用气相色谱法分析测定芦笋中多种有机氯和拟除虫菊酯残留量

肖利龙，花　锦，刘晓琳

（1.太原学院，山西太原　030032；2.山西出入境检验检疫局，山西太原　030024）



用气相色谱法分析测定芦笋中多种有机氯和拟除虫菊酯残留量

肖利龙1，花锦2，刘晓琳2

（1.太原学院，山西太原030032；2.山西出入境检验检疫局，山西太原030024）

建立了芦笋及其制品中9种有机氯类与5种拟除虫菊酯类农药残留的定性和定量分析方法。芦笋样品用乙酸乙酯-环己烷混合溶液（1+1，V/V）提取，凝胶色谱净化，以弗罗里硅土小柱作为分离柱，经程序升温分离各组分，以峰面积外标法定量，能有效分离9种有机氯和5种拟除虫菊酯农药，消除基质干扰效果好。该法在0.01～0.10 mg/L质量浓度范围内线性良好，相关系数R2均大于0.995，回收率为78.3%～103.5%，相对标准偏差为4.1%～7.3%。有机氯和拟除虫菊酯农药检出限分别为0.002 mg/kg和0.005 mg/kg。该方法灵敏度高、重现性好，适用于国内外对农药残留限量的检测要求，为芦笋的出口提供技术保障。

气相色谱；有机氯；拟除虫菊酯；芦笋

0　引言

芦笋又称石刁柏，是一种富含蛋白质和维生素的蔬菜。随着社会对食品安全问题的日益关注，最大残留限量标准要求越来越严，而我国芦笋产品出口量很大，农药残留已成为芦笋出口一个很重要的限制指标［1］。因此，针对芦笋建立一种快速可靠、高灵敏度和安全实用的农药残留检测技术非常必要。

当前，对芦笋中农药残留的研究，大多集中于有机磷、氨基甲酸酯类农药［2-3］。以往虽对果蔬中有机氯、拟除虫菊酯类农药残留检测较多，但果蔬种类繁多，多数蔬菜基质复杂［4］，因此有必要对芦笋进行特定的检测。晁文等人［5］对芦笋有机磷、有机氯农药残留进行了分析，只涉及4种六六六有机氯农药，同时有机氯和拟除虫菊酯类农药为高效杀虫剂，在蔬菜、瓜果中广泛使用。因此，建立芦笋及其制品中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，具有十分重要的意义。

1　试验部分

1.1试剂与溶液

乙酸乙酯，分析纯、色谱纯；乙腈，分析纯；环己烷，分析纯；正己烷，色谱纯；乙酸乙酯-环己烷混合溶剂（1+1，V/V）；无水硫酸钠；弗罗里硅土小柱，0.5 g/3 cc；11种农药标准品，纯度98.4%～99%，均购于德国Dr公司。

1.2试验仪器

气相色谱仪，GC 2010型附电子捕获检测器（ECD），超声波清洗器，旋转蒸发器，Accuprep MPS型全自动凝胶色谱仪，半自动固相萃取仪，氮吹仪，TALBOYS型涡流混合器。

2　试验方法

2.1试样制备

从原始样品中取部分代表性样品，用绞肉机粉碎，混匀后按四分法缩分出不少于100 g，试样装入洁净容器内，密封，并标明标记。将试样于-18℃以下冷冻贮藏。

2.2提取

称取10.00 g均匀样品于50 mL离心管中，加10 mL蒸馏水，20 mL乙酸乙酯-环己烷混合溶液（1+1，V/V），超声提取15 min，离心，取上层清液过无水硫酸钠于150 mL梨型瓶中，再向残渣中添加20 mL乙酸乙酯-环己烷（1+1，V/V），超声提取15 min，离心，合并上层清液于150 mL梨型瓶中，在45℃水浴中减压旋转浓缩至近干，准确加入10.0 mL乙酸乙酯-环己烷（3∶8）溶解残渣，并过0.45 μm滤膜，待凝胶色谱净化。

2.3凝胶色谱净化

凝胶色谱净化条件为凝胶净化柱，300 mm× 20 mm（i.d.），Bio Beads S-X3型；流动相，环己烷-乙酸乙酯（1+1）；流速4.7 mL/min；样品定量环5 mL；收集时间7.5～12.5 min。

将10 mL待净化液按上述条件净化，在线浓缩系统浓缩后用正己烷（色谱纯）定容至1.0 mL，供固相萃取净化。

2.4固相萃取净化

取0.5 mL经GPC净化后的溶液上柱，弃去，用5 mL配比为9∶2的正己烷和乙酸乙酯混合溶液洗脱，收集洗脱液于试管中，于40℃下氮吹至近干，用0.5 mL正己烷定容，涡流混合均匀。

2.5仪器参数与测定条件

2.5.1色谱测定条件

色谱柱：BPX608型，柱长25 m，柱内径0.32 mm，膜厚0.4 μm，毛细管柱；柱温：50℃保持1 min，以10℃/min速度升至200℃，以5℃/min速度升至290℃（10 min）；进样口温度：260℃，检测器温度：310℃；N2为载气，载气流量1.0 mL/min。

