148例体表淋巴结针吸细胞学检查诊断分析

余清　聂佳　吴宁　杨清平

(德阳市人民医院病理科，四川 德阳　618000)



148例体表淋巴结针吸细胞学检查诊断分析

余清聂佳吴宁杨清平

(德阳市人民医院病理科，四川 德阳618000)

【摘要】目的探讨体表淋巴结针吸细胞学检查诊断的准确率。方法用7号穿刺针获取148例体表淋巴结针吸细胞学标本，制备细胞涂片及细胞块并作出细胞学诊断，对148例中无法直接明确诊断的10例可疑恶性肿瘤(黑色素瘤、鳞状细胞癌、小细胞癌、甲状腺乳头状癌及非霍奇金淋巴瘤)加做免疫细胞化学(immunocytochemistry，ICC)标记后再做出细胞学诊断；148例体表淋巴结针吸细胞学与活检结果对照，分析针吸细胞学与活检结果的符合率并总结细胞学特点。结果148例体表淋巴结针吸细胞学与活检结果符合率为95.95%，细胞块镜下特点与组织学相似；148例体表淋巴结针吸细胞学中的10例可疑恶性肿瘤通过ICC标记后明确诊断。结论体表淋巴结针吸细胞学诊断准确率较高，细胞涂片结合细胞块、ICC可对淋巴结恶性肿瘤作出较准确的定性及分类诊断。

【关键词】针吸细胞学；体表淋巴结；细胞块；免疫细胞化学

体表淋巴结肿大是临床常见病症，本文通过针吸细胞学(fine needle aspiration cytology，FNAC)这种安全、经济、微创、快速的病理学诊断技术对我院2014年1月～2015年8月148例针吸细胞学检查结果进行分析，同时取活检对照，探讨体表淋巴结针吸细胞学诊断的准确率。

1材料和方法

1.1材料收集我院2014年1月～2015年8月淋巴结穿刺患者148例，均有活检对照，其中男性91例，女性57例，男女比例1.61∶1,年龄1～91岁，平均年龄43.5岁，肿大淋巴结部位：颈侧(包括胸锁乳突肌处)102例、腋窝5例、锁骨上26例、腹股沟区15例。

1.2方法

1.2.1细胞涂片及细胞块制备使用10ml注射器(7号针头)，患者取坐位或卧位，充分暴露肿物，局部碘伏消毒皮肤，左手固定肿块并绷紧皮肤，右手持针刺入肿块，保持注射器持续负压约2～4ml抽吸2～3次(穿刺过程中可改变方向多点穿刺)，穿刺结束解除负压迅速拔出针头，压迫止血5min。如果穿出物较少时将穿出物从针尖推出到载玻片上直接涂片，涂片完成后将载玻片立即用95%乙醇固定30min进行苏木素-伊红染色；如果涂片完成后穿刺针内仍有较多细胞成分时将穿刺针放置约5min，待针筒内剩余穿出物稍凝固后用4%中性甲醛涮洗出来进行固定、石蜡包埋(细胞块制作)、切片、常规HE染色。

1.2.2免疫细胞化学对148例体表淋巴结针吸细胞学中的10例无法直接明确诊断的可疑恶性肿瘤用4um厚的细胞块石蜡切片加作ICC染色：一抗CK5/6、Melan-A、S-100、CD79a、CD20、Ki-67购自福州迈新生物技术公司，CK、CD56、Syn、CgA、TTT-1、HMB45、LCA购自北京中杉公司；二抗显色系统购自丹麦Dako公司，采用EnVision二步法，具体操作步骤按照说明书进行，用已知阳性标本作对照，用PBS代替一抗作阴性对照。

1.2.3免疫细胞化学结果判断CK5/6、CK、Syn、CgA、Melan-A、HMB45、S-100以肿瘤细胞胞浆出现棕黄色或深棕色颗粒为阳性(+)，CD56、LCA、CD79a以肿瘤细胞胞膜出现棕黄色或深棕色颗粒为阳性(+)，TTT-1、Ki-67以肿瘤细胞核出现棕黄色或深棕色颗粒为阳性(+)，CD20以肿瘤细胞胞膜/胞浆出现棕黄色或深棕色颗粒为阳性(+)。结合显微镜下细胞特点、ICC结果及临床资料综合分析对148例体表淋巴结做出准确的针吸细胞学报告。

