血清C1q检测在系统性红斑狼疮疾病活动性判断及狼疮肾炎诊断中的价值

王恝歆，赵志丹，钟白云，谢婷彦，张秋焕，冯斯斯，邓辉

（中南大学湘雅医院 检验科，湖南 长沙 410008）

血清C1q检测在系统性红斑狼疮疾病活动性判断及狼疮肾炎诊断中的价值

王恝歆，赵志丹，钟白云，谢婷彦，张秋焕，冯斯斯，邓辉

（中南大学湘雅医院 检验科，湖南 长沙 410008）

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清C1q水平变化对SLE疾病活动性判断及狼疮肾炎（LN）的诊断意义。方法150例研究对象，根据临床资料，分为SLE组（60例）、其他风湿疾病组（30例）、其他肾脏疾病组（30例）及正常对照组（30例）4组，其中SLE组包括33例LN患者和27例非LN患者。采用免疫透射比浊法测定各组血清C1q水平，并与其他SLE活动性指标进行相关性分析。结果①SLE组的血清C1q水平低于其他风湿性疾病组、其他肾脏疾病组及正常对照组（F=41.428，P=0.000），其中LN组的血清C1q水平低于非LN组（t=-4.262，P=0.000），SLE病情活动期患者C1q水平低于病情稳定期患者（t=-5.159，P=0.000）。②在SLE组中C1q诊断LN的敏感性为66.7%，特异性为59.3%。工作特征曲线的曲线下面积为0.717。③相关分析表明，SLE患者血清C1q水平与C3、C4呈正相关，与SLE疾病活动指数积分呈负相关（r=0.593、0.448和-0.589，P=0.000）。结论血清C1q不仅有助于SLE及LN的诊断，且对SLE的病情评估及疗效判断具有重要参考价值。

系统性红斑狼疮；狼疮肾炎；补体C1q；免疫透射比浊法

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种自身免疫介导的弥漫性结缔组织病，临床表现复杂，病情反复，其病程中产生多种自身抗体并激活补体，导致多器官及系统的损伤。狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）是SLE最常见的并发症及最常见的死亡原因之一［1］，是影响SLE预后的重要因素。LN的早期诊断及病理类型、是否及早治疗、是否及时控制病情活动等直接影响LN的预后。肾穿刺是确诊LN病理类型的金标准，但作为有创性检查，操作具有风险。目前，临床常用的血清标志物在SLE特异性肾脏受累中无明确意义。C1q是补体经典激活途径起始成分C1的一个亚基，在补体经典途径中发挥识别及活化作用［2］。近年来国内外研究发现，血清C1q水平的改变与SLE肾脏损害及病情活动密切相关［3-4］。本研究观察SLE及LN患者的血清C1q水平变化，分析C1q与SLE、LN和SLE病情活动的相关性，旨在探讨C1q在LN诊断及SLE病情活动监测及指导治疗中的作用。

1　资料与方法

1.1研究对象

本研究纳入研究对象150例，分为SLE组、其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组及正常对照组4组。SLE组为2015年2月-2015年5月在中南大学湘雅医院风湿科住院的患者，其中女性50例，男性10例；年龄（35±15）岁。SLE的诊断符合美国风湿病学会1997年修订的SLE分类诊断标准［5］。SLE患者按照SLE疾病活动指数（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）进行病情评估，以SLEDAI积分≥10分［6］作为判定疾病活动的标准，其中SLE病情稳定患者25例，病情活动患者35例。SLE患者符合以下之一并排除其他原因诊断为LN：①24 h尿蛋白定量＞0.5 g/L；②尿有细胞管型或颗粒管型；③肾穿刺活检证实［7］。其中LN患者33例，非LN患者27例。其他风湿疾病组为本院风湿科住院的患者，女性23例，男性7例；年龄（39±14）岁。其中硬皮病4例，原发干燥综合征3例，强直性脊柱炎4例，类风湿性关节炎9例，混合性结缔组织病2例，白塞病2例，韦格纳肉芽肿3例，未分化结缔组织病3例，均符合各疾病相关的国际诊断或分类标准。其他肾脏疾病组为本院肾脏内科住院的患者，女性22例，男性8例；年龄（36±12）岁，包括慢性肾小球肾炎10例，原发性肾病综合征6例，糖尿病肾病7例，IgA肾病5例，紫癜性肾炎2例，均排除狼疮性肾损害。正常对照组30例，女性25例，男性5例；年龄（36±11）岁，均来自本院体检健康人员。各组性别、年龄构成比比较，差异无统计学意义（χ2= 1.667，P=0.644；F=0.620，P=0.603）。

