宫颈DNA倍体分析及TCT在宫颈病变早期筛查中的临床意义

张雪梅，覃福宁，孙　奇

(广西医科大学第四附属医院病理科，广西柳州 545005)



·经验交流·

宫颈DNA倍体分析及TCT在宫颈病变早期筛查中的临床意义

张雪梅，覃福宁，孙奇

(广西医科大学第四附属医院病理科，广西柳州 545005)

目的探讨DNA倍体分析和液基细胞学检查在宫颈病变早期筛查中的作用。方法对13 144例患者进行DNA倍体分析和宫颈液基细胞学检查，对其中554例行病理活检，以病理活检结果为标准，分析两种方法在宫颈病变筛查中的临床意义。结果DNA倍体分析与液基细胞学的阳性率分别为7.33%和5.36%，差异有统计学意义(P<0.01)；分别以出现1～2个DNA倍体异常细胞及出现3个及以上DNA倍体异常细胞作为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为98.67%和89.36%，特异度为22.47%和58.99%，阳性预测值为72.89%和82.15%，与病理活检诊断符合率为74.19%和79.60%，差异均有统计学意义(P<0.05)；分别以出现意义不明确的非典型鳞状细胞(ASCUS)及低度鳞状上皮内病变(LSIL)作为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为73.87%和62.90%，特异度为49.18%和79.92%，阳性预测值为64.87%和79.92%，与病理活检诊断符合率为63.00%和70.40%，差异均有统计学意义(P<0.05)；109例TCT检查为ASCUS的患者中，活检宫颈病变检出率为40.37%。其中DNA倍体正常组、出现1～2个DNA倍体异常细胞组、出现3个及以上DNA倍体异常细胞组宫颈病变检出率分别为30.30%、25.00%、53.85%，前两组检出率显著低于最后一组(P<0.05)。结论以出现3个以上DNA倍体异常细胞或LSIL为活检标准，对早期宫颈病变的筛查具有较高的诊断价值，ASCUS伴3个及以上DNA倍体异常细胞者活检更容易发现宫颈病变。

DNA；宫颈肿瘤；活组织检查；女性；宫颈病变；细胞学；DNA倍体分析

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤，对宫颈早期病变的筛查较多采用宫颈液基细胞学检查。近年来，随着分子生物学的发展，DNA倍体分析也逐渐应用于宫颈早期病变筛查。本资料回顾性分析了2011年以来本院妇产科行宫颈DNA倍体分析及液基细胞学检查的患者，通过比较两种方法的敏感性、特异性、阳性预测值及与活检诊断符合率，探讨两种方法在宫颈早期病变筛查中的临床意义，并为合理分流患者、指导随访及治疗提供帮助。

1　资料与方法

1.1一般资料回顾性分析本院妇产科2011年4月至2014年6月就诊行早期宫颈病变筛查的13 144例患者，年龄18～77岁，均进行宫颈细胞DNA倍体分析及液基细胞学检查，其中554例在阴道镜下行活组织病理检查。

1.2方法

1.2.1标本采集与处理在阴道窥器直视下用特制的宫颈刷收集宫颈口和颈管的脱落上皮细胞，固定，离心，弃上清液，取细胞悬液制成薄层细胞学涂片2张，用95%的乙醇固定。其中1张涂片行Feulgen 染色做DNA倍体分析，另一张涂片采用巴氏染色行液基细胞学检查。

1.2.2细胞DNA倍体分析采用厦门麦克奥迪公司生产的全自动图像分析系统对细胞进行扫描分析，判读标准：(1)DNA指数(DI)=1为正常细胞；(2)DI≥2.5为DNA倍体异常细胞，其中1～2个DNA倍体异常细胞为少量DNA倍体异常细胞，≥3个DNA倍体异常细胞为多量DNA倍体异常细胞。

1.2.3液基薄层细胞学(TCT)检查采用TBS分级系统进行细胞学诊断，判读标准：(1)正常或炎症；(2)未明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)和不排除高级别鳞状上皮内病变的ASCUS(ASC-H)；(3)低度鳞状上皮内病变(LSIL)和高度鳞状上皮内病变(HSIL)；(4)鳞状细胞癌(SCC)；(5)未明确诊断意义的非典型腺细胞(AGUS)和腺癌。其中ASCUS 及以上的病变为液基细胞学阳性。

1.2.4阴道镜下活组织检查病理诊断标准(1)正常或炎症；(2)宫颈上皮内瘤变(CIN)，按病变轻中重程度分为CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级或原位癌；(3)浸润癌。发现CIN病变或浸润癌为活检阳性。

1.3统计学处理采用SPSS19.0统计学软件，计数资料用率表示，组间采用χ2检验，检验水准α=0.05，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.1两种方法的检出率早期宫颈病变筛查的13 144例中，DNA倍体分析阳性率为7.33%(964/13 144)，TCT检查阳性率为5.36%(705/13 144)，差异有统计学意义(χ2=42.92，P<0.01)。

2.2DNA倍体分析与活组织病理检查结果DNA倍体检测阳性患者中，以出现1～2个DNA倍体异常细胞为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为98.67%(371/376)，特异度为22.47%(40/178)，阳性预测值为72.89%(371/509)，与病理活检诊断的符合率为74.19%(411/554)。以出现3个及以上DNA倍体异常细胞为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为89.36%(336/376)，特异度为58.99%(105/178)，阳性预测值为82.15%(336/409)，与病理活检诊断的符合率为79.60%(441/554)，见表1。

表1　　DNA倍体分析与活组织病理检查结果对比(n)

