PNPLA3基因与非酒精性脂肪性肝病发生发展相关性研究

钱建成金燕罗燕施军平

PNPLA3基因与非酒精性脂肪性肝病发生发展相关性研究

钱建成1金燕1罗燕2施军平2

目的分析中国成人非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者PNPLA3基因多态性与肝脏损害的相关性，探讨遗传因素在中国成人NAFLD发生和发展中的作用。方法连续收集106例NAFLD患者和100名年龄、性别相匹配的健康人。用测序分型法和Taqman探针分型法分别测定所有纳入者rs738409、rs2281135的单核苷酸多态性（SNP）。同时测定患者肝功能（ALT、AST、GGT）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平，以及血压、身高、体质量、体质量指数（BMI）；用稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果rs738409突变纯合型GG型NAFLD组（40.6%）高于健康对照组（13.0%），CC型则NAFLD组（17.9%）低于健康对照组（44.0%），差异有统计学意义（P＜0.05)，携带等位基因G的NAFLD患者CG/GG组较CC组具有更高谷丙转氨酶（ALT）[（82.03± 61.25）U/L比（53.84±38.78）U/L，P＜0.05]、谷氨酰转肽酶（GGT）[（83.66±52.92）U/L比（56.42±34.02）U/L，P＜0.01]；rs2281135突变纯合型AA型NAFLD组（24.5%）高于健康对照组（15.0%），野生GG型则NAFLD组（26.4%）低于健康对照组（44.0%），差异有统计学意义（P＜0.05），携带突变基因A的患者较GG纯合子具有更高ALT[（85.52±61.63）U/L比（53.18±32.62）U/L、GGT[（84.08±54.21）U/L比（64.00±37.85）U/L，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论PNPLA3 rs738409和rs2281135多态性与NAFLD遗传易感性有显著相关性；PNPLA3 rs738409等位基因G和rs2281135等位基因A可增加肝损害（ALT、GGT）的风险，且与胰岛素抵抗无相关性。

非酒精性脂肪性肝病；PNPLA3；单核苷酸多态性

随着肥胖症和糖尿病全球化的流行趋势，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）已成为全球性的严重公共卫生问题，不仅可导致肝硬化、肝癌、残疾和死亡，还与2型糖尿病、动脉粥样硬化性心脑血管疾病以及肿瘤的高发密切相关[1]。国内外研究证明，含patatin样磷脂酶域3（PNPLA3）基因突变与NAFLD密切相关[2-5]。本研究通过对NAFLD患者和健康人群rs738409和rs2281135进行基因型检测，分析中国汉族成人非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者PNPLA3基因多态性与肝脏损害的相关性。

1 临床资料

连续收集106例非酒精性脂肪性肝病患者和100名健康体检者，均为2012年1月—2013年1月在杭州市第六人民医院和杭州师范大学附属医院就诊、体检的无血缘关系的浙江地区的汉族人群。诊断标准：NAFLD诊断参照2010年中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组制定的NAFLD诊疗指南[1]。NAFLD组106例，男88例，女18例，平均年龄（39.68±12.47）岁；健康对照组100名，男88名，女12名，平均年龄（36.95±2.70）岁。两组年龄、性别差异无统计学意义（P＞0.05）。NAFLD组体质量指数（BMI）高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；收缩压（SBP）、舒张压（DBP）与健康对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2 方法

2.1 生化指标检测两组均采集次日空腹静脉血，离心后血清标本送检，谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）、空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等指标采用日立7060全自动生化分析仪测定；空腹胰岛素（FINS）采用化学免疫发光法测定；稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。

