电位滴定法测定山楂及其炮制品总有机酸的含量

张慧，夏厚林，杨孟妮，邓放

电位滴定法测定山楂及其炮制品总有机酸的含量

张慧，夏厚林，杨孟妮，邓放

目的：采用电位滴定法测定山楂及其炮制品总有机酸的含量。方法：采用pH计进行电位滴定，记录V值及对应的pH值，绘制ΔpH/ΔV～V曲线，确定滴定终点。结果：滴定终点突跃明显，精密度、重复性及稳定性良好；山楂回收率为97.8％、RSD为0.68％，炒山楂回收率为97.93％、RSD为0.95％，焦山楂回收率为96.56％、RSD为1.45％，山楂炭回收率为95.93％、RSD为1.65％。5批样品及其对应炮制品的总有机酸含量为山楂6.95％～7.04％，炒山楂7.01％～7.17％，焦山楂5.27％～5.31％，山楂炭3.16％～3.24％。结论：电位滴定法能较好的表达山楂及其炮制品总有机酸的含量，各样品总有机酸含量高低各异，表明山楂受热程度不同其有机酸含量不同。

山楂；总有机酸；电位滴定；含量测定

山楂为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实，其味酸、甘，微温，具有消食健胃，行气散瘀之功效［1］，临床上山楂除生用外还有炮制品炒山楂、焦山楂和山楂炭等［2］。现代药理研究表明山楂中有机酸具有消食开胃的作用，且三萜酸另有降血脂和降压作用，有机酸含量较高时对胃肠刺激作用大，炮制后则一定程度上降低了有机酸的含量［3］。

中国药典2010版山楂含量测定项下方法为以酚酞作指示剂，用标准NaOH进行滴定，以枸橼酸计算总有机酸含量。试验中发现总有机酸提取液颜色过深（黄棕色-红棕色），对滴定终点（微红色）干扰严重。依据电位滴定法原理，滴定终点可根据ΔpH/ ΔV～V的相关曲线来确定，具有客观可靠、易于自动操作、不受溶液颜色干扰等优点［4］。故本实验采用电位滴定法开展了山楂及其炮制品总有机酸含量测定的相关研究。

1 仪器与材料

1.1仪器

DF-101S恒温加热磁力搅拌器，PHS-25雷磁pH计（依法分别用pH=6.86、pH=4.00的缓冲液进行校正），BS124S电子分析天平，25 mL碱式滴定管。

1.2材料

实验用山楂购自成都市荷花池药材市场（批号分别为：20140405、20140406、20140407、20140408、20140409），经成都中医药大学卢先明教授鉴定为蔷薇科植物山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实，经检验符合中国药典2010版要求。参照中国药典2010版山楂项下依法炮制得炒山楂、焦山楂，参照文献［5］炮制得山楂炭。各样品粉碎，过四号筛备用。

2 方法与结果

2.1对照品溶液的制备

称取枸橼酸适量，加水溶解并稀释配成0.917 mg·mL-1，即得。

2.2供试品溶液的制备

照中国药典2010版山楂含量测定项下方法，取本品细粉约1 g，精密称定，精密加入蒸馏水100 mL，室温浸泡4小时，时时振摇，滤过，收集续滤液，即得。

2.3NaOH滴定液配制及标定

参照中国药典2010版依法配制标定其浓度为0.044 mol·L-1。

2.4测定方法

精密量取供试品溶液25.00 mL，置于200 mL烧杯中，精密加入50.00 mL蒸馏水，放入恒温磁力搅拌器中于25℃搅拌使混合均匀，用标准NaOH滴定液滴定，用pH计测定，记录消耗NaOH的量及相应的pH值，绘制△pH/△V～V的滴定曲线，结果见图1～图5。由图可见山楂及其炮制品的电位滴定突跃明显。

图1　枸橼酸滴定图

图2山楂滴定图

图3　炒山楂滴定图

图4　焦山楂滴定图

图5　山楂炭滴定图

图6　V～△V关系图

2.5方法学考察

取同一批次药材依法考察，精密度试验RSD为0.17％；重复性试验RSD分别为山楂0.56％、炒山楂0.67％、焦山楂0.81％、山楂炭1.13％；稳定性试验RSD分别为山楂0.61％、炒山楂0.68％、焦山楂0.93％、山楂炭1.05％；加样回收率试验平行五份，山楂回收率为97.8％、RSD为0.68％，炒山楂回收率为97.93％、RSD为0.95％，焦山楂回收率为96.56％、RSD为1.45％，山楂炭回收率为95.93％、RSD为1.65％。表明该法可靠性良好。