2.5.2仪器测定

将标准使用液或试样液进样1 μL，以保留时间定性；测量峰面积，与标准比较进行定量。

3　结果与讨论

3.1色谱柱的选择

在14种有机氯和拟除虫菊酯农药的分析中，分别选用HP-5毛细管柱和弗罗里硅土小柱同等规格的色谱柱。在其他分离条件一致的情况下，HP-5毛细管柱对氯氰菊酯、β-666的响应值较低；而使用弗罗里硅土小柱，杂峰较少、响应值高，取得了较好的分离效果。

3.2标准物的线性方程和相关系数

将有机氯和拟除虫菊酯标准储备液用正己烷稀释，制备0.01，0.02，0.05，0.08，0.10 mg/kg 5个不同水平的混合标准溶液，在选定的色谱条件下，根据定量目标离子的峰面积与质量浓度制作标准曲线。

有机氯和拟除虫菊酯加标试验气相色谱见图1（图中色谱峰序号所标注的农药种类与表1中的序号相对应）。

图1　有机氯和拟除虫菊酯加标试验气相色谱

有机氯和拟除虫菊酯标准物保留时间、线性方程和相关系数见表1。

由表1可知，有机氯和拟除虫菊酯农药在0.01～0.10 mg/L质量浓度范围内线性良好，相关系数R2均大于0.995。

3.3回收率与精密度

在空白芦笋样品中添加0.002，0.010，0.020，0.050 mg/kg等4个不同水平的混合标准溶液进行回收率试验。每个添加质量浓度平行重复6次，计算回收率和相对标准偏差（Relative standard deviation，RSD）。

有机氯和拟除虫菊酯标准物检出限、相对标准偏差和回收率见表2。

表1　有机氯和拟除虫菊酯标准物保留时间、线性方程和相关系数

表2　有机氯和拟除虫菊酯标准物检出限、相对标准偏差和回收率

由表2可知，14种农药加标回收率为78.3%～103.5%，RSD为4.1%～7.3%。以3倍信躁比确定方法检出限：有机氯类农药检出限均为0.002 mg/kg，溴氰菊酯、氯氰菊酯类均为0.005 mg/kg。回收率、精密度和检出限符合国外农药残留限量检测要求［6］。

3.4样品的测定

应用本试验建立的检测方法，对产地为山西太原清徐县和山西省永济市的各20批芦笋和10批芦笋罐头进行检测，其中清徐县1批芦笋中检出了β-666农药超标，永济市2批芦笋中分别检出溴氰菊酯和六氯苯农药超标；芦笋罐头中均没有检出。

4　结论

本试验建立了测定芦笋中多种有机氯和拟除虫菊酯残留量气相色谱检测的分析方法。该方法灵敏度高、重现性好，回收率、精密度和检出限均满足芦笋中同时检测有机氯和拟除虫菊酯农药残留定性定量的检测要求，为我国芦笋出口的农残检测提供了技术保障。

［1］宋欢，车兰兰，林勤保，等.芦笋中农药最大残留限量及检测方法研究进展 ［J］.食品工业科技，2012（12）：298-302.

［2］赵亚华，何学芳，李勇，等.食品中40种有机磷和氨基甲酸酯农药多残留快速检测技术研究 ［J］.中国卫生检验杂志，2007，17（11）：1 938-1 940.

［3］吴曼，陈九星，付启明，等.气相色谱法测定芦笋及其土壤中的苯醚甲环唑残留量 ［J］.精细化工中间体，2009，39（6）：71-76.

［4］叶宇飞，许秀琴，王立君，等.气相色谱法测定水果蔬菜中农药残留的基质效应研究 ［J］.安徽农学通报，2015，21（5）：114-117.

［5］晁文，赵俊芳，吕银德，等.蔬菜中有机磷、有机氯农药残留量分析 ［J］.包装与食品机械，2012，30（2）：30-33.

［6］中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、农业部农药检定所.GB 2763—2014食品安全国家标准食品中农药最大残留量 ［S］.北京：中国标准出版社，2014.◇

Determination of Organochlorines and Pyrethroid Pesticides in Asparagus by Gas Chromatography

XIAO Lilong1，HUA Jin2，LIU Xiaolin2
（1.Taiyuan University，Taiyuan，Shanxi 030032，China；2.Shanxi Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Taiyuan，Shanxi 030024，China）

Gas chromatography method of 9 kinds of organochlorines pesticides and 5 kinds of pyrethroid pesticides in asparagus and asparagus products are constituted.The samples of asparagus are extracted with ethyl acetate-cyclohexane solution（1+1，V/V） and pontificated by gel chromatography.Using Florida silica column chromatography as separate pole can effectively separate of 9 kinds organochlorine pesticides and 5 kinds of pyrethroid pesticides and eliminate interference. The results show that the calibration curves are linear（R2＞0.995） in the range of 0.01～0.10 mg/L for all the pesticides.The average recoveries are between 78.3%and 103.5%，and relative standard deviations are among 4.1%～7.3%.The limits of detection for organochlorines and pyrethroid pesticides are 0.002 mg/kg and 0.005 mg/kg.The advantages of the method are sensitive and stable.It applies to domestic and international limits for pesticide residue testing requirements and provides technical support for the export of asparagus.

gas chromatography；organochlorine；pyrethroid；asparagus

O657.7

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2016.07.041

1671-9646（2016）07b-0042-03

2016-05-30

肖利龙（1986— ），男，硕士，助教，研究方向为食品质检。