2.2 基因提取使用血液基因组提取试剂盒（杭州爱思进生物技术有限公司）从EDTA抗凝全血中提取DNA，具体步骤如下：（1）加500μL buffer AP1到1.5mL的离心管中；（2）加250μL抗凝全血到buffer AP1中，用移液器来回吸注几次以彻底溶解残留在吸头上的血液，盖紧离心管子，旋涡震荡10s；（3）100μL bufferAP2旋涡震荡10s；（4）12 000g离心10min；（5）将制备管置于2mL离心管中，将步骤4中的滤液加入到制备管中，12 000g离心1min；（6）弃滤液，将制备管回到原2mL离心管中，加入700μL bufferW1A，室温放置2min，12 000g离心30s；（7）弃滤液，将制备管回到原2mL离心管中，加入800μL已加无水乙醇的bufferW2，12 000g离心1min；（8）将制备管回到原2mL离心管中，加入500μL bufferW2到制备管中，12 000g离心1min；（9）弃滤液，将制备管回到原2mL离心管中，12 000g离心1min；（10）将制备管置于另一洁净的1.5mL离心管中，在silica膜中央加入100μL bufferTE，室温静置1min，12 000g离心1min，洗脱DNA,弃柱，液体-20℃度保留。

2.3 测序分型法对rs738409基因型分型（1）使用Primer Express Software v3.0软件设计引物：Primer A：5'-GCCAGCTGTGGCTACTCTGT-3'；Primer B：5'-TCAGTCCATGAGCCAACAAC-3'，（2）PCR：扩增条件：预变性94°C 3min，变性94°C 30s，退火60.5°C 30s，延伸72°C 1min，终末延伸72°C 5min，变性、退火和延伸设置30个循环。（3）测序：测序仪器为3730xl DNA Analyzer，测序试剂为BigDye terminator v3.1，测序方法为双脱氧链终止法。

表1 两组研究对象一般情况比较（）

表1 两组研究对象一般情况比较（）

注：NAFLD：非酒精性脂肪性肝病；BMI：体质指数；SBP：收缩压；DBP：舒张压

组别NAFLD组健康对照组t值（或χ2值）P值例数106 100性别（男/女）88/18 88/12 1.030 0.100年龄（岁）39.68±12.47 36.95±2.70 1.550 0.123 BMI（kg/m2）26.45±5.75 21.74±2.56 7.473 0.000 SBP（mmHg）122.91±12.14 119.65±11.32 1.973 0.054 DBP（mmHg）79.98±9.14 78.13±8.81 1.398 0.164

表2 两组研究对象生化学指标比较（）

表2 两组研究对象生化学指标比较（）

注：NAFLD：非酒精性脂肪性肝病；ALT：谷丙转氨酶；GGT：谷酰转肽酶；FBG：空腹血糖；TG：总甘油三酯；TC：总胆固醇；LDL-C低密度脂蛋白胆固醇；UA：尿酸；HDL-C：高密度脂蛋白胆固醇

组别NAFLD组健康对照组t值P值例数106 100 ALT（U/L）77.90±58.97 18.51±9.79 9.940 0.000 GGT（U/L）68.43±49.01 20.63±10.81 9.500 0.000 FBG（mmol/L）6.08±1.71 5.25±0.42 4.675 0.000 TG（mmol/L）2.18±1.38 1.09±0.50 7.347 0.000 TC（mmol/L）5.38±1.07 4.55±0.72 6.337 0.000 HDL-C（mmol/L）1.35±0.43 1.49±0.29 -2.569 0.009 LDL-C（mmol/L）3.44±1.02 2.35±0.53 9.395 0.000 UA（mmol/L）382.89±96.61 274.65±73.46 8.602 0.000

2.4 Taqman探针分型法对rs2281135基因型分型（1）DNA模板稀释准备：根据紫外分光光度计所测浓度，将提取的核酸样品用纯水稀释至终浓度为1.33ng/μL；（2）Real-time PCR：依次向96孔反应板中加入Universal PCR Master Mix、SNP Genotyping Assays（ID：C__15875080_10）和稀释好的DNA模板，光学贴膜密封后振荡混匀、离心，放入Real-time荧光定量PCR仪7900HT中，设置反应条件，扩增筛选相应片段。PCR扩增条件：预变性95°C 10min，变性92°C 15s，退火/延伸60°C 1min，变性、退火/延伸设置40个循环；（3）SNP基因型解读分析：将PCR反应后的96孔反应板再次放入Real-time荧光定量PCR仪7900HT中，利用ABI公司The Sequence Detection System（SDS）软件进行读板分析，机器根据检测到的不同荧光强度，可以判断相应样本的SNP等位基因型。

