规模羊场小反刍兽疫弱毒活疫苗免疫效果的监测评估

黄布敏，胡远洲，杨 琳，左康扬，史开志

(1.贵州省开阳县动物疫病预防控制中心，开阳 550300;2贵州省畜牧兽医研究所，贵阳 550005)

规模羊场小反刍兽疫弱毒活疫苗免疫效果的监测评估

黄布敏1，胡远洲1，杨 琳1，左康扬1，史开志2

(1.贵州省开阳县动物疫病预防控制中心，开阳 550300;2贵州省畜牧兽医研究所，贵阳 550005)

为评估规模化羊场小反刍兽疫弱毒活疫苗免疫效果，对开阳县2个绵羊养殖场、1个山羊养殖场的羊群进行小反刍兽疫活疫苗免疫接种，采用C－ELISA方法对3个免疫羊群免疫抗体消减进行监测。结果显示，免疫后羊群无不良反应和异常情况发生，1次免疫后30 d，3个养殖场免疫抗体平均阳性率为95.11%，免疫120 d后抗体阳性率为98.22%，免疫270 d后抗体阳性率为99.56%。结果表明，小反刍兽疫活疫苗免疫安全，且能诱导较强的体液免疫应答，免疫抗体持续时间长;弱毒活疫苗免疫是预防小反刍兽疫的一种可行方法。

小反刍兽疫;规模化羊场;弱毒活疫苗;免疫评估

小反刍兽疫(peste des petits ruminants，PPR)是由小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus，PPRV)引起的一种急性、烈性、接触性传染病，临床上主要发生于绵羊、山羊、美国白尾鹿等小反刍动物，牛一般呈亚临床感染不产生临床症状，猪可被实验感染，未发现人被感染的病例。病羊以体温升高，眼鼻出现分泌物，口炎，肺炎和腹泻为主要特征，急性感染病例体温可升至41℃以上并持续3～5天，鼻腔常流脓性黏液，呼出恶臭气体。世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物疫病，我国亦将其列为一类动物疫病［1］。

PPRV可通过直接、间接接触或气溶胶传播，传染源主要为患病动物和隐性感染动物，感染畜的分泌物和排泄物均含有病毒［2］。为降低PPR对养羊业的威胁，提高羊群抵御疫病风险的能力，我们对开阳县3个规模化羊场进行PPR弱毒活疫苗免疫接种试验，以了解该疫苗的安全性，同时从体液免疫角度评估其有效性，为PPR 的疫苗免疫防控提供参考和借鉴。

1 材料与方法

1.1 材料 小反刍兽疫弱毒活疫苗由新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产;小反刍兽疫ELISA抗体检测试剂盒由法国ID－VET公司(ID ScreenPPR Competition)生产;450只试验羊由开阳县3个规模化非免疫羊场提供，其中绵羊场2个、山羊场1个。见表1。

表1 试验羊情况

1.2 方法

1.2.1 非免疫羊群感染情况检测:为排除野毒感染情况，通过ELISA方法对450只试验羊进行野毒感染抗体检测，判断羊群是否感染PPR，排除可能的野毒感染对试验的影响，所有羊抗体检测阴性后，开始疫苗接种试验。

1.2.2 免疫后羊群反应观察及安全性评估:分别对450只试验羊进行耳号标记和准确记录，按照疫苗说明书要求对试验羊进行疫苗接种，疫苗接种后7 d，密切观察试验羊食欲、饮水、精神状态、发病情况、体温变化等指标，评估疫苗接种的安全性。

1.2.3 免疫抗体消减监测与基于体液免疫的免疫效果评估:疫苗免疫后30、120、270 d分别采集试验羊血清，通过ELISA方法检测疫苗免疫抗体，试验操作按ID ScreenPPR Competition小反刍兽疫ELISA抗体检测试剂盒使用说明书进行。同时对该期间羊群的发病情况进行跟踪，调查小反刍兽疫的发生情况。

2 结果

2.1 试验羊野毒感染检测结果 通过ELISA方法，对试验羊野毒感染情况进行检测，结果发现，450只试验羊样本检测结果均为阴性，羊群未感染PPR，符合试验要求。

2.2 免疫后羊群反应观察及安全性评估 对开阳县的3个规模养羊场的羊群进行小反刍兽疫疫苗接种免疫后，经7 d密切观察，所有免疫羊群无不良反应和任何异常情况发生，此结果说明，该疫苗使用临床安全。

2.3 免疫抗体消减监测与基于体液免疫的免疫效果评估 在免疫后30、120、270 d分别采集血清样品通过ELISA方法对试验羊小反刍兽疫抗体进行检测，结果见表2。

