高血压合并冠心病病人脂蛋白相关磷脂酶A2、类胰蛋白酶水平变化的相关研究

燕蒲娟，来春林，王继荣，齐　杰



高血压合并冠心病病人脂蛋白相关磷脂酶A2、类胰蛋白酶水平变化的相关研究

燕蒲娟，来春林，王继荣，齐杰

山西省人民医院(太原030012)

摘要：目的观察脂蛋白相关磷脂酶A2、(LP-PLA2)、血清类胰蛋白酶(TPS)在高血压合并冠心病病人的水平变化，探讨其与颈动脉内-中膜厚度(IMT)、冠脉病变程度的相关性及临床意义。 方法 选择临床确诊的伴有高血压的冠心病病人65例，不伴有高血压的冠心病病人55例，单纯高血压病30名，健康体检者30名(对照组)。采用酶联免疫法检测所有病人LP-PLA2、TPS水平，比较各组间差异，并分析其与颈动脉内-中膜厚度、冠脉病变程度的相关性。 结果 LP-PLA2、TPS水平在单纯高血压组、冠心病组水平均高于对照组，且伴有高血压的冠心病组LP-PLA2、TPS水平高于不伴高血压的冠心病组和单纯高血压病组。 LP-PLA2、TPS水平与IMT存在正相关(偏回归系数分别为5.681、0.323，P<0.05)，两者与冠状动脉Gensini评分呈明显正相关(偏回归系数分别为8.191、0.318，P<0.05)。结论LP-PLA2、TPS作为炎性因子参与高血压的发生发展过程，随着高血压炎症反应的不断增强，其水平随之升高，且同相关靶器官损害的特异标记有相关性，表明二者可以作为高血压风险程度的预警因子。

关键词：高血压；冠心病；脂蛋白相关磷脂酶A2；血清类胰蛋白酶

高血压已成为当今威胁人类健康及导致多种并发症的主要疾病，近年来其发病率和死亡率呈上升趋势。炎症因素在高血压的发生、发展及转归中的重要角色早已在大量的临床试验中得到验证[1]。脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)参与体内急性炎症反应和缺血再灌注损伤，TPS是一种降解细胞基质的天然蛋白酶，与慢性炎症反应关系密切；而二者在高血压合并动脉粥样硬化等靶器官损害的相关报道较少。本课题旨在检测外周血LP-PLA2、血清类胰蛋白酶(TPS)的活性水平，探讨高血压与动脉粥样硬化的关系，以期为高血压病人防治动脉粥样硬化的发生开辟新的空间。

1资料与方法

1.1临床资料入选病例来自2013年5月—2014年10月，就诊于山西省人民医院心内科病房的拟诊为冠心病病人。经冠脉造影检查明确诊断，入选冠心病病人120例，男74例，女46例，年龄45岁～81岁(64.05岁±10.37)岁。其中伴有高血压冠心病65例，不伴有高血压冠心病55例。同期健康体验者30名为对照组，男11名，女19名，年龄32岁～78岁(59.5岁±16.7)岁。另入选同期单纯高血压病人30例为单纯高血压组。详细病史询问，记录病人临床资料。

根据WHO的诊断标准和冠心病分类标准，符合以下条件的冠心病病人纳入本研究。冠脉造影显示左主干(LM)、左前降支(LAD)、回旋支(LCX)及右冠脉(RCA)4支血管中至少一支血管病变的狭窄程度≥50%并且≤100%。高血压诊断标准：参考《2007年中国高血压防治指南》：收缩压≥140 mmHg或(和)舒张压>90 mmHg。剔除糖尿病、风湿病、甲状腺疾病、感染性疾病、局部炎症肿瘤等疾病。

1.2方法

1.2.1临床资料收集所有研究对象于入院当日测血压，采集相关病史，次日晨抽取空腹静脉血，进行空腹血糖、血脂、肝功能、肾功能、血细胞分析等生化检查。

1.2.2血清LP-PLA2和TPS标本收集及检测入选对象于住院次日空腹抽取肘静脉血5 mL，自然静置0．5 h后离心15 min(3 000 r/min)，分离血清后，将上层液置于Eppendorf管中，然后置于-80℃冰箱保存待测。采用ELISA法测定，配套试剂盒均购自上海西唐生物科技有限公司。

1.2.3冠状动脉Gensini评分采用Gensini积分法[5]：管腔狭窄1%～25%计1分，26%～50%计2分，51%～75%计4分，76%～90%计8分，91%～99%计16分，全闭塞计32分。病变血管的部位评分：左主干为5；左前降支或回旋支近段为2.5；左前降支中段为1.5；左前降支远段为1；回旋支中、远段为1；右冠近、中、远段及后降支均为1。病变积分为狭窄程度计分乘以病变部位评分，总积分为所有病变积分之和。