2.5 统计学方法应用SPSS16.0统计软件，计算统计基因频率，结果进行Hardy-Weinberg吻合度测验样本的群体代表性；计数资料用率表示，采用χ2检验，计量资料进行正态分布检验，符合正态分布的计量资料用（） 表示，两组间计量资料的比较用t检验，多组间计量资料的各项指标比较采用单因素方差分析；以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 两组研究对象生化学指标比较NAFLD组谷丙转氨酶（ALT）、谷酰转肽酶（GGT）、空腹血糖（FBG）、总甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、尿酸（UA）高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）低于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），见表2。

3.2 PNPLA3 rs738409基因变异对NAFLD的影响

3.2.1 两组研究对象rs738409基因型和等位基因分布的比较经Hardy-Weinberg吻合度平衡检验，确认rs738409基因频率已达到遗传平衡，样本有群体代表性（P＞0.05）。NAFLD组rs738409CC、CG和GG基因型及等位基因C、G的频率与健康对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表3、图1～2（插页）。

表3 两组研究对象rs738409基因型和等位基因分布的比较[例（%）]

3.2.2 rs738409基因型与脂肪肝患者一般情况和生化指标相关性分析脂肪肝患者中CG/GG基因型ALT、GGT高于CC纯合型，且差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）；CG/GG基因型较CC纯合型拥有更高的TG，差异有统计学意义（P＜0.01）。此外，CG/GG基因型TC、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR均高于CC基因型，CG/GG基因型HDL-C低于CC基因型，但差异均无统计学意义（P＞0.05），见表4。

3.3 PNPLA3 rs2281135基因变异对NAFLD的影响

3.3.1 两组研究对象rs2281135基因型和等位基因分布比较经Hardy-Weinberg吻合度平衡检验，确认rs2281135基因频率已达到遗传平衡，样本有群体代表性（P＞0.05）。NAFLD组rs2281135AA、AG和GG基因型及等位基因A、G的频率与健康对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表5、图3（插页）。

3.3.2 rs2281135基因型与脂肪肝患者一般情况和生化指标相关性分析脂肪肝患者中AG/AA基因型ALT、GGT高于GG纯合型，且差异有统计学意义（P＜0.05）。AG/AA基因型TG、TC、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR均高于GG基因型，AG/AA基因型HDL-C低于GG基因型，但差异均无统计学意义（P＞0.05），见表6。

表4 106例脂肪肝患者rs738409基因型与一般情况和生化指标相关性分析（）

表4 106例脂肪肝患者rs738409基因型与一般情况和生化指标相关性分析（）

注：NAFLD：非酒精性脂肪性肝病；BMI：体质指数；SBP：收缩压；DBP：舒张压；ALT：谷丙转氨酶；GGT：谷酰转肽酶；FBG：空腹血糖；TG：总甘油三酯；TC：总胆固醇；LDL-C低密度脂蛋白胆固醇；UA：尿酸；HDL-C：高密度脂蛋白胆固醇；FINS：空腹胰岛素；HOMA-IR：稳态胰岛素评价指数

rs738409 CC CG/GG t值P值BMI（kg/m2）24.65±6.41 26.89±5.54 -1.552 0.124 SBP（mmHg）121.18±11.68 123.30±11.30 -0.650 0.517 DBP（mmHg）80.71±9.54 79.82±9.67 0.343 0.732 ALT（U/L）53.84±38.78 82.03±61.25 -2.550 0.015 GGT（U/L）56.42±34.02 83.66±52.92 -2.822 0.007 TG（mmol/L）1.99±1.09 3.14±2.16 3.048 0.003 rs738409 CC CG/GG t值P值TC（mmol/L）5.30±1.04 5.80±1.19 1.643 0.104 HDL-C（mmol/L）1.36±0.22 1.34±0.46 0.140 0.889 LDL-C（mmol/L）3.36±0.96 3.86±1.21 1.777 0.079 FBG（mmol/L）5.95±1.60 6.68±2.12 1.559 0.123 FINS（μU/L）13.83±9.45 14.7±9.43 -0.308 0.759 HOMA-IR 3.85±2.68 3.97±2.69 0.152 0.880

