4G/5G位点多态性检测PAI-1基因4G/5G多态性位点存在缺失型（4G/4G）、杂合型（4G/5G）、插入型（5G/5G）3种基因型。测序图谱见封二彩图1。

2.33组PAI-1基因4G/5G位点多态性比较对照组人群基因型频率分布符合Hardy-weinberg平衡定律（2=1.417，=0.234）。3组基因型分布差异有统计学意义（2=21.490，＜0.05）。3组4G、5G等位基因的分布差异无统计学意义（2=1.778，=0.411）。见表2。

2.4病例组（LAA组+SAO组）和对照组PAI-1基因4G/5G位点多态性比较两组3种基因型的分布差异有统计学意义（2=19.191，＜0.05）。两组4G、5G等位基因的分布差异无统计学意义（2=1.150，=0.284）。见表3。

3　讨论

表2　3组PAI-1基因4G/5G位点基因型比较例（％）

表3　病例组和对照组PAI-1基因4G/5G位点基因型的比较例（％）

正常情况下，组织型纤溶酶原激活物（t-PA）和PAI相互作用取得平衡，纤溶功能下降使平衡破坏，导致多种血栓栓塞性疾病。血浆中PAI的活性主要由PAI-1表现［1-2］。PAI-1抑制t-PA活性，使其迅速失活，使纤溶酶原不能转变为纤溶酶，导致血栓形成。目前，PAI-1基因对血浆PAI-1活性的影响作用日益受到重视。人PAI-1基因定位于7号染色长臂q21.3 ～22，包括9个外显子和8个内含子［3］。近年来研究较多的是PAI基因启动子区4G/5G插入/缺失多态性，是PAI-1基因转录起始点上游-675bp位点上由于单个鸟嘌呤插入/缺失形成了4个鸟嘌呤碱基序列（4G）或5个鸟嘌呤碱基序列（5G）的多态性改变。

根据TOAST分型，脑梗死可进一步区分为LAA、SAO等类型，不同脑梗死类型有不同的遗传易感基因。本研究显示：LAA组与SAO组、对照组均出现了4G/4G、4G/5G、5G/5G 3种基因型。LAA组与SAO组4G/5G基因型显著高于对照组，表明4G/5G基因型是脑梗死的危险因素，且同样影响LAA与SAO两种类型的脑梗死。目前，PAI-14G/5G位点多态性与脑梗死关系的研究结论并不一致，文献［4-5］显示，4G等位基因是脑梗死的危险因素，亦有学者［6］得出了相反的结论，本研究结果与Ranellou等［7］研究结果相似。一般认为，4G/4G基因型者有较高的PAI-1分泌功能和血浆较高PAI-1水平从而促使血栓形成。但另一方面，PAI-1也具有稳定动脉粥样斑块、减少t-PA神经毒性的作用。

缺血性脑血管病与多种环境因素相关。本研究发现，高血压病患病率、吸烟、饮酒及HDL-C水平差异有统计学意义（均＜0.05）。由于本次收集的体检者基本为老年人，亦存在血管病危险因素，故糖尿病、LDL-C等差异无统计学意义（均＞0.05）。此结果提示尽量减少患者可控性血管病危险因素意义巨大。

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The relationship of plasminogen activator inhibitor-1 gene 4G/5G polymorphism and cerebral infarction

HANLiya，Email：wzeyhly@163.com

ObjectiveTo investigate the relationship of plasminogen activator inhibitor-1（PAI-1）gene 4G/5G polymorphism and cerebral infarction.MethodsData was prospectively collected from consecutive ischemic stroke inpatients in neurology department of Wenzhou central hospital.According to the TOAST criteria，125 large-artery atherosclerosis（LAA）patients and 147 Small-artery occlusion（SAO）patients were enrolled.The control group had 127 subjects from the Medical Examination Center in the same period.The clinical characteristics and 4G/5G polymorphism of PAI-1 gene were compared among the three groups.ResultAs compared with the controls，percentage of high blood pressure（HBP），smoking，drinking，high-density lipoprotein cholesterol concentration（sHDL-C）in LAA and SAO groups（all＜0.05）.There were three genotypes（4G/4G、4G/5G、5G/5G）in each groups.There was significantly difference of genotype frequency in the three groups（＜0.05）.ConclusionHBP，smoking，drinking，decreasing high-density lipoprotein cholesterolare risk factorsof cerebral infarctionpopulation in Whenzhou district.The PAI-1Gene 4G/5G genotype increases the risk of cerebral infarction.

Cerebral infarction；Plasminogen activator inhibitor-1；Gene polymorphism

10.3969/j.issn.1671-0800.2016.08.004

R743.3

A

1671-0800（2016）08-0988-03

2015-10-08

（本文编辑：孙海儿）

浙江省医药卫生科技计划（2011KYA148）

325000浙江省温州，温州市中心医院

韩丽雅，Email：wzeyhly@163.com

MAO Xinlei，HAN Liya，HUANG Xiangdong，GUAN Chanhong.（Wenzhou Central Hospital，Wenzhou 325000，Zhejian，China）