TGF—β/smad蛋白在大鼠高氧肺损伤中的表达及意义

杨军+廖志勇+巨容

【摘要】 目的 探讨TGF-β/smad蛋白在大鼠高氧肺损伤中的表达及意义， 探求高氧肺损伤的原因以及TGF-β/smad蛋白的表达及其作用。方法 60只10 d日龄的大鼠， 随机分为实验组和对照组， 实验组大鼠让其处于95%氧气的高氧环境下暴露7 d， 而对照组在正常的空气环境下暴露7 d， 观察检测大鼠的肺情况， TGF-β/smad蛋白， 肺组织LKB1、TGF-β1、psmad2蛋白的表达和分布， 分析蛋白的表达和意义。结果 与对照组比较， 实验组的肺组织LKB1、TGF-β1、psmad2蛋白下降明显， 呈高表达， 实验组肺组织中LKB1与TGF-β1蛋白表达呈正相关（r=0.474， P=0.04）， TGF-β1与psmad2蛋白表达呈正相关（r=0.491， P=0.033） 结论 TGF-β/smad蛋白可以作为判断高氧的肺损伤的损害程度和判预后的一种重要指标， 并且受到信号分子的调控， 在高氧的情况下， 可影响肺功能的正常情况， 并对肺部产生损伤。

【关键词】 TGF-β/smad蛋白；高氧肺损伤；表达及意义

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.21.200

现阶段人们经常有肺损伤的情况，而其中的原因可能由于细胞、细胞因子和炎症介质构成的调节网络的失控， 而导致肺内皮细胞肺泡的上皮间质细胞等靶细胞受到影响而不能正常接收信号出现障碍， 而TGF-β/smad蛋白则在其中担当了很大一部分的效果， 医疗护理的工作者需要尽自己的工作的责任[1]， 发现TGF-β/smad蛋白在大鼠高氧肺损伤中的表达及意义并且能在后续的研究中发现治疗方法让患者尽快康复， 研究蛋白情况与高氧肺损伤关系， 发现新的思路等作出探索， 现报告如下。

1 材料与方法

1. 1 标本来源 选择60只10 d日龄的大鼠， 随机分为实验组和对照组， 各30只。采集大鼠的体重、身长等数据并记录， 制备高氧肺损伤的模型， 使用一个容量适当的塑料容器， 并且在塑料箱中防治一台测氧仪， 时刻监控氧气含量浓度， 当大鼠放入塑料瓶内时， 由于呼吸作用会有二氧化碳产生， 在塑料容器内放入石灰吸附， 并保持塑料箱的温度与湿度适中。实验组大鼠体重30.6～42.3 g， 身长21.3～26.3 cm， 对照组体重29.8～40.1 g， 身长20.2～24.8 cm， 两组大鼠体重、身长等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 实验组大鼠称重、做好标记， 记录数据之后放置于高氧浓度的容器中连续7 d， 而对照组置于空气中， 其他环境都不变， 同样放置7 d， 之后在同一时间对每只大鼠称重并重新测量身长， 之后处死， 剪开胸腔并观察， 采用氯胺酮腹腔麻醉， 常规消毒铺巾， 沿胸骨中线打开胸腔， 剔除结缔组织和脂肪组织、气管支气管及其他非肺组织成分， 取出大鼠的肺脏肺组织， 完整地取出之后肉眼观察， 并使用生理盐水冲洗， 观察之后在甲醛溶液中固定， 做病理解剖切片， 使用活性酶等物质做标记显色等， 并做好阴性阳性对照， 采取不用制作的单克隆抗体， 都是相同的品种。采用专业图像软件对其进行分析， 并且测定相关值[3]。

1. 3 判定标准 在同一时间， 对于制作成功的每种切片在显微镜下依次观察， 在不同视野下观察， 阳性的细胞所测得的百分数<5%则判定为为阴性， 5%～20%是弱阳性， 20%～75%是纯阳性， 而>75%则判定为强阳性。

1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

60只大鼠接受实验测定后， 在与对照组比较， 实验组的肺组织LKB1、TGF-β1、psmad2蛋白下降明显， 呈高表达， 并且TGF-β/smad蛋白的含量以及变化情况在高氧肺损伤中有显著的意义。实验组肺组织中LKB1与TGF-β1蛋白表达呈正相关（r=0.474， P=0.04）， TGF-β1与psmad2蛋白表达呈正相关（r=0.491， P=0.033）

3 讨论

TGF-β/smad蛋白可以作为判断高氧下肺损伤的损害程度和预后的一种重要指标[4]。实验测定之后， 发现两组大鼠在各自环境中生长发育之后， 大鼠的体重和身长都有所减少说明生长滞后， 并且肉眼观察肺组织发生损害。转化生长因子（TGF-β） 通路主要由TGF-β配体、Ⅰ型Ⅱ型受体和smad蛋白介导。并且在TGF-β/smad蛋白关系通路之下参加上皮细胞生长过程， 而肺组织的上皮细胞与受体结合之后需要将信号传送才能继续进行合成转录等， TGF-β通路可促进细胞增殖，并且在一定时候也有抑制的作用， 有时分泌过少则导致细胞过度增殖、增生， LKB1可以调节VEGF的水平导致大鼠通路抑制受到抑制而生长停滞。实验组肺组织中LKB1与， TGF-β1蛋白表达呈正相关， （r=0.474， P=0.04）， TGF-β1与psmad2蛋白表达呈正相关（r=0.491， P=0.033）， 提示LKB1缺失间质中， TGF-β1分泌降低， SIK可以负向调控TGF通路， 间接指出LKB1与TGF通路的相互关系， 然而LKB1与TGF蛋白相互作用的具体机制仍不明确， 需进行进一步研究。

参考文献

[1] KatajistoP， VaahtomeriK， EkmanN， et al. LKB1 signaling in mesenchymal cells required for suppression of gastrointestinal polyposis. NatGenet， 2008， 40（4）：455-459.

[2] 雷玲， 钟小宁. Th17与TGFβ1的关系及在肺纤维化中的作用. 实用医学杂志， 2013， 29（4）：671-673.

[3] 徐丽娜， 刘倩， 王建海. IL-31与TGF-131在小鼠肺纤维化过程中的表达及关系.菏泽医学专科学校学报， 2011， 23（4）：1-3.

[4] 李莉， 李燕芹.格列卫对肺纤维化小鼠的干预机制.中国呼吸与危重监护杂志， 2009， 8（4）：365-370.

[收稿日期：2016-03-04]