1.2实验方法

抽取待测者清晨空腹静脉血2～3 ml，3 500 r/min离心5 min，收集血清，置于-20℃冰箱快速冷冻备用。采用免疫透射比浊法检测血清C1q浓度，实验仪器为Beckman AU680全自动生化分析仪，C1q测定试剂盒购自上海北加生化试剂有限公司，严格按说明书进行操作；采用免疫速率散射比浊法检测血清C3、C4和C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP），试剂盒均购自美国Beckman Coulter有限公司；同时抽取待测者外周静脉血2～3 ml，经枸橼酸钠抗凝后及时进行改良魏氏法红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）检测。血清C1q浓度正常范围在181.80～285.25 mg/L，以181.80 mg/L为正常下限，测定结果低于该值为本实验设定的阳性结果。

1.3统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，各组间均数比较用方差分析、t检验及配对t检验；计数资料以率表示，用χ2检验，相关关系用Pearson相关系数检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1各组人群血清C1q水平

SLE组、其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组及正常对照组的血清C1q水平比较，经方差分析，差异有统计学意义（F=41.428，P=0.000）。再通过LSD检验法进行两两比较，其中SLE组和其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组、正常对照组血清C1q水平比较，差异有统计学意义（P=0.000），SLE患者的血清C1q水平低于其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组及正常对照组。见表1。

2.2各组人群血清C1q阳性率

SLE组、其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组、正常对照组的C1q阳性检出率分别为55%（33/60）、6.7%（2/30）、3.3%（1/30）和0.0%（0/30），经χ2检验，差异有统计学意义（χ2=53.052，P=0.000）。再通过两两比较，SLE组与其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组、正常对照组的C1q阳性检出率比较，差异有统计学意义（χ2=19.660、22.713和26.053，P=0.000），SLE组的C1q阳性检出率高于其他风湿疾病组、其他肾脏疾病组及正常对照组。见表2。

2.3血清C1q水平与LN的诊断

在SLE组中，LN患者与非LN患者的血清C1q水平分别为（168.78±33.37）和（201.40±44.96）mg/L，经t检验，差异有统计学意义（t=-4.262，P=0.000），LN患者的血清C1q水平低于非LN的SLE患者。LN组与非LN组患者的C1q阳性检出率分别为66.7%（22/33）和40.7%（11/27），经χ2检验，差异有统计学意义（χ2=4.033，P=0.045），LN组的C1q阳性检出率高于非LN组。C1q诊断LN的敏感性为66.7%，特异性为59.3%。工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）的曲线下面积（area under curve，AUC）为0.717，标准误为0.067，其95%置信区间为（0.584，0.849）。见附图。

2.4血清C1q水平与SLE疾病活动性

在SLE组中，活动期与稳定期患者血清C1q、C3、C4水平比较，经t检验，差异有统计学意义（t=-5.159、-4.421和-3.883，P=0.000），活动期患者血清C1q、C3、C4水平均低于稳定期患者。活动期与稳定期患者血清CRP、ESR水平比较，经t检验，差异有统计学意义（t=3.006和2.062，P=0.004和0.044），活动期患者较稳定期患者升高。相关性分析显示，SLE患者血清C1q与C3、C4呈正相关（r=0.593和0.448，P=0.000），与SLEDAI积分呈负相关（r=-0.589，P= 0.000），而与CRP、ESR无相关性。见表3。