表5 两组研究对象rs2281135基因型比较[例（%）]

4 讨论

含patatin样磷脂酶域3（patatin-like phospholipase domain containing 3，PNPLA3）位于22号染色体上,所编码的蛋白又被称为adiponectin，蛋白由481个氨基酸组成的，属于patatin样磷脂酶家族[4]，patatin是一种可溶的蛋白质，在马铃薯根茎中广泛存在，具有脂肪酰化水解酶活性[5]，可能与肝脏脂代谢有关，但就其致病机制仍无详细阐释。部分观点认为PNPLA3作为patatin样磷脂酶家族，考虑其可能有三酰甘油水解酶活性从而影响肝脏脂肪代谢；也有观点认为PNPLA3突变干扰了脂质转运的过程。2008年，Romeo等[6]首次应用全基因组关联分析对NAFLD进行了致病基因的筛选，研究选取西班牙裔美国人、非洲裔美国人和欧洲裔美国人等组成的群体，发现PNPLA3基因rs738409多态性与肝脏脂肪含量的水平增加及肝脏炎症显著相关，与HOMA-IR无相关性,其引起肝损伤机制可能与肝内脂质沉积有关，尤其是脂毒性引起的肝损伤。此外，Speliotes等[7]研究1997例欧洲受试者，发现PNPLA3 rs738409的G等位基因增加NFALD的发生（OR=3.26，P＜0.05），与体质指数、甘油三酯水平、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白或糖尿病无关（P＞0.05）；PNPLA3 rs2281135的A等位基因与血清ALT增加有关（OR=2.43，P＜0.05）。

本研究纳入106例NAFLD患者和100名健康人，分别使用测序分型法和Taqman探针分型法对rs738409和rs2281135进行基因型检测，实验过程中比较两种实验方法，发现Taqman探针分型法操作简单快速，软件分析结果清晰，标出了每个样本的基因型及荧光强度，非常直观，特别适合少量位点大量样本的分型，且全程可自行操作，但是Taqman探针订购周期较长，长达1～2个月，且保存要求高，故不适合时间较紧迫和小样本的实验。而测序分型法直接获得序列信息，在此基础上查找具体SNP位点变化，其特点是准确性高，实验周期短，但费用较大，后期测序必须交予生物公司实行测序服务，不适合大量样本的分型。

表6 106例脂肪肝患者rs2281135基因型与一般情况和生化指标相关性分析（）

表6 106例脂肪肝患者rs2281135基因型与一般情况和生化指标相关性分析（）

注：NAFLD：非酒精性脂肪性肝病；BMI：体质指数；SBP：收缩压；DBP：舒张压；ALT：谷丙转氨酶；GGT：谷酰转肽酶；FBG：空腹血糖；TG：总甘油三酯；TC：总胆固醇；LDL-C低密度脂蛋白胆固醇；UA：尿酸；HDL-C：高密度脂蛋白胆固醇；FINS：空腹胰岛素；HOMA-IR：稳态胰岛素评价指数

rs2281135 GG AA/AG t值P值BMI（kg/m2）25.49±6.01 26.80±5.66 1.001 0.319 SBP（mmHg）120.82±10.61 123.56±12.57 0.925 0.358 DBPmmHg）79.72±8.93 80.06±9.86 0.140 0.889 ALT（U/L）53.18±32.62 85.52±61.63 2.566 0.012 GGT（U/L）64.00±37.85 84.08±54.21 2.130 0.037 TG（mmol/L）2.08±1.19 2.52±1.86 -1.278 0.205 HOMA-IR 3.47±2.17 4.03±2.81 0.738 0.463 rs2281135 GG AA/AG t值P值TC（mmol/L）5.33±1.06 5.58±1.12 -0.827 0.411 HDL-C（mmol/L）1.35±0.47 1.32±0.24 0.263 0.889 LDL-C（mmol/L）3.38±0.97 3.63±1.15 1.777 0.793 FBG（mmol/L）5.99±1.65 6.39±1.93 0.949 0.345 FINS（μU/L）12.31±7.03 15.32±10.03 1.201 0.234

