中枢神经系统白血病脑脊液MMP-2和TIMP-2测定的临床意义

杨　华　沈立云　杜幸军　马鸿雁

郑州大学第二附属医院血液科　郑州　450014



中枢神经系统白血病脑脊液MMP-2和TIMP-2测定的临床意义

杨华沈立云杜幸军马鸿雁

郑州大学第二附属医院血液科郑州450014

目的探讨脑脊液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白抑制剂2(TIMP-2)对中枢神经系统白血病(CNSL)诊断的意义。方法采用酶联免疫吸附方法检测CNSL组、无CNSL组和对照组脑脊液中MMP-2、TIMP-2表达水平的变化。结果CNSL组脑脊液中MMP-2和TIMP-2均高于无CNSL组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05))。结论脑脊液中MMP-2、TIMP-2在CNSL的表达明显升高，提示其检测在早期诊断CNSL方面有一定意义。

中枢神经系统白血病；基质金属蛋白酶

中枢神经系统白血病(central nervous system leiukemia，CNSL)是急性白血病严重并发症，对白血病患者的预后起重要作用，严重威胁白血病患者的生存。如何早期诊断早期治疗检测中枢神经系统白血病(CNSL)是目前白血病的治疗难点。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)是一大类能降解细胞外基质成分的重要蛋白分解酶，特别是MMP-2在恶性肿瘤的浸润转移过程起着重要作用。本研究通过检测中枢神经系统白血病(CNSL)患者脑脊液中MMP-2和TIMP-2的表达水平，旨在探讨MMP-2和TIMP-2与白血病细胞中枢浸润的相关性，以及与MMP-2和TIMP-2在CNSL早期诊断中的意义。

1　材料和方法

1．1研究对象收取郑州大学第二附属医院血液科2011—2015年诊治的67例白血病患者，中位年龄 42(2～77)岁，男35例，女32例；其中 AML 37例，ALL 25例，慢性髓细胞白血病急变(CML)5例。选取按血液病诊断及治疗标准[1]确诊的CNSL患者(初诊或复发)29例。收取无中枢神经系统病变的非肿瘤患者脑脊液31例为对照组，男 19例，女 12例，中位年龄 44(5～74)岁。

1．2采集标本在初诊、复发或预防性鞘内化疗的白血病患者分别留取脑脊液标本，在腰穿鞘注前留取对照组的脑脊液标本。所有标本于室温下 3 500 rpm/min离心 20 min，分装上清，-20 ℃冻存等待检测。

1．3MMP-2和TIMP-2的检测采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测MMP-2和TIMP-2(北京邦定生物医学公司试剂盒)。按说明书进行所有操作。

2　结果

(1)CNSL组脑脊液中MMP-2和TIMP-2水平均高于无CNSL组和对照组，3组间水平差异均有统计学意义(P<0.05)。但无CNSL组的MMP-2和TIMP-2水平与对照组水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。(2)应用直线相关分析MMP-2和TIMP-2在脑脊液中表达水平，分析结果提示二者表达水平无相关性，差异无统计学意义(P>0.05)。

表1　3组MMP-2和TIMP-2水平比较

注：与对照组相比，▲P<0.05；与无CNSL组相比，△P<0.05；与CNSL组相比，*P<0.05

3　讨论

急性白血病作为造血系统的恶性肿瘤，从骨髓原发灶向髓外浸润扩散，白血病原始细胞逸出骨髓，浸润髓外器官、组织。这些过程需骨髓外基质和基底膜变形和修饰，穿透基质屏障、血管壁等[2]，中枢神经系统白血病作为急性白血病髓外浸润的常见部位，早期诊断十分重要，但具体发病机制并不十分清楚。基质金属蛋白酶家族作为重要的骨髓外基质蛋白降解酶在多种肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。MMP-2属于基质金属蛋白酶的明胶酶，基质金属蛋白酶抑制物(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP)作为内源性MMP抑制剂已知有4种，其中TIMP-2比较特异的抑制MMP-2。MMP-2 和TIMP-2已有研究证实参与多种肿瘤的侵袭和转移[3-4]。此外，MMP-2 和TIMP-2在急性白血病的浸润转移过程也有证据显示发挥了作用[2]。目前有关MMP-2 和TIMP-2在中枢神经系统白血病患者脑脊液中表达情况研究不多。本研究检测了脑脊液中MMP-2 和TIMP-2的表达情况，初步研究MMP-2 和TIMP-2与白血病细胞中枢浸润的相关性。结果显示，MMP-2水平在白血病患者脑脊液中明显高于对照组，且CNSL组患者脑脊液中的MMP-2水平高于无CNSL组。在本实验中，MMP-2 和TIMP-2的比值在中枢神经系统白血病患者脑脊液中的表达均高于正常对照组，但二者无相关性，说明TIMP-2升高并非起着抑制MMP-2活性作用，可能通过激活MMP-2来促进白血病细胞浸润。TIMP-2是MMP-2的抑制剂，但又在其酶原的激活过程发挥重要作用[5]。目前的研究认为TIMP-2和MMP-2 通过MT1-MMP形成三元络合物，进一步激活MMP-2[6]。这些研究结果都说明MMP-2 和TIMP-2之间作用机制复杂，本研究尝试阐明MMP-2 和TIMP-2之间的关系，也证实了二者之间作用机制复杂，具体的作用机制尚需进一步深入研究。总之，本研究尝探讨MMP-2 和TIMP-2在中枢神经系统白血病中的作用，证实其在中枢神经系统白血病的早期诊断方面有一定意义。

[1]张之南．血液病诊断及疗效标准[M]．3版．北京：科学出版社，2007:106-134．

[2]Janowska-Wieczorek A，Marquez LA，Matsuzaki A，et al．Expression of matrix metalloproteinases(MMP-2 and -9)and tissue inhibitors of metalloproteinases(TIMP-1 and -2)in acute myelogenous leukaemia blasts: comparison with normal bonemarrow cells[J]．Br J Haematol，1999，105(2): 402-411．

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(收稿2016-03-12))

R733.73

A

1673-5110(2016)18-0047-02

2012年度河南省医学科技攻关计划项目(编号：201204055)