1.2.4颈动脉内-中膜厚度(IMT)检测应用美国LOGIQ7型彩色多普勒超声诊断仪检测，观测颈总动脉、颈动脉球部、颈内动脉近端血管壁的三层结构，包括内膜、中膜、外膜，测量内-中膜厚度。

2结果

2.1各组临床基线情况年龄、性别、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)水平比较分析，差异无统计学意义(P>0．05)。详见表1。

表1　4组一般基线资料比较(±s)

2.2各组血清LP-PLA2和TPS水平比较(见表2)

表2　不同研究组血清LP-PLA2和TPS水平比较(±s)

2.3血清LP-PLA2、TPS水平与IMT、Gensini评分的相关性分析分别以血清LP-PLA2和TPS水平为因变量，以IMT和Gensini评分为自变量，进行相关分析。

表3　LP-PLA2与IMT和Gensini积分的多重回归分析

表4　TPS与IMT和Gensini积分的多重回归分析

3讨论

高血压病是由多种复杂因素导致的、逐渐进展的心血管综合征，影响心脑血管病病人生命和生活质量。炎症是高血压、动脉粥样硬化等相关心血管疾病的病理生理过程的重要机制[1-2]，若长期而持续的血压控制欠佳，机体的炎症反应会持续存在，各种致炎因子表达异常，进行性导致心血管功能和结构紊乱，引起心脏、肾脏、大脑、血管和其他靶器官损害，过早发生心血管事件和死亡。

脂蛋白相关磷脂酶A2亦称血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)，主要由成熟的巨噬细胞、单核细胞、T淋巴细胞、肥大细胞、肝细胞等分泌生产，并受体内多种炎性介质调节，如γ干扰素和脂多糖抑制其分泌，血小板活化因子(platelet-activating factor，PAF)促进其分泌，且由PLA2G7基因编码[3]。Vadas等[4]建立的失血性休克实验研究中发现在组织缺血再灌注损伤时，导致PLA2激活及释放，血循环PLA2含量明显增加。机体内80%的LP-PLA2与低密度脂蛋白结合，能水解低密度脂蛋白上的氧化卵磷脂，产生多种促炎物质。Chait 等[5]研究指出LP-PLA2在高血压和动脉粥样硬化的免疫致炎过程中是重要调节因子。赵颖等[6]研究表明在高血压慢性炎症或存在组织损伤时血浆中LP-PLA2浓度迅速升高，表明LP-PLA2与高血压的发生和发展相关，其升高程度可能与血管内皮损伤后引起的免疫反应有关。LP-PLA2主要由活化的内膜粒细胞(主要是巨噬细胞)分泌，在此部位，LP-PLA2将氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水解呈溶血磷脂酰胆碱(lyso-PC)和氧化脂肪酸(oxFA)，经代谢产生炎性介质，如血小板源生长因子(PDGF)、白介素-6等，LP-PLA2通过水解代谢产生的炎性介质，发挥这些炎性介质的生物效应，引起血管平滑肌异常增殖、肥大，触发血管重构，导致血压升高[7]。血循环中Lp-PLA2主要以与脂蛋白颗粒结合的形式存在，其中80%与LDL结合后可经血循环被运送到那些有损害倾向的动脉壁，LDL在动脉壁内变成oxLDL时，Lp-PLA2立即水解oxLDL产生LysoPC和oxFA[8]，这些物质可以损伤内皮细胞依赖性的舒张功能，增加内皮细胞的通透性，改变内皮细胞表面黏附因子的表达，促进单核细胞的迁移浸润和泡沫细胞的形成；诱导血管平滑肌的增殖和迁移；双向调控胆固醇在泡沫细胞的摄取和外流，最终形成粥样斑块[9]。Lavi等[10]研究表明，LP-PLA2在有明显动脉粥样硬化的血管床处浓度显著升高，且LP-PLA2水解氧化LDL而产生的LysoPC与动脉内皮功能紊乱呈高度相关。

