赵 花,张 红
联合检测血清HBV-M、HBV-DNA和ALT对乙型肝炎患者的诊疗意义
赵花,张红
乙肝病毒标志物(HBV-M);HBV-DNA; ALT
乙型肝炎是一种常见的传染病,全球每年有15%~25%死于HBV相关的终末期肝硬化和肝癌[1],严重威胁着人们的身体健康。我国是乙型肝炎的高发区,携带者高达10%[2]。为此,笔者收集了我院2013-07至2014-12门诊及住院1643例乙型肝炎患者血清资料,进行乙型肝炎标志物(HBV-M)、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR法)及ALT检测,旨在研究探讨他们之间的关系,希望为临床诊断治疗提供实验依据。
1.1一般资料乙型肝炎1643例诊断符合2010年中华医学会肝病学分会、感染病学会制定的《病毒性肝炎防治方案》中病毒性肝炎诊断标准,排除酒精肝、脂肪肝及合并有HCV、HAV、HEV等肝炎病毒感染者。其中男1169例,女474例,年龄7~79岁,平均(37.6±12.7)岁。抽取患者空腹静脉血,待完全凝固后3000 r/min离心10 min,分离血清待检。
1.2试剂与方法HBV-DNA定量采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR法),试剂购自上海科华生物工程有限公司,仪器为ABTPpris 7300荧光定量PCR检测仪,>1.0×103copies/ml为阳性。ALT生化指标检测采用罗氏COBAS C501全自动生化分析仪,试剂购自宁波普瑞柏生物科技有限公司。血清HBV-M检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)。试剂购自厦门新创生物药业有限公司,检测仪器为STAX-2100,以上指标检测均按照说明书严格操作,检测时质控结果均在控。
从检测结果看,乙肝HBV-M模式复杂多变,笔者共检出12组HBV-M模式,1643例乙肝患者 HBV-DNA总阳性率为54.7%(899/1643)。在1,3,5模式(497例)和1,4,5模式(807例)中HBV-DNA阳性率分别为91.2%(463/497)和43.2%(349/807),ALT检测阳性率分别为54.1%(269/497)和32.6(263/807)。模式1与其他模式比较不论是病毒载量还是阳性检出率差异皆有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。模式1中ALT阳性率和平均数含量明显高于其它模式(P<0.01,表1)。
表1 1643例乙肝患者HBV-M与HBVDNA、ALT结果比较
注:用t检验,HBV-DNA含量以对数值表示。
从测定结果中可以看出,ALT水平在不同病毒载量中差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),在HBV-DNA载量<1.0×103copy/ml中ALT阳性率占21.6%(161/744),HBV-DNA载量介于103~105中ALT阳性率占38.3%(235/614),HBV-DNA载量>105中ALT阳性率占55.4%(158/285)。见表2。
表2 乙型肝炎患者HBV-DNA载量与ALT测定结果 n(%)
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是乙型肝炎的病原体,病毒感染可致多种血清学标志模式,故临床症状及表现也十分复杂,除了HBV对肝脏的直接损害外,机体对HBV的免疫应答也是造成肝细胞破坏和肝功能损害的主要机制[3]。HBV-M血清标志物是乙型肝炎进行诊断过程中最常用的检查方法,但对于病毒复制、疗效观察等帮助不大。荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR法)可直接检测HBV病毒的遗传物质DNA,是判断疾病毒复制活动的最直接也是最准确金标准[4],为临床提供了更有力的诊治手段。ALT是反映肝细胞损害的敏感指标,在肝脏疾病早期就可释放入血,ALT是判断疾病临床活动性的重要指标。
乙型肝炎在不同临床阶段血清HBV-M和HBV-DNA检测情况有差异,从本研究检测结果看,笔者共检出12组HBV-M模式,1643例乙肝患者中 HBV-DNA总阳性率为54.7%(899/1643)。在1,3,5模式和1,3模式中HBV-DNA阳性率为91.2%(463/497)和88.2%(15/17),明显高于其他模式组,差异具有统计学意义(P<0.01)。说明HBeAg与HBV-DNA之间有较好的一致性,提示病毒在体内复制活跃,传染性强。从实验数据中也可看出,在2抗阳性组中检出4例HBV-DNA阳性8.2%(2/49)。虽然此情况只占乙肝康复期的少数,但有部分患者,仍存在病毒复制,可见抗体出现并不代表疾病痊愈,还有可能存在变异株持续感染和肝炎病变持续活动[5]。而在HBeAg阳性标本中HBV-DNA检测有8.0%(42/525)的阴性率,分析原因可能为试剂敏感性导致HBeAg假阳性,还有可能存在病毒基因变异[6]。1,4,5模式中HBV-DNA阳性率达43.2%(349/807),表明HBeAb的出现并不代表病毒停止复制,所以不能单纯用HBV-M来评价乙肝病情。有文献报道,HBeAg阴性,HBV-DNA阳性更易导致乙型肝炎向慢性转变和肝硬化的可能[8]。
ALT是最常用肝炎诊断指标,是直接反映肝内炎症活动程度的指标。从表2数据(HBV-DNA<1.0×103copy/ml,ALT阳性率占21.6%,HBV-DNA载量介于103~105,ALT阳性率占38.3%,HBV-DNA>105,ALT阳性率占55.4%)可以看出病毒载量越高,ALT也随之升高,肝功能损伤越大[8],以1,3,5模式最为明显54.1%(269/497)。
乙型肝炎发病机制复杂多样, HBV-M与HBV-DNA载量以及肝功能三者反映疾病的不同方面,不能单纯根据HBV-M模式或HBV-DNA载量的高低来判断病情是好转还是恶化,同时要多方位观察肝功能。故在HBV的诊断、治疗及预后,应联合检测,才能更加客观和准确地评估病情的变化、严重程度,指导临床诊疗。
[1]肖红霞.联合检测乙型病毒性肝炎前S1抗原和乙型病毒性肝炎血清标志物的意义[J].实用医技杂志,2011,18(6):618-619.
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[3]蒋素贞,鲁凤民,庄辉.慢性乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床意义[J].中华检验医学杂志,2012,35(2):119-121.
[4]郭卉,董瑶佳,刘晓峰,等.乙肝血清学标志物与HBV-DNA含量关系的分析[J].实验与检验医学,2010,28(4):417-418.
[5]王红英,张韬,刘献飞,等.乙型肝炎病毒血清学标志物与HBV-DNA含量的相关性分析[J].成都医学院学报,2010,5(3):247-249.
[6]高慧,何金花,崔美玲,等.乙型肝炎病毒DNA阳性的乙型肝炎携带慢性肝炎肝硬化肝癌患者检测病毒载量丙氨酸转氨酶天冬氨酸转氨酶及甲胎蛋白的意义[J].实用医技杂志,2013,20(2):117-119.
[7]李文楷,丁波,魏容,等. 联合检测血清标志物、ALT和HBV-DNA对乙型肝炎患者诊疗的临床意义[J].四川医学,2013,34(1):154-156.
[8]张雪芹.乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA水平的关系及临床意义[J].医学检验,2013,20(2):94-95.
(2015-11-06收稿2015-12-25修回)
(责任编辑岳建华)
赵花,本科学历,主管技师。
710054西安,武警陕西总队医院检验科
R512.62;R446.61