对于rs738409，本实验研究发现NAFLD组和健康对照组均存在CC、CG、GG三种基因型，但各基因型在两组分布不同，NAFLD组突变纯合型GG型高于健康对照组，CC型则低于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），结果表明等位基因G在NAFLD中占比例较大，提示rs738409等位基因G与人群中发生NAFLD具有相关性。比较不同基因型脂肪肝患者的实验室指标发现，携带等位基因G的NAFLD患者CG/GG组较CC组具有更高ALT、GGT和TG（P＜0.05，P＜0.01），说明rs738409等位基因与脂肪含量的水平增加及肝脏炎症有关系，这与Romeo等[6]研究结果一致。另一方面虽然CG/GG组较CC组具有更高的FBG、FINS、HOMA-IR，但是差异没有统计学意义（P＞0.05），说明与胰岛素抵抗无关，其造成肝损的机制可能是通过其他生物路径[2，8-13]，这与Kantartzis K等[9]的研究结果一致。类似的结果出现于rs2281135，AA、AG和GG基因型均在脂肪肝组和健康对照组中检出，NAFLD组突变纯合型AA型高于健康对照组，野生型GG则低于健康对照组，且差异有统计学意义（P＜0.05），结果表明等位基因A在NAFLD中占比例较大，提示rs2281135等位基因A与人群中发生NAFLD具有相关性，对NAFLD组不同基因型的生化指标作比较，同样发现携带突变基因A的患者较GG纯合子具有更高ALT、GGT，且有统计学意义（P＜0.05），不同于rs738409的是TG差异无统计学意义（P＞0.05）。因此，通过本研究，我们认为在浙江地区的汉族人群中，PNPLA3 rs738409和rs2281135多态性与NAFLD遗传易感性有显著相关性，同时PNPLA3 rs738409等位基因G和rs2281135等位基因A可增加肝损害（ALT、GGT）的风险，且与胰岛素抵抗无相关性。

［1］中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.非酒精性脂肪性肝病诊断标准［J］.中华肝脏病杂志，2010，18（3）：163-166.

［2］Liang H，Cai M，BiY，et al.A single nucleotide polymorphism（SNP）rs2072907 in the adiponutrin gene（ADPN）was not associated with obesity and type 2 diabetes in Chinese populationt［J］.Diabetes Res Clin Pract，2009，85（3）：e37-e39.

［3］范建高，施军平.2011年非酒精性脂肪性肝病治疗进展［J］.实用肝脏病杂志，2012，15（2）：84-86.

［4］Baulande S，Lasnier F，Lucas M，et al.Adipo-nutrin,a transmembrane protein corresponding toa novel dietary-and obesity-linked mRNA specifi-cally expressed in the adipose lineage［J］.J Biol Chem，2001，276（36）：33336-33345.

［5］Rydel TJ，Williams JM，Krieger E，et al.The crystal structure，mutagenesis,andactivity studies reveal that patatin is a lipid acylhy-drolase with a Ser-Asp catalytic dyad［J］.Biochemistry，2003，42（22）：6696-6708.

［6］Romeo S，Kozlitina J，Xing C，et al.Genetic variation in PNPLA3 confers suscep-tibility to nonalcoholic fatty liver disease［J］.Nat Genet，2008，40（12）：1461-1465.

［7］Speliotes EK，Butler JL，Palmer CD，et al.PNPLA3 Variants Specifically Confer Increased Risk for Histologic Nonalcoholic Fatty Liver Disease But Not Metabolic Diseaset［J］. Hepatology，2010，52（3）：904-912.

［8］Sockoian S，Gustavo GO，Burgueno AL，et al.Anonsynonymous gene variant in the adiponutrin gene is associated with nonalcoholic fatty liver disease severity［J］.J Lipid Res，2009，50（10）：2111-2116.

