D抗原遮断引起Rh（D）定型困难的分析

程从远　李海云

（南阳市中心血站，河南 南阳 473000）

D抗原遮断引起Rh（D）定型困难的分析

程从远李海云

（南阳市中心血站，河南 南阳 473000）

目的正确鉴定新生儿的血型，找出新生儿溶血病原因，制定合理的治疗方案。方法用直抗、游离试验、放散试验、不规则抗体筛选及抗体鉴定试验鉴定其Rh（D）血型。结果该患儿为B型Rh（D）阳性，由母体IgG抗-D抗体引起新生儿溶血。结论由于抗-D抗体致敏了红细胞而误认为Rh（D）血型为阴性。

抗原遮断；Rh（D）定型；抗体鉴定

Rh（D）的鉴定是加入试剂和待检红细胞悬液，混合均匀，盐水立即离心的结果。因其试剂效价高，凝集明显，很容易判断结果。现有1例因母亲有抗-D抗体产生而影响Rh（D）定型困难，实验过程如下。

1　材料与方法

1.1一般材料：KA-2200型离心机（日本久保田）、FYQ型免疫微柱孵育器（长春博研）、数字显示式恒温水浴箱（上海一恒）、TD-3A型血型血清学用离心机（长春博研）、Baso 2005-1离心机（台湾贝索）。红细胞试剂；IgM型抗-D血清、IgG型抗-D血清、标准抗-A、抗-B血清、抗人球蛋白、抗-IgG、抗-C3d、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗人球蛋白试剂、筛选细胞、谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司）；Rh血型分型卡、抗人球蛋白卡（长春博迅）；生理盐水（河南华利制药公司）；AB血浆（本实验室自制）。所有试剂均在有效期内使用。血型定型法、抗体筛选与鉴定、吸收放散试验等按文献［1-2］方法操作。

1.2方法

1.2.1直接抗人球蛋白试验：多特异性抗人球蛋白反应3+，单抗-IgG3+，抗-C3d阴性，AB血浆阴性（阴性对照）。结果表明患者红细胞上致敏的为单一IgG抗体。

1.2.2血型鉴定：氯喹放散患者红细胞，使其放散后直接抗人球蛋白试验阴性，此时检查其红细胞血型为B RhD阴性。

1.2.3抗体筛选：首先对患者血清中进行检测，结果见表1，说明患者血清中无IgM类抗体，而有IgG类抗体。需要进一步鉴定抗体类型。

2　血型检测

2.1加入待检红细胞悬液50 μL，标准血清50 μL，抗-D血清50 μL，做盐水法，结果见表1。

表1　新生儿正定型及抗-D检测

依据上述结果初步判断：该患儿血型为“B”型，Rh（D）阴性。婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲被动获得的抗体，故对新生儿通常不做血型反定型。

2.2抗-D鉴定：加入抗-D试剂各50 μL，待检红细胞悬液50 μL，做盐水法和间接抗人球法，结果见表2。

表2　抗-D鉴定

依据上述结果判断，患儿的Rh（D）血型为阳性。

2.3不规则抗体筛选：加入待检血清100 μL，筛选细胞50 μL，做盐水法和间接抗人球法，结果见表3。

表3　不规则抗体筛选

查筛选细胞反应格局表，初步判断为抗-D抗体，但患儿为Rh （D）阴性，做Rh分型，结果为：CCee（因未采集母亲血样，故未做母亲的Rh分型）。

2.4直抗检测：加入直抗试剂50 μL，待检红细胞悬液50 μL，做盐水法，结果见表4。

表4　直抗检测

依据上述结果初步判断：患儿红细胞上致敏了不规则抗体，可能为Rh系统的抗体。

2.5抗体鉴定：加待检红细胞1 mL，生理盐水1 mL，乙醚2 mL，离心3400 rpm 2 min，充分混合均匀。离心3400 rpm 5 min，取最下层的放散液，平均分配至11支试管，各加入谱细胞50 μL，做间接抗人球法，查谱细胞反应格局表，该不规则抗体为抗-D抗体。结果见表5。

3　讨 论

经上述证实该患儿为B型Rh（D）阳性，由母体IgG抗-D抗体引起新生儿溶血。

表5　抗体鉴定

上述试验中Rh（D）检测的阴性为假阴性，是由于母体的抗-D抗体致敏了患儿红细胞所致，且抗-D抗体相对过剩，患儿红细胞表面的抗原位点全部被抗体占据，故Rh（D）检测为阴性。孕妇有输血史或者妊娠史，都可导致孕妇产生高效价的抗-D抗体，高效价抗-D抗体进入胎儿血液循环，讲胎儿红细胞上的D抗原完全封闭，此时患儿红细胞直接抗人球蛋白试验程强阳性，此时盐水法抗-D结果会得到假阴性，这种现象成为遮断现象。通过乙醚放散及谱细胞鉴定才最终确认患儿为Rh（D）阳性。该患儿Rh定型情况符合遮断现象引起的假阴性［4］。正确鉴定新生儿的血型，找出新生儿溶血病真正原因，才能制定合理的治疗方案。我们广大的医学工作者遇到此类问题时，一定要细心，冷静，选择合理的试验方法，对照试验，务必使我们得出真是的结论，为临床提供权威的试验数据，保障每一名就医患者的生命安全。

［1］丁苏鄂.常用血清学技术［M］//刘达庄.免疫血液学.上海：上海科学技术出版社，2002：194-220.

［2］中华人民共和国医政司.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京：东南大学出版社，2006：246-270.

［3］刘达庄.免疫血液学［M］.上海：上海科学技术出版社，2002：136.

［4］李延孝，闫东河，冀宝军.孕妇高效价抗-D遮断D抗原致新生儿Rh定型假阴性1例［J］.中国输血杂志，2005，18（3）：245-246.

D Antigen Interrupt Cause Difficulties Rh (D) to Finalize the Design Analysis

CHENG Cong-yuan， LI Hai-yun
（Nanyang Blood Center， Nanyang 473000， China）

ObjectiveTo correct identification of neonatal blood types， and identify the reasons for newborns hemolytic disease， formulate reasonable treatment scheme. MethodsUsing direct resistance， free trial， tossing in the test， irregular antibody screening antibody evaluation test and evaluation the Rh blood type （D）. ResultsThe children with positive for type B Rh （D）， caused by anti-D matrix IgG antibody neonatal hemolysis. ConclusionDue to the anti-D sensitization of red blood cells and antibodies for Rh negative blood type （D）.

Interrupt； Rh antigen （D）； Antibody identification

R457.1+1

B

1671-8194（2016）24-0036-02