结核分枝杆菌T细胞斑点实验对肺结核的诊断价值评析

李刚

【摘要】 目的 分析研究结核分枝杆菌T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）诊断肺结核的临床应用价值。方法 125例疑似肺结核患者， 分别采用T-SPOT.TB、结核分枝杆菌抗体（TB-AB）和痰结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）3种不同方法对其实施检测， 判断确诊肺结核患者， 并对不同方法诊断肺结核的敏感性、特异性进行比较。结果 125例患者中， 符合肺结核临床诊断标准并确诊的有101例， 其中T-SPOT.TB、TB-AB、TB-DNA诊断肺结核的敏感性分别为83.2%、52.5%、43.6%， T-SPOT.TB法敏感性高于TB-AB和TB-DNA法（P<0.05）， 其诊断肺结核的特异性分别为79.2%、62.5%、83.3%， T-SPOT.TB和TB-DNA法特异性高于TB-AB（P<0.05）。结论 T-SPOT.TB诊断肺结核的敏感性和特异性都比较高， 是诊断肺结核的有效手段。

【关键词】 结核分枝杆菌T细胞斑点实验；肺结核；诊断价值

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.18.030

结核病指的是以结核分枝杆菌为主的结核分枝杆菌复合群感染造成的慢性传染性疾病[1]， 对患者的健康造成严重的威胁， 特别是涂阳肺结核患者， 感染性强， 致死率也比较高。有调查数据显示， 我国每年因肺结核致死的患者数量达13万人[2]， 对其进行快速、准确的诊断具有十分重要的意义， 而结核分枝杆菌的检测是诊断肺结核的基本方法。本文抽取2014年1～12月本院收治的疑似肺结核的患者125例作为研究对象， 探讨T-SPOT.TB诊断肺结核的临床应用价值， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 抽取2014年1～12月本院收治疑似肺结核的患者125例作为研究对象， 所有患者均表现出不同程度咳嗽、发热、胸痛、气促、呼吸困难、乏力等症状， 疑诊为肺结核。其中， 男67例， 女58例， 年龄18～76岁， 平均年龄（40.4±12.1）岁。

1. 2 方法 使用真空抗凝管采集患者的新鲜外周血标本5 ml，

2 h内送检， 分别行T-SPOT.TB检测、TB-AB检查及TB-DNA检测。

1. 2. 1 T-SPOT.TB检测 将血液标本与1640培养液混匀， 再加入到含淋巴细胞分离液的离心管中， 经离心分离和培养液洗涤后获得外周血T淋巴细胞， 使用T-SPOT.TB试剂盒（购自北京九强生物科技有限公司）对标本中的外周血单个核细胞（PBMC）进行提取和培养， 并结合计算机辅助成像分析系统对显色后的结果进行阅读。判断标准：以阴性孔斑点数<5个， 且（抗原A/B的检测孔计数-阴性孔计数）≥6个时或者当阴性孔斑点数≥6个， 检测孔斑点数≥2×阴性孔斑点数时视为阳性。

1. 2. 2 TB-AB检查 常规离心分离获得血清后， 使用胶体金法对结核分枝杆菌免疫球蛋白G（IgG）抗体进行检测， 结核分枝杆菌IgG抗体诊断试剂盒购自上海奥普生物医药有限公司。

1. 2. 3 TB-DNA检测 采用无菌容器采集患者清晨的深咳脓性痰液作为痰标本， 行TB-DNA检测。采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法对痰标本中的结核分枝杆菌DNA进行检测， 荧光定量PCR检测试剂盒购自上海克隆生物高技术有限公司， 参照阳性质控品、阴性质控品以及阳性定量参考品的Ct值， 对检测结果进行判断。

1. 3 判定标准 分别观察3种方法的检测结果， 并以2001 年中华医学会结核病学分会制定的《肺结核诊断和治疗指南》为依据[3]， 判断患者是否患肺结核：以患者同时满足下列6项指标中的任意3项可以确诊为肺结核：①患者有典型临床表现， 且经胸部X线检查有典型肺结核征象；②经痰结核菌实时荧光定量检测联合探针检测结果呈阳性；③经血清抗结核抗体检测呈阳性；④排除其他肺结核性疾病；⑤经

抗结核治疗显示有效；⑥经肺外组织病理检查确认存在结核病变。同时符合下列2项指标中的任意1项可以确诊为肺结核：①经肺部（或支气管）组织病理学检查确认有结核病变存在；②支气管肺泡灌洗液（BALF）检出抗酸分枝杆菌。对不同方法诊断肺结核的敏感性、特异性进行计算。

1. 4 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

125例患者中， 符合肺结核临床诊断标准并确诊的有101例， 其中T-SPOT.TB、TB-AB、TB-DNA诊断肺结核的敏感性分别为83.2%、52.5%、43.6%， T-SPOT.TB法敏感性高于TB-AB和TB-DNA法（P<0.05）， 其诊断肺结核的特异性分别为79.2%、62.5%、83.3%， T-SPOT.TB和TB-DNA法特异性高于TB-AB（P<0.05）。见表1。

3 讨论

本文分别采用T-SPOT.TB、TB-AB和TB-DNA等3种不同方法对125例疑似肺结核的患者进行了检测诊断， 结果显示， T-SPOT.TB法诊断肺结核的敏感性最强， 为83.2%， 较TB-AB和TB-DNA都有较大的提高， 这与T-SPOT.TB法检测不受排菌类型与排菌量影响有关， 漏诊率相对较低， 而在检测特异性的比较上， T-SPOT.TB法和TB-DNA法的特异性相对较高， 其中， TB-DNA法能够利用实时荧光定量PCR扩增技术来实现定量检测结核分枝杆菌的目的， 具有较高的诊断准确率， 而T-SPOT.TB法则可从单细胞水平上对分泌抗体（或细胞因子）的细胞进行检测， 通过显色斑点对结核分枝杆菌致敏的T淋巴细胞进行特异性诊断， 还能通过显色斑点数计算针对结核分枝杆菌反应的效应T淋巴细胞计数[4]。

总之， T-SPOT.TB诊断肺结核具有无创、操作简单、重复性强的优点， 兼具良好的敏感性和特异性， 可以作为诊断肺结核的有效方法之一。

参考文献

[1] 尹宏军. 探析X线对肺结核诊断的临床价值. 中国继续医学教育， 2015， 7（7）：193-194.

[2] 李余良. 浅谈结核病临床诊断技术. 中国继续医学教育， 2015， 7（16）：54-55.

[3] 唐小莉， 郭晶， 林霏申. 结核抗体试验与TSPOT-TB试验诊断肺结核的临床价值比较. 中国继续医学教育， 2015， 7（29）：34-36.

[4] 唐硕润， 梁珍. 结核酶联免疫斑点试验结核分枝杆菌 DNA 测定和痰涂片检测在肺结核诊断中的比较研究. 中国当代医药， 2013， 20（34）：122-123.

[收稿日期：2016-01-26]