2.6含量测定

依法测定五批山楂及其炮制品总有机酸含量（按干燥品以枸橼酸C6H8O7计，每1 mLNaOH滴定液相当于2.818 mg的枸橼酸），结果见表1。

表1　山楂总有机酸含量测定结果（n=3）

3 讨论

3.1本实验采用电位滴定法测定山楂及其炮制品的总有机酸含量，不同炮制品总有机酸含量不同，山楂为6.95％～7.04％，炒山楂为7.01％～7.17％，焦山楂为5.27％～5.31％，山楂炭为3.16％～3.24％，与文献［6-7］采用药典法测定结果基本相符，表明该法有较好的适用性。

3.2本课题组前期对电位滴定法和指示剂法测定山楂总有机酸含量的方法做了比较，结果表明电位滴定法滴定过程突跃明显，准确可靠，且易于自动化，不因颜色干扰影响终点判断，尤其适用于提取液颜色深的山楂炮制品总有机酸的含量测定。

3.3文献研究有采用高效液相色谱法测定山楂中枸橼酸单体的含量［8-9］，而电位滴定法测定的是总有机酸的含量，因此在今后的研究中可考虑将高效液相色谱法与电位滴定法联合使用，提高表达的准确性。

3.4本实验考察并绘制了V～△V关系图如图6，由图可知当滴定体积在V=7.7～8.6 mL之间时，滴定变化明显，提示需要控制好滴定速度。

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010.

［2］ 中华人民共和国卫生部药政管理局全国中药炮制规范［M］.北京：人民卫生出版社，1988：115.

［3］ 原思通.医用中药饮片学［M］.北京：人民卫生出版社，2001.226.

［4］ 孙毓庆，胡育筑主编.分析化学［M］.第2版.北京：科学出版社，2006：207.

［5］ 毛淑杰，李铁林.炮制对山楂中总黄酮及总有机酸含量的影响［J］.中国中药杂志，1989，（14）9：20.

［6］ 黄显芬.炮制对山楂有机酸含量影响的探讨［J］.广西中医学院学报，2000，17（1）：591.

［7］ 王苹，谢婉兰.山楂不同炮制品中枸橼酸含量考察［J］.中成药，1993，15（5）：211.

［8］ 杨滨，李化，赵宇新，等.山楂炮制前后有机酸含量的变化［J］.中国中药杂志，2004：（29）11：1057.

［9］ 杨滨，李化，汤树良，等.高效液相色谱法测定山碴中枸椽酸的含量［J］.中国药学杂志，2004：（39）9：697.

（责任编辑：李芸霞）

Determination of total organic acids content in Shanzha and processed products by potentiometric titration method/

ZHANG Hui， XIA Hou-lin， YANG Meng-ni， DENG-Fang//（School of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine； Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine， Ministry of Education； National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research， Development and Utilization of Chinese Medicine Resources， Chengdu 611137， Sichuan）

Objective: To detect total organic acids content in Shanzha and processed products using potentiometric titration method. Method: pH meter was used in potentiometric titration. V values and corresponding pH were recorded to draw Δ pH/ Δ V - V curve， and then the titration end point was determined. Result: Titration end point was clear. Precision， repeatability and stability were good. Recovery of Shanzha was 97.8％ with RSD of 0.68％. Recovery of Chao Shanzha was 97.93％ with RSD of 0.95％. Recovery of Jiao Shanzha was 96.56％ with RSD of 1.45％. Recovery of Shanzha Tan was 95.93％ with RSD of 1.65％. Total organic acids content in 5 batch samples and the corresponding processed products were 6.95％ ～ 7.04％ for Shanzha， 7.01％ ～ 7.17％ for Chao Shanzha， 5.27％ ～ 5.31％ for Jiao Shanzha， and 3.16％ ～ 3.24％ for Shanzha Tan， respectively. Conclusion: Potentiometric titration method can detect the content of total organic acids in Shanzha and its processed products. Total organic acids content varies in accordance with different height degree.

Shanzha； total organic acids； potentiometric titration； content determination

·炮制制剂·

·炮制制剂·

R 284.1

A

1674-926X（2016）03-009-02

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地，成都 611137

张慧（1991-），女，硕士，主要从事中药质量控制方向研究Tel：13880459062 Email：zhanghui9101@163.com

邓放（1971-），男，博士，副教授，主要从事中药及其复方物质基础和质量控制方向研究Tel：13684090383 Email：dengf99@163.com

2015-07-17