［9］Kantartzis K，Peter A，Machicao F，et al.Stefan N.Dissociation between fatty liverand insulin resistance in humans carrying a variant of the patatin-like phospholipase 3 gene［J］.Diabetes，2009，58（11）：2616-2623.

［10］Yuan X，Waterworth D，Perry JR，et al.Population-based genome-wide association studies reveal six loci influencing plasma levels of liver enzymes［J］.Am J Hum Genet，2008，83（4）：520-528.

［11］Valenti L，Alisi A，Galmozzi E，et al.I148M Patatin-Like Phospholipase Domain-Containing 3 Gene Variant and Severity of Pediatric Nonalcoholic Fatty Liver Diseaset［J］. Hepatology，2010，12（4）：1274-1280.

［12］Johansson LE，Lindblad U，Larsson CA，et al.Polymorphisms in the adiponutrin gene are associated with increased insulin secretion and obesity［J］.Eur J Endo crinol，2008, 159（5）：577-583.

［13］Johansson LE，Johansson LM，Danielsson P，et al.Genetic variance in the adiponutrin gene family and childhood obesity［J］.PLoS One，2009，4（4）：e5327.

（收稿：2015-12-20修回：2016-03-05）

Correlation of the PNPLA3 Gene with Non-alcoholic Fatty Liver Disease

QIAN Jiancheng1,JIN Yan1,LUO Yan2,SHI Junping2.1 Department of Infectious Disease,Tongde Hospital of Zhejiang Province,Hangzhou (310012),China;2 Laboratory of Translational Medicine,the Affiliated Hospital of Hangzhou Normal University, Hangzhou(310015),China

ObjectiveTo analyze the correlation of adult non-alcoholic fatty liver disease（NAFLD）patients' PNPLA3 gene polymorphism with liver damage,and to explore the genetic factors in the occurrence and development in Chinese NAFLD patients.MethodsHundred and six patients with NAFLD and 100 age-and sexmatched healthy people were continuously collected in this study.Sequencing typing method and Taqman probe typing method were used to measure the single nucleotide polymorphism（SNP）of rs738409,rs2281135 in subjects. Subjects'liver function（ALT,AST,GGT）,fasting blood glucose（FBG）,fasting insulin（FINS）,total cholesterol（TC）, triglyceride（TG）,high density lipoprotein cholesterol（HDL-C）,and low-density lipoprotein cholesterol（LDL-C）levels were determined and blood pressure,height,weight,body mass index（BMI）were measured;homeostasis model assessment insulin resistance index（HOMA-IR）was calculated.ResultsThe PNPLA3 rs738409 genotype GG was observed in 40.6%patients of NAFLD group and in 13.0%healthy subjects;the genotype CC was observed in 17.9%patients of NAFLD group and in 44.0%healthy subjects,both with a significant difference（P＜0.05）.Patients carrying the G allele（CG/GG）in NAFLD group had significant higher levels of ALT and GGT compared with patients with CC genotype（ALT：82.03±61.25U/L vs 53.84±38.78U/L and GGT：83.66±52.92U/L vs 56.42±34.02U/L; all P＜0.05）.The PNPLA3 rs2281135 mutant genotype AA was observed in 24.5%patients in NAFLD group and in15.0%healthy subjects;the GG type was observed in 26.4%patients in NAFLD group and in 44.0%healthy subjects,both with a significant difference（P＜0.05）.Patients carrying the A allele in NAFLD group had higher levels of ALT and GGT compared with patients with GG homozygotes with a statistically significant difference（ALT：85.52±61.63U/L vs 53.18±32.62U/L and GGT：84.08±54.21U/L vs 64.00±37.85U/L;all P＜0.05）.ConclusionPNPLA3 rs738409 and rs2281135 polymorphism is correlated with NAFLD genetic susceptibility.Patients with PNPLA3 rs738409 G allele and rs2281135 allele A may have higher risk of liver damage（ALT,GGT）,but no insulin resistance.

non-alcoholic fatty liver disease;PNPLA3;single nucleotide polymorphisms

1浙江省立同德医院感染科（杭州310012）；2杭州师范大学附属医院转化医学平台（杭州310015）

施军平，E-mail：davidshi0571@126.com