RhoA与胃癌的相关研究进展

石会勇　甄亚男　王斌　霍守俊　徐忠法

【摘要】 胃癌是我国高发的恶性肿瘤之一， 占全世界发病患者的40%左右， 年发病在20/10万。目前就诊的胃癌患者大部分为中晚期， 占70%以上， 5年生存率在10%左右， 患者死亡的主要原因为浸润及转移。对于晚期胃癌， 目前主要应用化疗结合生物靶向治疗等手段。但胃癌对于化疗存在多药耐药， 使得针对胃癌的治疗存在困难， 缺乏有效的治疗手段。针对胃癌浸润转移及多药耐药的相关分子机制目前仍不甚明确。本文对RhoA与胃癌的相关研究进展展开一综述。

【关键词】 RhoA；胃癌；多药耐药

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.22.202

RhoA为Ras GTP酶超家族的成员之一， 通过其分子开关作用， 参与调节细胞的运动、粘附及细胞骨架重排， 是下游基因调节信号通路的重要组分， 在胃癌细胞的浸润、转移及多药耐药机制中发挥了重要作用。

1 RhoA的结构和功能

1. 1 RhoA的结构 RhoA是Ras超家族小GTP酶组分之一， 分子量21～25 kDa。以GTP结合的活性形式及GDP结合的失活形式存在， 起到细胞进程中转导通路的分子开关作用。

1. 2 RhoA的功能 RhoA在人类癌症中常过表达[1]。鸟嘌呤核苷交换因子（GEFs）促进GDP结合状态转换为GTP结合状态， 而GTP酶激活蛋白（GAPs）强化内在的GTP酶活性， 从而使其失活。其静息时， 与GDP结合滞留于胞质中， 呈无活性状态。当受到细胞外刺激时， GDP转变为GTP， RhoA获得活性， 转位到细胞膜上， 从而发挥细胞内信号转导作用。RhoA活性及失活状态可被GDP/GTP交换蛋白或GTP酶活化蛋白调节。研究发现RhoA活性增强可明显促进肿瘤细胞生长， 这可能跟CyclinD1的表达因RhoA的过度激活而被促进有关， 提示胃癌的发生、发展与可能与RhoA过度激活有关[2]。

2 RhoA与胃癌

2. 1 RhoA与胃癌的侵袭和转移 胃癌的侵袭和转移是一个复杂的多步骤过程， 主要包括细胞粘附、基质降解及远处侵袭3个环节。在胃癌组织中， RhoA的表达据报道与肿瘤发生、发展和浸润转移密切相关。RhoA在肿瘤形成过程中是过表达的， 有报道称RhoA与胃癌的增殖及浸润有关[3]。

RhoA活化后作用于下游效应蛋白Rho相关激酶（Rho associated kinase， ROCK）或mDia， 进而调节细胞骨架重组， 使肿瘤发生侵袭和转移。此外， 活化的RhoA通过级联反应激活MMP-2、cyclin D1、E-cadherin、uPAR等因子， 这些因子的活化与肿瘤细胞凋亡、增殖、粘附密切相关。研究显示RhoA在胃癌中的表达明显高于癌旁和正常胃黏膜， 并且其表达仅与胃癌患者的浸润深度有关[4]。Xu等[5]的研究显示Wnt5a可以通过PI3K/GSK3β/RhoA信号通路促进胃癌细胞的迁移。在胃癌标本TNM分期研究中， RHOA高表达者五年生存率为28%， 低表达者为62%。RhoA表达与胃癌分期、淋巴结转移、组织学类型显著相关。近年认为转录因子NF-KB和AP21的转录水平因RhoA的激活被促进， RhoA的激活还可以调节增强p27， p21， cyclinD1的活性， 导致细胞的增殖[6]。研究发现RhoA活性增强导致的p27， p21， cyclinD1的活性的增强可明显促进胃癌细胞SGC7901细胞生长。肿瘤细胞的一个重要特点是细胞周期异常。研究发现胃癌细胞进入S期比例可因正显性突变V14RhoA蛋白的表达明显增大。

2. 2 RhoA与胃癌化疗的多药耐药 化疗耐药是胃癌化疗效果的主要障碍， 对于是否RhoA的表达影响了胃癌细胞对化疗的反应值得研究。樊代明领衔的项目组对胃癌细胞MDR的分子机制进行了长期研究， 首次报道了RhoA参与胃癌MDR的调控。王旭青等[8]研究发现胃癌细胞SGC7901生长可明显因RhoA活性增强而得到促进。引人注意的是：与对照细胞相比， 转染V14RhoA的细胞可降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性， 这一点提示不仅胃癌的发生有RhoA参与， 还可能参与胃癌多药耐药机制调控也有RhoA参与， 但需进一步研究其作用机理， 作者的研究显示RhoA在胃癌细胞中的过表达导致了其对泰素及长春新碱的耐药， 从而与不良预后有关。