表1　各组血清C1q水平比较

表2　各组血清C1q阳性率比较

附图　ROC曲线

表3　不同病情SLE患者血清C1q水平及其他活动指标比较 （±s）

表3　不同病情SLE患者血清C1q水平及其他活动指标比较 （±s）

组别ESR/（mm/h）病情活动组（n=35）　163.15±30.62　431.17±172.56　87.85±65.17　6.62±4.00　34.51±14.62病情稳定组（n=25）　211.88±39.51　688.89±256.37　161.17±76.68　3.84±3.17　25.36±17.19 t值　-5.159　-4.421　-3.883　3.006　2.062 P值　0.000　0.000　0.000　0.004　0.044 C1q/（mg/L）C3/（mg/L）C4/（mg/L）CRP/（mg/L）

2.5活动期SLE患者治疗前后血清C1q水平变化

本研究随访10例入院时病情处于活动期的SLE患者（SLEDAI积分≥10），治疗1个月后病情均明显缓解，患者的血清C1q、C3、C4水平及SLEDAI积分较1个月前比较，经配对t检验，差异有统计学意义（P=0.000）。见表4。

表4　活动期SLE患者治疗1个月后各项指标比较（n=10，±s）

表4　活动期SLE患者治疗1个月后各项指标比较（n=10，±s）

组别SLEDAI积分治疗前　147.59±19.23 371.40±153.46　63.35±40.65　15.60±2.46治疗后　190.37±13.87　613.80±75.33　152.79±48.43 10.70±2.20 t值　-6.738　-6.643　-6.278　11.308 P值　0.000　0.000　0.000　0.000 C1q浓度/ （mg/L）C3浓度/ （mg/L）C4浓度/ （mg/L）

3　讨论

SLE是一种累及多系统、多器官、临床表现复杂、病程迁延反复的自身免疫性疾病，多种自身抗体、循环免疫复合物的产生及补体系统的异常是其主要特征。LN是SLE累及肾脏所导致的免疫复合物介导性肾炎，是SLE最主要的并发症和死亡原因之一［8］。5%～20%的LN患者在10年内可进展为终末期肾脏病（end-stage renal disease，ESRD）［9］。肾脏的受累情况直接影响SLE患者的预后。因此，早期诊断出SLE患者是否合并有肾脏病变，了解其是否处于活动期及其活动程度，对于SLE患者的治疗指导和预后判断具有重要意义。

C1q是分子量为460 kD的糖蛋白，共由6个亚单位组成的，每个亚单位中包含有N端的胶原样序列及C端的球状结构［10］。C1q作为补体经典途径起始成分C1的亚基，能够结合多种配体，具有激活补体经典途径、清除病原体、免疫复合物、凋亡细胞及调理炎症反应等多种功能［11］。早期大量临床观察和动物实验均证实补体C1q的遗传性缺陷是SLE的最强易感因素之一［12-13］。近来研究表明，C1q在SLE，尤其是LN的发病过程中起重要作用［2，14-15］。SLE患者中由于大量补体的异常激活，导致C1q的抗原决定簇胶原样区暴露，从而形成相应的IgG型自身抗体即C1qAb［16］。当血清中C1qAb与C1q的胶原样区结合，形成C1q-C1q抗体复合物，促进炎症介质的释放，导致组织损伤。同时C1q的消耗性减少影响补体系统的正常激活，使免疫复合物及凋亡小体不能有效地转运清除，刺激机体免疫系统产生更多的抗体，出现疾病活动［17］。另外C1q不仅可以与C1q抗体作用，其还可作为主要的靶抗原与一系列的抗-DNA抗体交叉作用，形成免疫复合物沉积于肾脏，加重SLE患者的肾脏损害［18］。

