刘娥娥,刘国胜(北京市丰台区动物疫病预防控制中心,北京丰台100071)
预湿纱布团蘸取犬猫唾液采样法
刘娥娥,刘国胜
(北京市丰台区动物疫病预防控制中心,北京丰台100071)
为配合上级疫控部门开展狂犬病免疫效果监测和唾液带毒情况检查,本单位受委托做部分血液和唾液样品的采集工作。每份唾液2mL。在为宠物犬、猫采集唾液的过程中,我们根据采样要求和宠物生理特点摸索总结出一种宠物主人易于接受、对宠物刺激相对较小的采样法——纱布团蘸取法,使采样任务顺利完成。采集唾液方法在文献搜索中有直接抽取法、制造腮腺漏法,但没有发现相同的方法,现介绍如下。
1.1 采样用具
1.1.1 采样醮取材料 纱布绷带 (四列、列宽6cm)经试验比较,选择长度分别为90cm和120 cm两种规格。90cm的可用于猫和小型犬,120cm适用体型稍大的犬,为保证效果,长度最好不低于90cm。纱布团可现用现做,也可事先做好备用。制作方法是将纱布绷带呈索状在食指上缠绕后,将尾收于中间的孔中。
1.1.2 乳胶手套 目的是加强个人防护,因为操作中有手挤唾液的步骤。有条件还可戴护目镜、口罩。
1.1.3 弯头止血钳(18cm) 用来夹住纱布团。
1.1.4 塑料棒 用于开口。圆滑的塑料材质便于消毒,也不会硌伤牙齿,可用牙刷把等一些物品来替代。
1.1.5 平皿(8cm) 用于盛接从纱布团挤出的唾液。
1.1.6 一次性注射器(2.5mL) 用来吸取唾液并移入5mL离心管。
1.1.7 生理盐水 用于纱布团的预湿。
1.1.8 食盐 市售食用盐,用于刺激宠物产生唾液。
1.1.9 离心管或试管(5mL)带盖 用于保存唾液。
1.2 采样方法
1.2.1 保定 将宠物置于诊台上并戴上伊丽莎白圈,一位助手双手于圈外固定住头部,主人可帮助保定住四肢(尤其是猫)以防被抓伤。
1.2.2 准备 采样者双手配戴一次性乳胶手套,将纱布绷带团滴加生理盐水后用力挤干,夹于止血钳上。注意要将止血钳头埋于纱布球中,以免露出的钳尖使宠物受伤,再将湿纱布球沾满食盐。
1.2.3 采集 采样者左手持塑料棒从口腔一侧齿间隙伸入宠物口中,使其张口。再将其向后保持在上下臼齿间,使犬口不能闭合。右手持止血钳把纱布绷带团伸到宠物舌下,在舌下阜处翻滚,使食盐充分刺激犬口腔黏膜。随着唾液产生,术者缓慢的翻转纱布团使之充分吸收唾液。当感觉纱布团在口腔中被按压时有滋滋声、并有湿润光泽时取出。
1.2.4 收集保存 采样者用力将纱布团中唾液挤于平皿中,用去除针头的注射器吸取2mL唾液,推入离心管中编号后冷冻保存。
在这次采样任务中,我们最终应用纱布团蘸取法顺利地完成了采样任务,共采唾液27份(表1)。
由于没有现成的操作方法可学习借鉴,刚开始采样时是向宠物口腔中撒盐,待唾液流出时用试管接,但宠物因条件反射总是不停地舔,结果把唾液舔光咽净、收获甚微,且反复操作费时耗力招来主人不满,导致采样失败。改用纱布团蘸取法,因操作简单、刺激小,使主人易于接受,提高了唾液采样成功率。采样用具简单易得,方法易于推广。
采样中主要的用具是纱布绷带,它缠成卷后具有很强的吸水性。通过本人的一个小试验可以表明90cm和120cm两种规格纱布团大小和吸收生理盐水效果(cm、mL)(表2)。
表1 使用两种方法效果比较
表2 不同规格纱布要求
由于唾液比生理盐水粘稠、表面张力大,纱布吸收唾液时的量还会有提高。干燥的纱布吸取粘稠张力大的唾液时速度慢且要浪费3-4mL的唾液,如使用预湿纱布团就能较好解决这些问题。不但使唾液吸取的速度提高,减少唾液浪费,而且使操作时间减少,同时湿纱布沾附食盐的效果很好,使撒盐吸唾液两步合二为一。
唾液检毒采样不要求无菌,但要求清洁无污染。在操作中纱布绷带、乳胶手套、注射器、试管均为一次性使用;平皿、塑料棒和止血钳进行常规清洗、消毒后备用;滴加生理盐水可专用一只注射器;盛放食盐的容器不允许已进过口腔的纱布团重复蘸取,以免污染。采样用具除纱布绷带外,其他的用具可根据各单位不同情况灵活运用,但必须要注意个人防护和用具的清洗、消毒。
当前人兽共患病狂犬病的疫情严峻,为检测宠物是否携带狂犬病病毒,在诊断时开始利用先进的捕捉病毒基因片段的PCR技术。该项技术可以检测活体犬、猫唾液样本,快速查毒。这项诊断技术的推广会使犬、猫唾液样品采集成为基层兽医工作者的一项重要任务,纱布团蘸取法能为他们今后的犬猫唾液采样工作带来一些帮助。
S 852.167 [文献标识码] A
1004-6704(2016)03-0137-02
2015-09-17
刘娥娥(1967-),中级畜牧师,北京市丰台区动物疫病预防控制中心。