血清TPS是一种具有多种生物学活性的天然蛋白酶，绝大多数由组织肥大细胞释放，只有极少量的一部分由循环中的嗜碱性粒细胞表达。目前已知人类胰蛋白酶基因定位于16号染色体短臂(16p13．3)，至少编码4种蛋白酶。其中肥大细胞内最主要的为B-类胰蛋白酶，大多以无活性的前体形式存在，当肥大细胞被激活时，通过脱颗粒方式将其释放到细胞外发挥生理效应[11]。Jeziorska等[12]在用电子显微镜观察人颈动脉粥样组织标本时发现，该部位的肥大细胞处于部分脱颗粒状态，且肥大细胞数量高于正常内膜。类胰蛋白酶刺激外周血T细胞、单核细胞和气道上皮细胞释放白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)等众多细胞因子，直接或通过细胞因子的间接作用募集并激活嗜酸粒细胞和中性粒细胞等炎症细胞至血管损伤部位加重炎症反应[13-14]，使内皮细胞释放的NO及前列环素等舒血管因子减少，血管内皮收缩和舒张协调性减低，尤其是舒张反应性下降，外周阻力间接提高，表明类胰蛋白酶与高血压低度炎症存在相关性；同时这些细胞因子还通过核转录因子κB(NF-κB)途径诱导内皮细胞黏附分子的表达，加强单核细胞与内皮细胞的黏附，启动动脉粥样硬化进程[15]。巨噬细胞转化为泡沫细胞是动脉粥样硬化进展的关键一步，类胰蛋白酶通过蛋白酶激活受体介导的信号通路抑制肝X受体(LXRα)生物活性，促进巨噬细胞脂质的积累和泡沫细胞的形成[16]。活化的巨噬细胞和泡沫细胞通过吞噬作用分泌更多蛋白酶入血，肥大细胞通过直接或间接作用能够激活基质金属蛋白酶原形成具有活性的基质金属蛋白酶，降解斑块的纤维帽和胶原基质，削弱纤维帽，促使斑块破裂、不稳定和血栓形成[17-18]。血清中肥大细胞类胰蛋白酶可以作为急性冠脉综合征病人病情风险的一项新的评估指标[19]。

本研究发现血清LP-PLA2、TPS水平在单纯高血压组、冠心病组的水平均高于对照组，且伴有高血压的冠心病组二者水平高于不伴高血压冠心病组和单纯高血压病组，同时二者还与IMT、Gensini评分呈正相关，表明脂蛋白相关磷脂酶A2、类胰蛋白酶与高血压的发生及其靶器官损害的病理进展中发挥一定作用，可以作为高血压病人发生动脉粥样硬化的预警信号。由于本次研究的病例数较少，查阅的相关资料尚不够丰富，仍需更大规模的临床研究进一步验证血清LP-PLA2、TPS在心血管疾病中的作用机制。

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(本文编辑王雅洁)

基金项目：山西省科技攻关项目(No.20120313018-8)

通讯作者：来春林，E-mail：Lai0817@hotmait.com

中图分类号：R541.3R256.2

文献标识码：B

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.13.002

文章编号：1672-1349(2016)13-1445-04

(收稿日期：2015-08-03)

Correlation of Lipoprotein Associated Phospholipase A2and Serum Tryptase in Patients with Hypertension Complicated with Coronary Heart Disease

Yan Pujuan， Lai Chunlin，Wang Jirong，Qi Jie

Shanxi Provincial People’s Hospital，Taiyuan 030012， Shanxi，China Corresponding Author：Lai Chunlin

Abstract：ObjectiveTo compare the levels of lipoprotein associated phospholipase A2(LP-PLA2) and serum tryptase (TPS) in patients of essential hypertension (EH) complicated with coronary heart disease (CHD) ， and explore the clinical correlation between them and intima-media thickness and coronary artery lesion degree.Methods Sixty-five patients with EH complicated with CHD，55 patients with CHD， 30 patients with hypertension were participated in the study.Thirty healthy individuals were as controls.The levels of LP-PLA2 and TPS were detected by enzyme-linked immunoassay.The correlation of LP-PLA2 and TPS levels with the carotid artery - in the film thickness (IMT) and coronary artery lesion degree were analyzed.Results The levels of LP - PLA2 and TPS at the pure hypertension， coronary heart disease group were higher than the control group， and accompanied by hypertension coronary heart disease group LP-PLA2， TPS level higher than that of without hypertension coronary heart disease (CHD) and pure hypertension group.LP - PLA2， TPS levels were positively correlated with IMT (partial regression coefficient were 5.681 and 0.323， P<0.05)， with both coronary artery Gensini score was significantly positive correlation (partial regression coefficient were 8.191 and 0.318， P<0.05).Conclusion As inflammatory factors， LP-PLA2 and TPS involved in pathological progress of hypertension and inflammation.With the levels increasing， and correlated with specific markers with related target organs damage， shows that the degree of risk warning factor can be used as high blood pressure.

Key words：lipoprotein associated phospholipase A2；tryptase；hypertension；coronary heart disease