虽然前期研究已肯定C1q与SLE疾病密切相关，但将C1q作为检测指标辅助临床SLE、LN诊断与疾病活动评估的研究国内报道较少。本研究检测各组疾病患者血清C1q水平，比较发现，SLE患者的血清C1q浓度低于其他风湿疾病患者、其他肾脏疾病患者和正常人群，与TAN［3］、周滨等［4］的文献报道一致。同时SLE组中LN患者的血清C1q水平低于非LN患者，进一步分析，C1q在SLE患者中诊断LN 的ROC曲线下面积为0.717，其单项诊断LN的敏感性为66.7%，特异性为59.3%，表明血清C1q水平与SLE患者的肾脏损害有相关性，其可作为诊断LN较好的血清指标。

本研究结果显示，病情活动期患者C1q水平低于病情稳定期患者。血清C1q与C3、C4及SLEDAI积分的相关系数（r=0.593、0.448和-0.589，P＜0.01。进一步证实C1q与SLE疾病活动相关，动态监测血清C1q水平可有效反应SLE患者疾病的活动状况。另外本研究还随访10例住院SLE患者，其在入院时处于病情活动期，伴有发热、关节痛、肾损害等相关临床症状，随着治疗的有效进展，1个月后病情得到明显缓解，复查血清C1q均值高于治疗前水平，同时患者SLEDAI评分、C3、C4水平等指标在治疗前后也出现变化，与患者临床症状好转相符合。其可能原因是当体内炎症免疫反应趋于缓解时，免疫复合物形成减少，C1q浓度回升。

综上所述，血清C1q水平与SLE患者及其肾脏损害相关，对SLE患者进行血清C1q浓度测定，有助于SLE及LN的诊断。同时在SLE患者中，病情活动期患者血清C1q浓度降低，随着治疗的有效进行，病情缓解，血清C1q水平回升，所以监测血清C1q水平的变化，可以为SLE患者病情活动及疗效评估提供可靠依据。

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（童颖丹 编辑）

Significance of detecting serum C1q level in diagnosis of systemic lupus erythematosus with lupus flare and lupus nephritis

Jia-xin Wang，Zhi-dan Zhao，Bai-yun Zhong，Ting-yan Xie，Qiu-huan Zhang，Si-si Feng，Hui Deng
（Department of Clinical Laboratory，Xiangya Hospital，Central South University，Changsha，Hunan 410008，China）

Objective To explore the serum level of complement 1q（C1q）in systemic lupus erythematosus patients and to analyze its significance in diagnosis and prognosis of systemic lupus erythematosus with lupus flare and lupus nephritis（LN）.Methods According to the clinical data，150 cases of subjects were divided into four groups.There were 60 cases in SLE group，30 cases in other rheumatic disease group，30 cases in other kidney disease group and 30 cases in normal control group.The SLE group contained 33 cases of LN patients and 27 cases of non-LN patients.The serum level of C1q was measured by immune transmission turbidimetry.The correlations between the serum level of C1q and other disease activity parameters such as SLEDAI scores，C3 and C4 levels were analyzed.Results The serum level of C1q in the SLE group was significantly lower than that of the other rheumatic disease group，the other kidney disease group and the normal control group（F=41.428，P=0.000）.The LN patients showed a significantly lower level of serum C1q than the non-LN patients（t=-4.262，P=0.000）.The SLE patients in active stage showed a significantly lower level of serum C1q than the stable patients（t=-5.159，P=0.000）.The sensitivity and specificity of C1q to diagnose LN in the SLE group were 66.7%and 59.3%respectively.The area under ROC curve was 0.717.Correlation analysis showed that the serum level of C1q was positively correlated with C3 and C4 concentrations but negatively correlated with the SLEDAI scores（r=0.593，0.448 and-0.589 respectively，andP= 0.000）.Conclusions C1q may not only contribute to the diagnosis of SLE and LN，but also reflect the disease activity and treatment effect.

systemic lupus erythematosus；lupus nephritis；complement 1q；immunity transmission turbidity

R593.241

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.09.011

1005-8982（2016）09-0054-05

2015-12-28

钟白云，E-mail：zbycsu@hotmail.com