RhoA调节细胞凋亡的确切机制还不清楚， 但其耐药性针对化疗药物种类的不同而不同。为鉴定RhoA引起化疗耐药的确切靶点， 对于亲本及RhoA转染的细胞提取RNA进行cDNA微阵列分析。鉴定了许多转录的改变， 大部分与化疗耐药无明显相关。但是， 抗氧化相关蛋白及NF-KB信号通路被认识。特别是超氧化物歧化酶基因的表达与RhoA表达相关。该研究显示：RhoA表达受到干扰后不仅Bcl2家族分子被抑制， 并且激活了凋亡诱导因子及大量的caspase家族分子， 这表明肿瘤凋亡的趋势可因胃癌细胞RhoA表受抑制明显增强。也有研究显示转染显性活性RhoA突变体的NIH3T3细胞， 或者过表达RhoA蛋白在血清饥饿条件下与对照组细胞相比， 细胞凋亡增加， 这也说明在肿瘤的凋亡调控机制中RhoA起着不可忽视的作用[8]。

抑癌基因是通过基因编码的蛋白特异性使细胞接受负增长信号， 最总导致肿瘤细胞过度生长、增值受到抑制的基因。细胞会因为抑癌基缺失或者因失去活性而持续生长， 最后转化成恶性细胞。部分抑癌基因可因RhoA的表达被抑制后表达明显上调， 因此抑制RhoA的表达可以成为分子靶向治疗肿瘤的新的可能， 并未其提供指导[9]。

EGFR是erbB家族的一员， 配体包括EGF及TGFα等。细胞的凋亡、增值及血管生成等是通过配体与受体结合后下游一系列信号转导通路被激活实现的。EGFR异常表达或者高表达存在于很多肿瘤中。有研究表明[10]， EGFR信号转导通路与肿瘤的耐药有关。近期的一项研究结果提示：在胃癌患者中， 与癌旁组织相比EGFR的表达显著升高。EGFR表达水平与其他临床病理参数无关却与胃癌远处转移显著相关。胃癌患者因EGFR阳性生存时间短， 预后差。因此EGFR表达在预示胃癌的转移、预后好坏中发挥举足轻重的作用。早期EGFR分子靶向治疗EGFR阳性或强阳性的患者很有可能非常有效。该项研究发现EGFR与TopoⅡ表达相关。

综上所述， RhoA作为信号开关， 在胃癌的浸润、转移中起重要的作用。同时， 近期的研究表明RhoA表达与胃癌的多药耐药相关。对于RhoA的进一步研究， 探讨其能否作为胃癌浸润转移及多药耐药的预测指标， 针对RhoA的靶向治疗能否改善胃癌的多药耐药值得进一步研究。

参考文献

[1] Liu J， Zhang Y， Xu R， et al. PI3K/Akt-dependent phosphorylation of GSK3β and activation of RhoA regulate Wnt5a-induced gastric cancer cell migration. Cell Signal， 2013 ， 25（2）：447-56.

[2] 苏晓娟， 唐志峰， 李强， 等. RhoA和核因子KB在胃癌中的表达及其临床意义.中华肿瘤杂志， 2011， 33（4）：276-79.

[3] Matsuoka T， Yashiro M， Kato Y， et al. RhoA/ROCK signaling mediates plasticity of scirrhous gastric carcinoma motility. Clin Exp Metastasis， 2011 ， 28（7）：627-636.

[4] Takai Y， Kaibuchi K， Kikuchi A. Expression and clinical significance of RhoA and Ezrin in gastric carcinoma. JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE IN PRACTICE， 2011， 15（1）：1024-1026.

[5] Xu XT， Song QB， Yao Y， et al. Inhibition of RhoA/ROCK signaling pathway promotes the apoptosis of gastric cancer cells. Hepatogastroenterology， 2012 ， 59（120）：2523-2526.

[6] Kakiuchi M， Nishizawa T， Ueda H ， et al. Recurrent gain-of-function mutations of RHOA in diffuse-type gastric carcinoma. Nat Genet， 2014 ， 46（6）：583-587.

[7] Xu J， Li Y， Yang X， et al. Nuclear translocation of small G protein RhoA via active transportation in gastric cancer cells. Oncol Rep， 2013， 30（4）：1878-1882.

[8] 王旭青， 张建新.胃癌组织中核因子一KB的表达及临床意义. 江苏大学学报（医学版）， 2009（19）：259-261.

[9] 蒋志庆， 田小林， 董陈诚， 等. RhoA蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义.华夏医学， 2011， 24（1）：632-633.

[10] 肖炜明；施瑞华， 丁岩冰， 等. 胃癌组织中EGFR和COX-2表达的意义及其相关性. 世界华人消化杂志， 2007， 15（2）：123-128.

[收稿日期：2016-03-21]