2结果

2.1细胞学检查结果148例体表淋巴结针吸细胞学中，炎性疾病89例，肿瘤59例。炎性疾病包括慢性淋巴结炎51例、化脓性淋巴结炎13例、坏死性淋巴结炎25例；肿瘤包括转移癌51例、恶性黑色素瘤2例、淋巴瘤6例，其中51例转移癌中角化性鳞状细胞癌18例、腺癌12例、非角化性鳞状细胞癌10例、甲状腺乳头状癌2例、小细胞癌2例、不能明确类型的恶性肿瘤7例；6例淋巴瘤中非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin lymphoma,NHL)5例、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma,HL)1例。

2.2细胞涂片、细胞块形态及ICC结果，见表1，图1～10。

表1　细胞涂片、细胞块形态及ICC结果

图1角化性鳞状细胞癌 HE×200

Figure 1Keratinizing squamous cell carcinoma HE×200

图2角化性鳞状细胞癌CK5/6(+)×100

Figure 2CK5/6 was positive in keratinizing squamous cell carcinoma (×100)

图3非角化性鳞状细胞癌 HE×400

Figure 3Nonkeratinizing squamous cell carcinoma (HE×400)

图4甲状腺乳头状癌 HE×200

Figure 4Papillary carcinoma of the thyroid (HE×200)

图5小细胞癌 HE×200

Figure 5Small cell carcinoma (HE×200)

图6小细胞癌TTT-1(+)×200

Figure 6 TTT-1 was positive in Small cell carcinoma (×200)

图7NHL HE×400

Figure 7NHL (HE×400)

图8NHL HEv400

Figure 8NHL (HE×400)

图9NHLCD20(+)×200

Figure 9CD20 was positive in NHL (×200)

图10NHLCD79a(+)×200

Figure 10CD79a was positive in NHL (×200)

2.3针吸细胞学与组织学检查对照结果148例体表淋巴结针吸细胞学检查中，与组织学对照正确142例，正确率95.95%(142/148)。针吸细胞学及组织学检查结果，见表2。

3讨论

体表淋巴结肿大是临床常见病，是多种疾病的共同表现。引起淋巴结肿大的病因很多，主要分为原发性和继发性两种。FNAC检查是常用的快捷、损伤小、经济、可靠的体表肿块诊断技术，几乎涉及全身所有的器官[1-2]。国内文献报道淋巴结疾病FNAC诊断总准确率为88.2%～94.4%[3-4]，国外报道总准确率为82%～96%[5-7]，我们总结的148例FNAC与活检对照，准确率为95.95%，较国内文献报道略高。我们总结认为6例误诊的主要原因有以下三方面：①坏死严重未查见有效成分：1例鳞状细胞癌淋巴结转移仅查见凝固性坏死；2例坏死性淋巴结炎坏死彻底并伴感染、未见上皮及肉芽肿成分。②漏穿或肿瘤细胞少未查见典型病变:1例坏死性淋巴结炎未穿刺到干酪样坏死物质；1例HL查见大量反应性淋巴细胞而忽视了极少量的R-S细胞。③肿瘤细胞异型性小：1例T细胞来源的NHL一致的小淋巴细胞被误诊为慢性淋巴结炎。

表2　148例针吸细胞学及组织学结果对照

FNAC通常依据单个细胞形态的异性性来诊断，缺乏组织学结构，对于一些低分化肿瘤细胞的诊断很困难，我们在穿刺涂片后将针筒内剩余标本进行4%中性甲醛固定制备细胞块，操作简单效果较好，余小蒙等[8]介绍的一种凝血酶与血清黏集法适用于穿出物较少的细胞块制备。细胞块切片背景清晰、细胞聚集、可连续切片与组织学形态相似并可在此基础上做ICC。我们报道的病例中淋巴结转移性鳞状细胞癌细胞块中查见的癌巢结构，与组织学形态十分相似，角化性鳞状细胞癌中也查见了角化珠结构。值得注意的是在未分化型非角化性鼻咽癌淋巴结转移的FNAC诊断中，细胞学涂片往往仅见少量散在的泡状核及明显核仁的肿瘤细胞，与Reed-Sternber细胞相似容易造成误诊或漏诊，此时细胞块的制备显得尤为重要，不仅可以显示出癌巢结构必要时还可在其基础上做CK等上皮性标记辅助诊断。细胞涂片结合细胞块及ICC检测可以明确疾病的类型，提高FNAC的诊断准确率，对部分有典型形态学特征的转移癌还可以起到提示原发灶的作用，如淋巴结穿刺细胞块中出现分枝乳头状结构提示来源于甲状腺乳头状癌的转移，可做TTF-1、CK19、HBME-1、Galectin等ICC标记进一步印证；FNAC形态与肿大淋巴结的部位相结合也可提示原发灶，如癌巢结构出现在胸锁乳突肌下肿大淋巴结中可以提示肿瘤来源于鼻咽部的可能，Kollur SM等[9]也认为颈部肿大淋巴结FNAC检查对确定转移性鼻咽癌，包括早期诊断和分期非常有用。在淋巴结转移性腺癌FNAC诊断中Koss[10]指出一些细微结构的线索可以提示其来源部位：胞浆内有黏蛋白的大的印戒细胞常与胃肠道肿瘤有关，有长长的、栅栏状的细胞核的柱状肿瘤细胞出现在坏死碎屑中提示结肠原发的肿瘤。