2.3TCT检查与活组织病理检查结果TCT检查阳性患者中，以ASCUS为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为73.87%(229/310)，特异度为49.18%(120/244)，阳性预测值为64.87%(229/353)，与病理活检诊断的符合率为63.00%(349/678)。以LSIL为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为62.90%(195/310)，特异度为79.92%(195/244)，阳性预测值为79.92%(195/244)，与病理活检诊断的符合率为70.40%(390/554)，见表2。

表2　　TCT检查与活组织病理检查结果对比(n)

2.4ASCUS患者的DNA倍体分析及活组织病理检查结果109例TCT检查为ASCUS的患者中，活检宫颈病变检出率为40.37%(44/109)。其中DNA倍体正常组、出现1～2个DNA倍体异常细胞组、出现3个及以上DNA倍体异常细胞组宫颈病变检出率分别为30.30%(10/33)、25.00%(6/24)、53.85%(28/52)，后一组较前两组检出率均高，差异均有统计学意义(χ2=5.53、4.53，P<0.05)，而前两组宫颈病变的检出率差异无统计学意义(χ2=0.19，P>0.05)，见表3。

表3　　109例ASCUS伴DNA倍体分析的

3　讨　　论

近年来宫颈癌发病率居高不下，我国是宫颈癌的高发地区[1]。随着液基细胞学的应用，宫颈癌的发病率及病死率都有了下降的趋势[2]，但受主观诊断水平的影响，液基细胞学在宫颈病变的早期诊断中仍存在较高的漏诊率和误诊率[3]。分子遗传学的发展让人们认识到，癌的发生实质上是肿瘤细胞的无限增殖，而细胞增殖的本质是染色体的复制，表现为DNA合成的加速及含量的增加，过度的合成会造成DNA倍体异常[4-5]，因此细胞核DNA的变化直接反映肿瘤细胞的增殖能力。DNA倍体分析在国外已作为一种常规的临床检测方法应用于宫颈癌的早期筛查[6-8]。近年来国内也有相关研究和报道，研究表明DNA倍体分析可以弥补以往TCT筛查中主观因素的不足，二者联合可提高宫颈病变的检出率。

本研究结果显示，早期宫颈病变筛查的13 144例中，DNA倍体分析阳性率为7.33%，TCT阳性率为5.36%，差异有统计学意义(P<0.01)。宋志琴等[9]对12 630例患者进行了DNA定量分析及TCT检测，二者阳性率分别为13.68%和8.97%，差异有统计学意义，与本研究结果一致。本研究结果提示DNA倍体分析与TCT均可应用于宫颈病变的早期筛查，DNA倍体分析阳性率较高。而分别以DNA倍体分析阳性及TCT阳性作为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为98.67%和73.87%、阳性预测值为72.89%和64.87%，与病理诊断符合率为74.19%和63.00%，二者特异度分别为22.47%和49.18%，差异均有统计学意义(P<0.01)。提示二者比较，DNA倍体分析在宫颈病变检出的灵敏度、阳性预测值及与病理诊断符合率方面均较TCT高，而特异度稍低,二者结合能提高宫颈病变筛查的准确性，与国内外研究结果一致[9-14]。

本研究中，分别以出现1～2个DNA倍体异常细胞及出现3个及以上DNA倍体异常细胞作为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为98.67%和89.36%，特异度为22.47%和58.79%，阳性预测值为72.89%和82.15%，与病理活检诊断符合率为74.19%和79.60%，差异均有统计学意义(P<0.05)。分别以ASCUS及LSIL作为活检标准，发现宫颈病变的灵敏度为73.87%和62.90%，特异度为49.18%和79.92%，阳性预测值为64.87%和79.92%，与病理活检诊断符合率为63.00%和70.40%，差异均有统计学意义(P<0.01)。结果提示以出现3个及以上DNA倍体异常细胞或LSIL作为活检标准，对宫颈病变的筛查将具有较高的诊断价值。出现1～2个DNA倍体异常细胞或ASCUS可定期随访。在临床工作中，合理分流此类患者能更准确地预测宫颈病变的发生，避免不必要的创伤性活检。

本研究中值得注意的是109例TCT检查为ASCUS的患者中，宫颈病变检出率为40.37%。ASCUS一直以来诊断标准模糊，可重复性差，炎症、HPV感染、萎缩、修复、或CIN都可引起ASCUS。本研究109例ASCUS患者中，DNA倍体正常组、出现1～2个DNA倍体异常细胞组、出现3个及以上DNA倍体异常细胞组宫颈病变检出率分别为30.30%、25.00%、53.85%，最后一组宫颈病变的检出率显著高于前两组，差异有统计学意义(P<0.05)，结果提示，ASCUS伴3个及以上DNA倍体异常细胞者更容易发生宫颈病变。临床工作中，对此类患者分流，立即行阴道镜活检，有可能早期发现宫颈病变。孔丽华等[15]研究认为，ASCUS伴DNA倍体异常者均需行阴道镜下活检，而本研究中前两组宫颈病变的检出率差异无统计学意义(P>0.05)，提示如ASCUS不伴DNA倍体异常或伴1～2个DNA倍体异常者，均可定期随访，不必进行活检，研究结果与梅金红等[16]一致。临床工作中对ASCUS患者进行合理分流，能更加准确地预测宫颈病变的严重程度及发展趋势，避免不必要的创伤性活检。DNA倍体分析联合液基细胞学检查能提高宫颈病变早期筛查的准确性，为合理分流患者、指导临床随访和治疗提供了帮助。

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张雪梅(1983-)，主治医师，硕士，主要从事肿瘤病理诊断研究。

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.14.035

R365

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1671-8348(2016)14-1974-03

2015-11-08

2016-02-18)