表2 试验羊免疫抗体水平监测情况

从表2可见，疫苗免疫后30 d，3群试验羊PPR免疫抗体平均阳性率达95.11%，其中2号湖羊场阳性率最高达到96%，黑山羊场最低为93%;此后120 d，3群试验羊抗体阳性率均呈上升趋势;直至免疫后270 d，2、3号羊场试验羊抗体阳性率上升至100%，但1号羊场抗体阳性率下降至97.5%。总体来看，试验羊群PPR抗体阳性率均处于较高水平。

整个试验过程中，450只试验羊均正常生长发育，未出现死亡，也未发生过疑似PPR病例，进一步说明弱毒活疫苗免疫是安全的。

3 讨论

3.1 对贵州省养羊业而言，PPR是一种新出现的疫病，在防疫上还缺少有效的应对策略以供参考。通过本设计试验，对疫苗免疫防控进行综合评估，结果发现弱毒活疫苗可诱导较强的体液免疫应答，使用过程中试验羊临床健康，不论是绵羊还是山羊，均得到相似的试验结果。

3.2 免疫抗体诱导是疫苗免疫效果评估的重要指标。Vinayagamurthy Balamurugan等［3］在不同间隔时间对免疫小反刍兽疫疫苗的山羊进行抗体滴度检测，结果表明在接种疫苗后21天，抗体检出率达到高峰且能稳定持续至免疫后310 d以上，这与我们的研究结果相类似。另有报道显示，PPR弱毒活疫苗免疫26个月后，抗体检出率仍能保持在85%以上，表现为持久的保护性［4］。李彦芳等［5］对哈密市部分地区小反刍兽疫免疫抗体进行监测，结果显示平均免疫合格率为83.98%，最高为93.13%，最低为67.14%。杨仕标等［6］对西藏部分免疫区小反刍兽疫免疫抗体进行监测，结果显示免疫区阳性率最高为54.70%，相对偏低。宋红莲等［7］对易门县免疫PPR疫苗后抽检60份样品进行免疫效果监测，免疫抗体合格率为98.33%。从这些监测结果结合本试验，可说明PPR活疫苗不仅免疫诱导能力强，而且免疫持续期长，对PPR的控制是一种较为可行的选择。

参考文献:

［1］信爱国，杨仕标，向文彬.小反刍兽疫研究进展［J］.中国预防兽医报，2003，(25):152～155.

［2］Abubakar M，Arshed M J，Zahur A B，et al.Natural infection withpeste des petits ruminants virus:a pre and post vaccinal assessment following an outbreak scenario［J］.Virus Res，2012，167:43～47.

［3］Vinayagamurthy Balamurugan，Arnab Sen，Gnanavel Venkatesan，et al.Study on Passive Immunity:time of Vaccination in Kids Born to Goats Vaccinated Against Peste des petits ruminants［J］.VIROLOGICA SINICA，2012，27(4):228～233.

［4］薛青红，印春生，李宁，等.小反刍兽疫活疫苗效力评价［J］.中国兽医学报，2011，(9):1 276～1 278.

［5］李彦芳，玉苏甫，温倩木，等.小反刍兽疫疫苗免疫效果评价［J］.中国畜牧业，2014，(12):62～63.

［6］杨仕标，赵文华，王金萍，等.免疫区小反刍兽疫免疫抗体监测与分析［J］.中国动物保健，2010，(10):8～10.

［7］宋红莲，徐阳，孔绍国，等.易门县小反刍兽疫免疫效果的调查［J］.中国畜牧兽医文摘，2015，31(5):118～119.

Monitoring and Evaluation of the PPR Immune Effect with Attenuated Vaccine on Large－scale Breeding Farm

Huang Bumin1，Hu Yuanzhou1，Yang Lin1，Zuo Kangyang1，Shi Kaizhi2
(1.Kaiyang Animal Disease Prevention and Control Center，Kaiyang Guizhou 550300，China;2.Guizhou Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Guiyang Guizhou 550005，China)

In order to evaluate the attenuated vaccine immune effect of Peste des Petits Ruminants(PPR)，the immune antibody of one goat farm and 2 sheep farms in Kaiyang conty were detected by competitive ELISA.The results showed that all sheep and goats had no any adverse effects and exceptional conditions after immune，the PPRV average antibody positive rate in 3 farms reached 95.11%through one time immune，98.22%and 99.56%after 120 d and 270 d vaccination.All results indicated the attenuated vaccine is safe，which can induce strong immune response and have a long immune protection time，use this immune to prevent PPR is feasibel.

Peste des Petits Ruminants(PPR);Large－scale Goat/sheep Breeding Farm;Attenuated Vaccine Immune Evaluation

S858.26

A

1007－1474(2016)01－0008－03

2015－10－12

贵州省科技厅科技特派员计划项目(黔科合体特派C［2012］4030号)

黄布敏(1985—)，女，硕士，助理兽医师，主要从事动物疫病诊断与防控。