以往单从FNAC形态学很难对淋巴瘤类型进行分类，我们在日常诊断工作中总结认为细胞涂片中B细胞来源的NHL显示出大小一致的幼稚淋巴细胞，细胞染色质细颗粒状、核膜增厚、核仁明显等镜下特点较细胞块镜下显著，根据细胞涂片的形态特点在细胞块基础上做CD79a、LCA、CD20等相关ICC标记可以对NHL来源于B或是T进行简单的分型，但对进一步亚型的分类有困难。虽然目前对淋巴瘤诊治领域内FNAC的临床用途以及是否有助于临床治疗方案决策等仍存争议[11]，但因为FNAC吸出的细胞新鲜，非常适合各种分子病理检测，现国内外有较多相关方面的文献报道[12-14]。活检标本通过甲醛固定可使结核杆菌死亡，FNAC无需甲醛固定，不仅减少开放活检数量、减轻患者的损伤，也可以提高结核杆菌的阳性检出率。Bruijnesteijn等[15]报道102例穿刺标本FQ-PCR检测结核分枝杆菌的敏感性和特异性分别为71.6%和100%。我们科室对FNAC形态学支持结核16例患者行FQ-PCR检测结核杆菌阳性率为62.5%，与文献报道有差距，可能是由于我们统计的病例数较少或采用不同厂家试剂的缘故。

4结论

本文结果显示，在行FNAC检查时应尽可能的制备细胞块，在弥补单靠细胞涂片诊断不足的同时还可以加做相关ICC及分子检测，可以对一些淋巴结恶性肿瘤做出定性及分类的诊断并判断其来源，提高FNAC诊断准确率，将为肿瘤患者的诊断、分型及治

疗方案的制定发挥更大的作用。

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通讯作者：吴宁，主任医师，Tel：08382418446

【中图分类号】R730.49

【文献标志码】A

doi：10.3969/j.issn.1672-3511.2016.07.030

(收稿日期：2015-11-16；编辑：陈舟贵)

Diagnostic accuracy of fine needle aspiration biopsy of surface lymph node：a study of 148 cases

YU qing,NIE jia,WU Ning,et al

(Department of Pathology,The People’s Hospital of Deyang,Deyang 618000,Scihuan,China)

【Abstract】ObjectiveTo study the diagnostic accuracy of fine needle aspiration biopsy of surface lymph nodes.Methods148 patients with surface lymph node obtained by 7 fine needle aspiration were collected to make cell smear and cell block.10 cases of suspicious for malignancy such as Lymph node metastatic melanoma,squamous cell carcinoma,small cell carcinoma,papillary thyroid carcinoma and non-hodgkin lymphoma were diagnosed by immunocytochemistry,which based on cell block.Then,the agreement rate of needle aspiration cytology with the histology diagnosis and cytological characteristics were observed.ResultsThe concordance rate between the cytologic and corresponding histologic diagnoses was 95.95%.10 cases of suspicious for malignancy were confirmed by immunocytochemistry.ConclusionsFine needle aspiration biopsy of surface lymph node carries a high diagnostic accuracy.For detailed subtyping of certain disease entities,cell block combined with Immunocytochemistry is required.

【Key words】Fine needle aspiration cytology; Surface lymph node; Cell block; Immunocytochemistry